川崎病对儿童肠道菌群的影响
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收稿日期:２０１８￣ １１￣ ２６ 修回日期:２０１９￣ ０１￣ ２８ 基金项目:国家自然科学基金(８１６７１３６２) ꎻ山东省科技研发工程重大专项(２０１６ＹＹＳＰ００９) ∗ 通信作者( ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ) :ｇａｉｚｈｏｎｇｔａｏ＠ ｓｉｎａ.ｃｏｍ
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ. Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ Ｖ１ ~ Ｖ２ ｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎ ｉｎ １６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ｗａｓ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ＰＣＲ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ������ ｆｅｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｈｏ ｓｕｆｆｅｒｅｄ ｆｒｏｍ Ｋａ￣ ｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ. Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ａｆｆｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｙ ａｌｐｈａ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｂｅｔａ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ＬＤＡ ｅｆｆｅｃｔ ｓｉｚｅ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｉｃｈｎｅｓｓ ( Ａｃｅ ｉｎｄｅｘꎬ Ｐ < ０������ ００１) ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ( ＡＮＯＳＩＭ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ ＵｎｉＦｒａｃ ｄｉｓｔａｎｃｅｓꎬＰ < ０������ ０１) ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｔｈｅ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｃｈａｎｇｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ. Ｉｎ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒꎬ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ( Ｐ<０������ ０１) ꎬ Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ( Ｐ<０������ ０１) ꎬ ａｎｄ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ( Ｐ<０������ ００１) ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ａｆｆｅｃｔｅｄ ｃｈｉｌｄｒｅｎꎬ ｗｈｉｌｅ Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ( Ｐ < ０������ ０５) ꎬ Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ( Ｐ < ０������ ００１) ꎬ ａｎｄ Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ( Ｐ< ０������ ００１) ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ. Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｄｙｓｂｉｏｓｉｓ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｏｃｃｕｒｓ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ. Ｔｈｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｐａｒｔｉａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｌａｔｅｒ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｉｃｒｏｅｃｏｌｏｇｙ ｒｅｓｅａｒｃｈ. Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅꎻ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａꎻ ｃｈｉｌｄｒｅｎꎻ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ
因的 Ｖ１ ~ Ｖ２ 可变区ꎬ并在高通量测序后进行细菌学分类ꎮ 通过 α 多样性、β 多样性、线性判别分析和 ＬＥｆＳｅ 差异分 析比较两组间差异ꎮ 结果 川崎病组的肠道菌群丰度( Ａｃｅ 指数) 和结构( 非加权 ＡＮＯＳＩＭ) 均发生了明显改变( 分 别为 Ｐ<０������ ００１ 和 Ｐ<０������ ０１) ꎮ 显著差异菌变化为:乳酸杆菌属( Ｐ<０������ ０１) 、韦荣球菌属( Ｐ<０������ ０１) 和梭菌属( Ｐ<０������ ００１) 丰度减少ꎻ拟杆菌属( Ｐ<０������ ０５) 、肠球菌属( Ｐ<０������ ００１) 和副杆菌属( Ｐ<０������ ００１) 丰度增加ꎮ 结论 儿童川崎病存在肠道 菌群紊乱ꎮ 该结果为后期的川崎病微生态学研究提供了部分依据ꎮ
关键词: 川崎病ꎻ肠道菌群ꎻ儿童ꎻ高通量测序
中图分类号:Ｒ７２５������ ９ 文献标志码:Ａ
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ
ＳＨＥＮ Ｎａｎ１ꎬ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｙｉｎｇ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｘｉｎｇ￣ｃｕｉ２ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ￣ｘｉａ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｚｈｉ￣ｈｕｉ２ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｌｅｉ３ꎬ ＧＡＩ Ｚｈｏｎｇ￣ｔａｏ２∗
(１������ 济南大学 山东省医学科学院 医学与生命科学学院ꎬ 山东 济南 ２５００２２ꎻ ２������ 山东大学齐鲁儿童医院 儿科研究所ꎬ 山东 济南 ２５００２２ꎻ ３������ 山东师范大学ꎬ 山东 济南 ２５００１４)
摘要:目的 探讨儿童川崎病对肠道菌群的影响ꎮ 方法 ＰＣＲ 扩增川崎病患儿和健康儿童粪便样本中 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基
(１������ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｊｉｎａｎ￣Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００２２ꎻ ２������ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｑｉｌｕ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００２２ꎻ ３. Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００１４ꎬ Ｃｈｉｎａ)
２０１９ 年 ５ 月 第 ３９ 卷 第 ５ 期
基础医学与临床 Ｂａｓｉｃ ＆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
文章编号: １００１ ￣６３２５ ( ２０１９ ) ０５ ￣ ０６３６ ￣ ０５
