急诊课件:自身抗体的临床应用(共42张PPT)

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间接免疫荧光 ELISA ELISA
间接免疫荧光 间接免疫荧光 ELISA ELISA

自身免疫肝炎七项

ANA

抗LMA抗(肝细胞膜抗体)

ASMA(抗平滑肌抗体)

抗LKM(抗肝肾微粒体抗体)
间接免疫荧光 间接免疫荧光 间接免疫荧光 间接免疫荧光

抗SLA(抗可溶性肝抗原抗体)
间接免疫荧光

AMA(线粒体抗体)
30
系统性血管炎(Chapel Hill 2012新分类2)
单器官的血管炎:
皮肤白细胞破碎性炎
原发性中枢神经血管炎
核小体是细胞染色质中的一种成分,它是由DNA和组
蛋白以特殊的方式相连而组成
对SLE的早期诊断有重要意义 • 比抗ds-DNA、抗组蛋白抗体更早出现 • 阳性率:50%~90% • 特异性﹥98%
(三)皮肌炎/多发性肌炎(PM/DM)
免疫学检查
• ANA
• ENA——抗Jo-1阳性
其它检查——肌酶谱
2
酶联免疫吸 附法 (ELISA)
3
免疫印迹法 (IB)
Westernblot LIA
4
其它: 放射免疫法 (RIA)等
项目

SLE四项

ANA

抗ds-DNA抗体

抗组蛋白抗体 抗核小体抗体

ENA系列

抗RNP

抗SM

抗SSA

抗SSB 抗JO-1

抗SCL-70

抗核糖体P蛋白

RA谱

AKA(抗角蛋白抗体) 抗GPI(抗葡萄糖-磷酸异构酶)抗体
织。 – 由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。
17
抗核抗体(ANA)
方法——间接免疫荧光法
结果判断:
①滴度〉1:100为阳性
②常见核型——5种 不同核型的临床意义不同
均质型
与AHA(抗组蛋白抗体)、抗DNA有关,引 起LE形成主要见于SLE、药物性狼疮
核膜型
与抗ds-DNA有关, 多见于SLE,特别是有肾炎者
抗角蛋白抗体(AKA)
SLE
②阳性并非SLE特异 原发性硬化性胆管炎
(primary sclerosing cholangitis,PSC)
阳性并非风湿病特异: 抗单链DNA (ssDNA) 抗体
RF——阳性率75%~100%
抗原L发M性A胆抗汁(性肝肝细硬胞—化膜抗—体)风湿病(SLE、SSc、SS、RA)
风湿病的相关学科
免疫学
急诊
肾内
皮肤 风湿病 血液
骨科 呼吸 消化
大量误诊病例
风湿病的诊断 概述
临床特征
症状:发热、关节炎、雷诺现象等
体征:关节肿胀、皮疹、肌无力等
辅助检查
自身抗体(ANA、 dsDNA、 RF)
免疫球蛋白、补体及常规化验 影像学等
抗核抗体
(Antinuclear Antibody, ANA)
斑点型 早期诊断的系列指标
抗核仁抗体: 抗核小体抗体。
与抗ENA有关,应进一步查特异性抗体
核仁型
多见于硬皮病
着丝点型
多见于CREST综合征
抗ds-DNA抗体
临床意义
①对SLE的诊断有较高特异性 ②滴度与SLE活动相关,可作为病情监测及疗效观察指标 ③与SLE肾损害有关
检测方法
①放免法(Farr)——敏感,有利于早期预测 检测高亲合力的抗ds-DNA
常 见 的 自 身 抗 体 及 其 检 测 方 法
(3)
ANA谱(免疫印迹法) 疾病
系统性红斑狼疮
干燥综合征/系统性红斑狼疮
系统性硬化
混合性结缔组织病(MCTD) 原发性胆汁性肝硬化 多发性肌炎、皮肌炎
项目名称 抗双链DNA抗体
抗核小体抗体 抗组蛋白抗体
抗Sm抗体 抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA) 抗核糖体P蛋白 抗SS-A/R060抗体 抗SSA/R052抗体 抗SSB/La抗体 抗着丝点B抗体(CENP-B) 抗Scl-70抗体(Scl-70) 抗nRNP抗体(U1-snRNP) 抗线粒体抗体M2型(AMA-M2) 抗JO-1抗体(JO-1) 抗PM-Scl抗体 抗Mi抗体(Mi-2) 抗Ku抗体(Ku)
RF-IgG 110IU/ml
-IgA 18IU/ml
ELISA法
-IgM 200IU/ml
抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)
瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微丝蛋白相关 抗体的主要抗原决定簇
对RA诊断具有高度特异性(98%) 可在RA早期出现 预测早期关节炎发展为RA RA关节侵蚀破坏的早期识别及预测
(二)系统性红斑狼疮(SLE)
SLE的标记性抗体,阳性率30% 有助于早期、不典型及治疗缓解后SLE的回顾性诊断 抗Sm阳性一定伴抗RNP阳性,但抗RNP阳性可单独存在 ①原发性SS:60-75%
SLE: 40-50%
②与皮损、光过敏、白细胞减少、淋巴结肿大、
血管炎、紫癜相关 ③可造成新生儿狼疮、婴儿心脏传导阻滞
①原发性SS:40%,较抗SSA更特异 ②其它CTD伴抗SSB者常伴继发性SS
(一)类风湿关节炎(RA)
类风湿因子(RF)
早期诊断的系列指标 • 抗角蛋白抗体(AKA) • 抗GPI(抗葡萄糖-磷酸异构酶)抗体
• 抗环瓜氨酸抗体(抗CCP)
类风湿因子(RF)
抗人IgG分子Fc片段上抗原决定簇的特异性抗体, 分为IgM、G、A、E型
RF在RA中的阳性率为70%~80%,是诊断RA的重 要标准之一
抗CCP(抗环瓜氨酸肽抗体)
(1)
ANCA
P-ANCA(荧光模型为核周模型)
C-ANCA(荧光模型为细胞质模型)
MPO-ANCA(髓过氧化酶抗体)
PR3-ANCA(抗蛋白酶3抗体)

