白细胞计数sop文件

1 检验目的:
1.1 参考值：4.0-10.0X109/L
1.2 临床意义：
1.2.1 生理变化：因年龄，日夜变化，运动，疼痛与情绪作用，妊娠分娩等因素有所变
化。

1.2.2 病理变化：
1.2.2.1 增高：大部分化脓细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增
多、传染性淋巴细胞增多，急性出血、组织损伤、大手术、白血病等。

1.2.2.2 减低：病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再障、极度严重感染，防射
线，肿瘤化疗后，非白血性白血病等。

2 检验程序的原理：
2.1 XE-2100采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区
分，即前向散射光，侧向射散光和侧向光和侧向荧光。

前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。

2.2 DIFF通道：表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板，部分溶解白细胞。

第2种试剂
使核酸染上颜色。

XE-2100的DIFF通道可将白细胞分成4类。

在STROMATOLYSER-4DL 试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板，并在白细胞膜上打出小孔。

在STROMATOLYSER-4DL试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细胞器结合，经波长633nm的激光照射，所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。

在在STROMATOLYSER-4DL试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合，根据侧向散射光信号强度，能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。

2.3 WBC/BASO通道：在XE-2100中，此通道运用前向和侧向散射光信号。

酸性试剂可引
起除嗜碱性粒细胞外的红细胞(影红细胞)、血小板(影血小板)和白细胞(裸核)溶解和皱缩。

因而此通道可检测白细胞数和嗜碱性粒细胞数。

在STROMATOLYSER-FB试剂中的表面活性剂作用细胞可形成影红细胞，影血小板和除嗜碱性粒细胞外的裸核白细胞。

根据前向散射光信号，使嗜碱性粒细胞和其他细胞容积差异而区分。

前向散射光强度代表细胞体积，侧向散射光代表细胞殘余物复杂性。

嗜碱性粒细胞形成独立群体。

核殘余物也可从影细胞中区分出来。

嗜碱性粒细胞和裸核数之和代表白细胞总数。

有核红细胞也包括在内。

2.4 NRBC通道：在NRBC通道中，表面活性剂可使红细胞和血小板皱缩，使白细胞和有
核红细胞核酸染色。

XE-2100应用半导体激光束照射标本，根据侧向荧光和侧向散射光信号来计数有核红细胞。

在在STROMATOLYSER-NR试剂中表面活性剂可溶解红细胞膜，仅留下有核红细胞核，白细胞膜不被溶解，胞质完整。

在STROMATOLYSER-4DL试剂中的
聚次甲基荧光染料，可渗入白细胞胞膜，使细胞器染上颜色。

根据荧光强度的差异可将细胞分成2组，根据前向散射光信号、容积差异可将有核红细胞和影细胞区分出来。

3 性能参数：
3.1精密度（重现性）
全血模式：3.0%或更低(4.0 × 103 / 微升或更高)
末梢血模式：5.0%或更低(4.0 × 103 / 微升或更高)
3.2准确度：
在±3%范围内，或在±0.20 × 103 / 微升范围内（在±10%之内）
3.3线性
全血模式：在±3.0%或±0.3 × 103 / 微升范围内（0 – 100.0 × 103 / 微升）末梢血模式：在±5.0%或±0.5× 103 / 微升范围内（0 – 100.0 × 103 / 微升）
4 原始样品系统
4.1受检者的准备：病人避免采血前剧烈活动。

4.2用含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管，肘静脉采血1ml，轻轻混匀，室温4小时内完成
检测，不能在4小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（2℃~8℃）中保存，8小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。

4.3注意事项：
4.3.1防止溶血：混匀时不可用力震荡，避免产生大量气泡。

4.3.2避免淤血：止血带压迫时间不宜过长，最好不超过半分钟。

4.3.3标本不能从输液管中或输液手的同侧静脉采集。

4.3.4穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免
疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。

4.3.5抗凝管应贴有标签，并清楚注明病人姓名。

5 容器和添加物类型：
含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管,有条形码的贴上条形码。

乳胶手套、试管架
6 要求的设备和试剂
6.1设备：Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪
6.2试剂厂商：Sysmex公司
6.2.1试剂及包装：配套试剂包 CELLCLEAN 清洁液 (CL-50)
6.3试剂稳定性：
6.3.1原包装试剂储存在15-30℃，至标签所示失效日期。