论文
川崎病对儿童肠道菌群的影响
沈 男１ꎬ２ ꎬ 王 莹２ ꎬ 王兴翠２ ꎬ 张红霞２ ꎬ 汪志慧２ ꎬ 张 磊３ ꎬ 盖中涛２∗
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ. Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ Ｖ１ ~ Ｖ２ ｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎ ｉｎ １６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ｗａｓ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ＰＣＲ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ������ ｆｅｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｈｏ ｓｕｆｆｅｒｅｄ ｆｒｏｍ Ｋａ￣ ｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｆｏｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ. Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ａｆｆｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｙ ａｌｐｈａ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｂｅｔａ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ＬＤＡ ｅｆｆｅｃｔ ｓｉｚｅ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｉｃｈｎｅｓｓ ( Ａｃｅ ｉｎｄｅｘꎬ Ｐ < ０������ ００１) ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ( ＡＮＯＳＩＭ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ ＵｎｉＦｒａｃ ｄｉｓｔａｎｃｅｓꎬＰ < ０������ ０１) ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｔｈｅ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｃｈａｎｇｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ. Ｉｎ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒꎬ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ( Ｐ<０������ ０１) ꎬ Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ( Ｐ<０������ ０１) ꎬ ａｎｄ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ( Ｐ<０������ ００１) ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ａｆｆｅｃｔｅｄ ｃｈｉｌｄｒｅｎꎬ ｗｈｉｌｅ Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ( Ｐ < ０������ ０５) ꎬ Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ( Ｐ < ０������ ００１) ꎬ ａｎｄ Ｐａｒａｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ( Ｐ< ０������ ００１) ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ. Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｄｙｓｂｉｏｓｉｓ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｏｃｃｕｒｓ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ. Ｔｈｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｐａｒｔｉａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｌａｔｅｒ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｍｉｃｒｏｅｃｏｌｏｇｙ ｒｅｓｅａｒｃｈ. Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅꎻ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａꎻ ｃｈｉｌｄｒｅｎꎻ ｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ
因的 Ｖ１ ~ Ｖ２ 可变区ꎬ并在高通量测序后进行细菌学分类ꎮ 通过 α 多样性、β 多样性、线性判别分析和 ＬＥｆＳｅ 差异分 析比较两组间差异ꎮ 结果 川崎病组的肠道菌群丰度( Ａｃｅ 指数) 和结构( 非加权 ＡＮＯＳＩＭ) 均发生了明显改变( 分 别为 Ｐ<０������ ００１ 和 Ｐ<０������ ０１) ꎮ 显著差异菌变化为:乳酸杆菌属( Ｐ<０������ ０１) 、韦荣球菌属( Ｐ<０������ ０１) 和梭菌属( Ｐ<０������ ００１) 丰度减少ꎻ拟杆菌属( Ｐ<０������ ０５) 、肠球菌属( Ｐ<０������ ００１) 和副杆菌属( Ｐ<０������ ００１) 丰度增加ꎮ 结论 儿童川崎病存在肠道 菌群紊乱ꎮ 该结果为后期的川崎病微生态学研究提供了部分依据ꎮ
关键词: 川崎病ꎻ肠道菌群ꎻ儿童ꎻ高通量测序
中图分类号:Ｒ７２５������ ９ 文献标志码:Ａ
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｋａｗａｓａｋｉ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ
ＳＨＥＮ Ｎａｎ１ꎬ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｙｉｎｇ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｘｉｎｇ￣ｃｕｉ２ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ￣ｘｉａ２ꎬ ＷＡＮＧ Ｚｈｉ￣ｈｕｉ２ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｌｅｉ３ꎬ ＧＡＩ Ｚｈｏｎｇ￣ｔａｏ２∗
(１������ 济南大学 山东省医学科学院 医学与生命科学学院ꎬ 山东 济南 ２５００２２ꎻ ２������ 山东大学齐鲁儿童医院 儿科研究所ꎬ 山东 济南 ２５００２２ꎻ ３������ 山东师范大学ꎬ 山东 济南 ２５００１４)
摘要:目的 探讨儿童川崎病对肠道菌群的影响ꎮ 方法 ＰＣＲ 扩增川崎病患儿和健康儿童粪便样本中 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基
(１������ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｊｉｎａｎ￣Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００２２ꎻ ２������ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｑｉｌｕ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００２２ꎻ ３. Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｊｉｎａｎ ２５００１４ꎬ Ｃｈｉｎａ)
２０１９ 年 ５ 月 第 ３９ 卷 第 ５ 期
基础医学与临床 Ｂａｓｉｃ ＆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
文章编号: １００１ ￣６３２５ ( ２０１９ ) ０５ ￣ ０６３６ ￣ ０５
论文
川崎病对儿童肠道菌群的影响
沈 男１ꎬ２ ꎬ 王 莹２ ꎬ 王兴翠２ ꎬ 张红霞２ ꎬ 汪志慧２ ꎬ 张 磊３ ꎬ 盖中涛２∗