检验方法
间接免疫荧光 间接免疫荧光 ELISA ELISA
免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA 免疫印迹、 ELISA
传统定义:将针对细胞核内成分的抗体称为ANA。 现在对ANA靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。
是指抗核酸(nucleic acid)和核蛋白(nucleoprotein) 抗体的总称。
3
抗核抗体的分类
1. 抗DNA抗体 抗双链DNA (dsDNA) 抗体 抗单链DNA (ssDNA) 抗体
2. 抗组蛋白抗体
(有p助ri于ma早ry期b、ilia不ry典ci型rrh及os治is疗, 非P缓B解C风)后湿SL性E的疾回顾病性(诊断感染、慢肝、肺纤维化、肿瘤)
抗核仁抗体: SLE 30%
抗核小SS体抗7体0%。服~9用0%某些药物(INH、苯妥英钠、肼苯达嗪、普鲁卡因酰胺)
Lancet,2003,362:53-61.
②间接免疫荧光法(IF)——特异 ③ELISA——可检测低亲合力的抗ds-DNA
有助于中枢狼疮的病情监测 ④金标免疫斑点法
抗ENA (Extractable Nuclear Antigen,
ENA)抗体
抗RNP
抗Sm 抗SSA
抗SSB
MCTD100%阳性,且滴度高
双手肿胀,雷诺现象,肌炎,指(趾)端硬化 肾脏保护性抗体?
肺和肝脏疾病 慢性支气管炎 Caplan's综合征(类风湿性尘肺症) 原因不明的纤维化肺泡炎 Wegener's肉芽肿 原发性胆汁性肝硬化
抗 原 人IgG 兔IgG
48
22
24
21
100
90
44
27
44
72
100
62
19
32
30
22
62
18
100
80
60
40
60
45
RF常用检测方法
RF 1:40阳性 散射比浊法(测IgM-RF)
非风湿性疾病
5%以下的正常人
RF阳性不等于一定就是RA
RF阴性也不等于一定就不是RA
在非RA患者RF的检出率(%)
疾 病
传染病 亚急性细菌性心内膜炎 传 染 性 肝 炎 利什曼病(黑热病) 幼虫移行症 锥 虫 病 传染性单核细胞增多症
异常蛋白血症 高球蛋白血症性紫癜 高γ球蛋白血症 巨球蛋白血症
(五)系统性硬化病(pSS)
ANA——阳性率50%~55% ENA——抗Scl-70阳性率
15%~40% 抗着丝点抗体阳性
(六)混合性结缔组织病(MCTD)
ANA阳性 ENA——抗RNP高滴度阳性
(七)系统性血管炎(Chapel Hill 2012新分类1)
• 大血管炎 Takayasu动脉炎(大动脉炎) 巨细胞动脉炎(颞动脉炎)
• 肌酸磷酸激酶(CPK): MM-心肌和骨骼肌
MB-心肌 BB-平滑肌和脑内
• 乳酸脱氢酶(LDH) • 谷草转氨酶(AST)
• 谷丙转氨酶(ALT)
• 碱性磷酸酶(ALP)
(四)干燥综合征(SS)
ANA——阳性率40%~70% ENA——抗SSA抗体阳性率70%~96%
抗SSB抗体阳性率50%~87% RF——阳性率75%~100% 高球蛋白血症 WBC、RBC、PLT下降
肉芽肿伴多血管炎(Wegener)
大多隐匿起病,女性多见(女:男=4-6:1)
c-ANCA和PR3-ANCA
抗双链DNA (dsDNA) 抗体
SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释
• 技术方面 • 临床方面
– 经皮质激素或免疫抑制剂治疗。 – 终末期肾病。 – 隐蔽ANA:与循环中免疫复合物结合,沉积于组
临床意义 抗SSA ①原发性SS:60-75%
类似病毒性肝炎的症状和体征:疲乏无力、右上腹不适、肝肿大、黄疸、腹水
2 Primary biliary cirrhosis.
①SLE的筛查抗体: 肝功能异常:肝酶(ALT、AST)升高为主,明显高于胆酶,AST/ALP≥3;
自身免疫性肝炎 (AIH)
阳性,但滴度与 活动性无相关 95% 免疫印迹法(IB)Westernblot
间接免疫荧光