6.3.2试剂如出现混浊或絮状物则失效。

7校准程序（计量学溯源性）
7.1校准品商品名称：SCS-1000
7.2校准前检查：
7.2.1确认校准品瓶上批号和有效期于靶值表一致，没有过期。

7.2.2确认是否按厂家建议进行仪器保养。

尽可能不要再进行保养或试剂更换的当天进
行校准或校准校验。

7.2.3浏览最近的质控数据，确保分析仪性能稳定。

7.2.4在仪器上登记试剂的批号和有效期。

7.2.5进行自动清洗，确认空白表示没有超出规定范围。

7.3校准准备：
请严格遵守以下步骤，这对于保证SCS-1000校准品的性能正确非常重要。

从冰箱或包装取出1瓶SCS-1000，放置30分钟使其温度升至室温（18-25℃）。

保持瓶子直立的状态将其放在双手掌中轻轻滚动20秒，然后将其颠倒后再滚动20秒以上。

轻轻来回倒转12次使其混合均匀，确保所有细胞都已经悬浮起来。

进行分析前在平面上静置瓶子15秒，使泡沫散去。

7.4校准步骤：
注意：SCS-1000的分析必须在开放模式进行，此时仪器设定为维修程序-“特殊模式”-菜单的“质控血模式”。

使用质控血模式可防止出现WBC通道错误。

关于进入维修程序的方法，请咨询技术服务代表。

7.4.1在开放模式下连续进行6次分析。

在分析当中不要混匀校准品。

7.4.2每次分析结束后，使用洁净无屑的纸巾或纱布拭净瓶子及瓶盖螺纹，之后盖上瓶
盖。

7.5平均值的计算及校核数据
7.5.1排除第1次分析结果。

7.5.2计算其余5次分析结果的平均值，确认各参数的平均值都在可接受极限范围内。

7.5.3如果某个参数的平均值超出了可接受极限范围，并内部质控和/或室间质控的结果
也显示出类似偏差，表示需要重新校准分析仪。

7.5.4计算新的校准设定系数。

7.6校准的频率：
7.7.1一般情况：每年校准2次上半年一次下半年一次。

7.7．2其他情况：试剂商更改，排除各种原因后的质控未能通过，主要部件更换后，仪
器远距离搬动，或严重故障须重新校准。

仪器进行维修和保养校准后需做质控，校准后比对失败，工程师应验证质控品是否变质，在市内质控历史数据和室间质控数据表示良好时校准品可能变质，需更换重新校准，直至通过校准。

7.8校准验证：校准后及时进行验证，内容包括：精密度、线性、校准前后病人标本结
果比对、新鲜血close和open进样模式结果比对、质控、白细胞分类手工和仪器分类方式的比对，由实验室操作人员完成。

8 程序步骤
8.1 打开电脑，单击OK，同时按下Ctrl，Alt及Delete键进行登录。

8.2 在登录框中单击OK，出现XE-2100登录信息，在用户名一栏中键入“admin”，并单
击OK。

8.3 检查废液是否已满，并倒空。

8.4 开主机电源并进行登录。

8.5 仪器进行自动冲洗及本底检测，如本底在范围以内，主机屏幕上将出现登录信息。

如本底超出正常范围，将出现错误提示。

需要在登录完成后，再次进行自动冲洗。

8.6 按一下主机上的NUM/ALPH鍵切换为字符输入，然后，在登录名一栏中鍵入“ADMIN”，
登录操作菜单。

8.7 每天测试质控全血，从冰箱取出质控全血，包括e-check两支，临检中心质控品一
支，室温放置15分钟后检测。

选择QC，分别选中相应质控全血的批号，以手工进样方式检测各质控品，每次检测结束选择OK确认，在主机电脑上观察质控结果，如在靶值范围，则可进行样本测试；如失控则需寻找失控原因，解决后再重做质控，各参数完全在控方可检测样本。

8.8 标本检测：选sampler键，以架号为1，位置号为1，起始样本号为1，检测方式为
自动进样，检测参数为CBC+DIF,将样本依次放入样本架内，选sampler即开始检测。

