红松SSR-PCR反应体系的建立与优化
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红松SSR-PCR反应体系的建立与优化
冯富娟;赵丹;孙晓艳;韩士杰;许小妍
【期刊名称】《经济林研究》
【年(卷),期】2010(28)1
【摘要】为了建立红松SSR-PCR最佳反应体系,以CTAB法提取的红松针叶DNA 为模板,应用单因子试验及L16(45)正交试验系统分析了DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶浓度等对SSR-PCR扩增结果的影响,并对延伸时间、热循环参数进行了探讨,建立了稳定的、可重复的红松SSR-PCR最佳反应体系及PCR扩增参数.结果表明,PCR的最佳反应体系为:10 μL体系中,1×PCR buffer 1 μL、DNA模板50~120 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,引物0.5 μmol/L,Taq酶0.75 U.利用该体系筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR 引物13对.在此反应体系下,所扩增谱带清晰、稳定、多态性高.
【总页数】6页(P35-40)
【作者】冯富娟;赵丹;孙晓艳;韩士杰;许小妍
【作者单位】东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁沈阳110016;东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040
【正文语种】中文
【中图分类】Q75;S791.247
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