牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达

牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达
周雪梅;聂福平;王昱;肖进文;聂奎;李应国
【期刊名称】《中国预防兽医学报》
【年(卷),期】2012(34)4
【摘要】In response to the risk of Lumpy skin disease virus (LSDV) spreading to China, it is necessary to establish inspection methods for LSDV infection. Through bioinformatics analysis, it was suggested that LSDV-ORF132 shared high homology with LW132 (Neethling vaccine), LSDV132(NI-2490) and LW132(NW-LW), the amino acid homologies were 100%, 100% and 94%, respectively. In comparison with corresponding amino acid sequences of the original gene in capripox virus, the homologies were ranged from 20.7% to 36%. In this experiment, a 542 bp fragment of LSDV-ORF132 was amplified by PCR and inserted into prokaryotic expression vector pGEX-6p-l for expressed in E. Coli. The recombinant protein was 48.95 ku, and specifically reacted with LSDV antibody, indicating the recombinant protein possessed antigenic activity.%为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV) ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132.生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959株LW132、NI-2490株LSDV132和NW-LW株
LD132的相应推导氨基酸同源性分别为100％、100％和94.4％,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒相应推导氨基酸的同源性为20.7 ％～36％.SDS-PAGE和western
blot分析表明,pGEX-LSDV-ORF 132在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导主要以包涵体形式存在,其重组蛋白大小约为48.95ku,并且与特异性抗体具有抗原反应活性.【总页数】3页(P320-322)
【作者】周雪梅;聂福平;王昱;肖进文;聂奎;李应国
【作者单位】西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;重庆出入境检验检疫局,重庆江北400020;重庆出入境检验检疫局,重庆江北400020;重庆进出口食品安全工程中心,重庆江北400020;重庆出入境检验检疫局,重庆江北400020;重庆进出口食品安全工程中心,重庆江北400020;重庆出入境检验检疫局,重庆江北400020;重庆进出口食品安全工程中心,重庆江北400020;西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;重庆出入境检验检疫局,重庆江北400020;重庆进出口食品安全工程中心,重庆江北400020
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
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