8.9 开始分析标本。

9 质量控制程序：
9.1质控品：
9.1.1质控品品牌：Sysmex（中、低值2个水平e-CHECK）
9.1.2储存条件： 2℃～8℃（每日须复核一次冰箱温度）。

9.1.3使用期限： Sysmex e-CHECK质控开瓶后14天。

9.1.4质控品开启后应注明开启日期，失效期并签名。

9.2质控频率：每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析（至少做两个水平质控）。

9.3质控操作：从冰箱中取出e-CHECK，使用前检查有效期及状况（如极度溶血或失效，
应及时更换）,在室温环境下（18～30℃）静置15分钟。

保持瓶子直立状态在双掌中轻轻滚动10次，将其颠倒再滚动10次，此过程反复8次，总共持续两分钟左右，再将质控品上下颠倒10次混匀至红细胞完全混合，在[质控分析]上选择相应批号质控文件，然后选择“执行”；将质控物混匀后置于手工吸样针下方，按绿色“START”开关；分析完成后，接受数据；在IPU中单击“质控”，查看质控图。

9.4质控期望值：至少满足2个e-CHECK在靶值±极限值内，记录质控结果后开始做标
本。

9.5失控时应采取的措施：质控结果超出期望值时，需查找原因，检查质控品是否在有
效期内，过期或近过期需更换新的质控品,检查试剂情况，是否需更换。

再检查仪器的各项参数是否在控，如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师，责任人需通知组长。

与此同时联系急症病人相关医生，如为急诊标本及时送往门急诊化验室检测。

直至质控通过，开始做标本。

9.6每次失控必须分析原因，记录处理过程并签名。

失控记录夹入指定的文件夹内保存，
保存期为二年。

9.7更换批号后靶值设定：取开始10次QC结果，计算均值，为靶值，靶值应落在厂商
提供的范围内，以累计6个月CV%均值（或近两个月CV%较大值），通过均值乘以CV%=1SD, 质控范围设定为2.7SD。

由组长或组长指定人员负责计算。

9.8定期打印质控曲线，曲线上注明使用质控品的批号和效期，并签上责任人姓名。

9.9所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。

9.10每日由操作员记录质控状况与X-barm记录于记录本。

10 干扰（如乳糜血、溶血、胆红素血）和交叉反应
10.1严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高。

10.2红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)
或假性减低(激光法)和MCV假性增高。

10.3冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高。

10.4有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低。

11 生物参考区间
参考区间（正常人群参考范围）是检测正常个体得出的。

每一个参数的范围用95%可信区间计算而得。

*女性的年龄范围为21-41岁，平均年龄为24.5岁.
12 患者检验结果的可报告区间
WBC：〜109/L
13 警告/危机值
13.1危机值：如遇以下危急值，应上报临床科室，并记录在危急值报告记录表(电话上
报时接听者需复述)：
WBC < 1.0´109/L或WBC > 40.0´109/L。

13.2异常报警信息：
WBC异常：
WBC Abn Scattergram WBC散射图异常Leukocytosis 白细胞增加Neutropenia 嗜中性粒细胞减少Neutrophilia 嗜中性粒细胞增加Lymphopenia 淋巴细胞减少Lymphocytosis 淋巴细胞增加Monocytosis 单核细胞增加Eosinophilia 嗜酸性粒细胞增加Basophilia 嗜碱性粒细胞增加Leukocytopenia 白细胞减少
WBC怀疑：
Blasts? 原始细胞Immature Gran? 未成熟粒细胞
Left Shift? 左移Atypical Lympho? 异形淋巴细胞
Abn
异常淋巴/原始淋巴NRBC 有核红细胞
Lympho/L-Blasts?
14 安全防护措施
14.1使用时的特殊要求
XE-2100D仅适用于人血或人工质控血的体外分析，无其它指定用途。