抗LSP(抗肝脏特异性蛋白抗体)
间接免疫荧光

RF三项

RF-IgG
ELISA

RF-IgA
ELISA

RF-IgM
ELISA

抗磷脂综合征四项(ASP)
ELISA
ACA-IgG(抗心磷脂抗体)
ELISA
(2)
ACA-IgM
ELISA
ACA-IgA
ELISA
抗β2-糖蛋白1抗体
ELISA
核小体是细胞染色质中的一种成分,它是由DNA和组蛋白以特殊的方式相连而组成 非风湿性疾病 95%阳性,但滴度与SLE活动性无相关 RF——阳性率75%~100% 类似病毒性肝炎的症状和体征:疲乏无力、右上腹不适、肝肿大、黄疸、腹水 抗核仁抗体: 抗核小体抗体。 -IgM 200IU/ml 抗LMA抗(肝细胞膜抗体) 免疫复合物性小血管炎 : ②滴度与SLE活动相关,可作为病情监测及疗效观察指标 不同核型的临床意义不同 抗SSB抗体阳性率50%~87% 抗核小体抗体(AnuA) 抗核小体抗体(AnuA) 2 Primary biliary cirrhosis. 抗GBM病,冷球蛋白血症性血管炎 干燥综合征/系统性红斑狼疮 类似病毒性肝炎的症状和体征:疲乏无力、右上腹不适、肝肿大、黄疸、腹水
RF含量与病情的活动性和严重性成正比,持续高滴 度的RF常提示RA病情活动,骨侵蚀发生率高,常 可伴有皮下结节或血管炎等关节外表现,提示预 后不良
类风湿因子(RF)
RF并非RA独有的特异性抗体,对RA的诊断不具特异

SLE 30%
SS 70%~90%
SSc 20%~30% MCTD 50%~60%
抗可溶性核抗原(ENA)抗体:Sm、 U1RNP rRNP、
3. 抗非组
蛋白抗体
SSA、SSB、Scl-70、Jo-1、pM-1、PCNA、 Mi-2抗体、DNP。
抗着丝点抗体
4. 抗核仁抗体: 抗核小体抗体。
5. 抗其它细胞成分: 线粒体抗体。
1
间接免疫荧 光法(IFA Indirect Fluorescen t Assay )
抗ENA抗体
抗Scl-70 硬皮病标记性抗体
抗Jo-1 多肌炎/皮肌炎标记性抗体
抗Rib
胞浆抗原——核糖体位于胞浆内
临床意义
①是SLE的又一特异性抗体,阳性率10-20%
②多见于SLE活动期
与抗ds-DNA抗体的消长相平行
但不会随病情缓解立即消失
可持续1-2年后才转阴
抗核小体抗体(AnuA)
• 中等血管 炎
变化血管的血管炎
结节性多动脉炎
白塞氏病
Kawasaki病
Cogan综合征
• 小血管 炎
肉芽肿伴多血管炎(Wegener)
嗜酸细胞性肉芽肿伴多血管炎
(Churg-Strauss 综合症)
显微镜下多血管炎
ANCA相关性血管炎
免疫复合物性小血管炎 :
抗GBM病,冷球蛋白血症性血管炎
IgA 血管炎,低补体性荨麻疹性血管炎
是一种临床表现有多系统损害症状的慢性系统性自身免疫性疾病, 其血清有以抗核抗体为主的大量不同的自身抗体
自身抗体 (1)抗核抗体谱——ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体 (2)抗磷脂抗体 (3)抗组织细胞抗体——抗RBC抗体
抗血小板相关抗体
抗神经元抗体 (4)其它——RF、p-ANCA
抗核抗体(ANA)
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