使用条件还包括按规定拆卸清洁和保养。

14.2通用要求
操作前先阅读本手册。

弄清手册和仪器上有应注意的标志。

妥善保管手册以备今后参考。

必须按照手册说明启动仪器。

14.2.1长发、手指和衣服必须与旋转部件保持一定距离；如果仪器发出异味或冒烟，立
即关掉总开关，拔掉电源线。

14.2.2不要让仪器中的血样或试剂溅出，也不要让其它东西掉入仪器。

否则，会引起短
路。

如果发生上述情况，请立即关掉总开关，拔掉电源线，并与Sysmex代理商联系。

14.2.3请勿触摸仪器的电路，尤其不能用湿手，否则会有触电危险。

14.2.4仪器必须连接在电压正确的电源插座上，并注意接地。

14.2.5避免损坏电源线。

勿将任何设备压在电源线上。

不能拉电源线。

14.2.6在连接其它设备（主计算机、打印机）之前必须将仪器电源关闭。

14.3安装
14.3.1仪器必须在干燥、无灰尘的地方安装。

14.3.2防止水溅到仪器上。

14.3.3勿将仪器暴露于温差大和太阳直射的地方。

14.3.4避免震荡和振动。

14.3.5安装地点必须通风良好。

14.3.6避免在发出噪音的设备旁安装仪器，如录音机、离心机等。

14.3.7不能在贮存化学品和产生气体的地方安装仪器。

14.4防止感染
14.4.1一般说来，仪器所有的部件和表面都有潜在的传染性。

14.4.2操作、保养、服务或修理仪器时必须穿防护衣，戴橡皮手套。

工作完毕后，用消毒液洗手。

14.4.4勿徒手接触废弃物，以及接触过废弃物的部件。

14.4.5如果不小心接触了有传染性的物质或表面，立即用水彻底清洗皮肤，然后按照实验室消毒规程操作。

14.4.6即使是质控品，也是有传染性的。

进行质控时，也应穿防护衣，戴橡皮手套。

14.5试剂处理
14.5.1检查试剂包装上的标志。

14.5.2避免直接接触试剂。

试剂会刺激眼睛、皮肤和粘膜。

14.5.3如果皮肤接触了试剂，立即用大量清水冲洗。

14.5.4如果眼睛接触了试剂，立即用大量清水冲洗，并立即就医。

阅读试剂安全使用说明书。

14.5.5实验室建立一整套急救措施是非常必要的。

14.5.6避免试剂与灰尘、污物或细菌接触。

14.5.7试剂必须在有效期内使用。

14.5.8妥善处理试剂，防止产生气泡。

请勿摇晃！试剂运输后不能马上使用。

14.5.9勿将试剂溅出。

如果溅出，用布擦干。

14.5.10 CELLPACK稀释液是一种优良导体。

如果不小心在电线或设备旁将稀释液打翻，很容易触电。

请关闭电源，拔掉插头，清除稀释液。

14.5.11 CELLCLEAN（或漂白剂）是强碱性清洁剂。

请勿接触皮肤或衣服。

一旦发生，立即用大量清水冲洗皮肤或衣服，以免造成皮肤损伤或衣服损坏。

14.5.12 CELLCLEAN清洁剂含有次氯酸钠。

如果接触到仪器表面，会腐蚀表面，应立即用布擦干。

14.5.13确保仪器使用的试剂与主机保持相同水平或更低。

勿将试剂置于仪器上部。

14.6、保养
14.6.1为防止感染、触电或灼伤，所有的保养工作必须戴上橡皮手套。

工作完成后，用
消毒液洗手。

14.6.2进行仪器保养时，必须使用专用工具。

14.6.3所有的清洁保养程序必须按手册中规定的进行操作。

14.6.4仅当更换备用部件时才能重新安装。

15 参考文献
15.1 SYSMEX XE-2100D操作手册及技术资料
15.2中华医学检验杂志2007
15.3中华人民共和国卫生部医政司《全国临床检验操作规程》第3版
16 相关记录
不合格标本通知单
不合格样本登记表
25-5 检验后标本的保存及处理记录
34-2 复检标本记录表
34-4 延迟报告记录表
8-9 试剂批号更换及验证原始记录
8-11 试剂退货申请
29-1 室内质控总结报告表月质控分析
29-2 室内质控总结报告表年质控分析
29-3 室内质控失控报告表
29-4 标准物质和质控品使用记录表
30-3 校准记录表
29-6 内部质量控制计划
30-2 检测系统量值溯源一览表
30-5 医学检验测量系统校准计划及实施表。