辣椒褐斑病菌产毒培养条件的研究
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ｐｒ ａｓ ｉ ｅｌ．ｔ ｌ ） 发 的 叶 斑 类 病 害 ， 辽 宁 省 ｏａｃｐｉ ａ ｅ Ｗｏ 引 ｃＨ ｄ Ｌ 为
从辽 宁省鞍 山海城市保 护地 中温室大棚 里采集病 株 ， 经 常规组织 分离后 ， 对病原菌进 行单孢分离 ， 获得其单孢 菌株 ， 并 按柯 赫 氏法则 回接辣 椒 ， 明获 得菌 株 为辣椒 褐斑 病病 证
参考 文献 ：
［］ １ 华乃震．农 药剂型 的进展和 动向 ［ ］ Ｊ ．农药 ，０ ８ ４ （ ） １７— ２０ ，７ ３ ：５
１ ０． ６
［ ］ 步 林 ．农 药 剂 型 加 工 技术 ［ ．北 京 ： 学 工 业 出版 社 ，９ ８ ２刘 Ｍ］ 化 １９ ． ［ ］ 早 骧 ．农 药 助 剂 ［ ．北 京 ： 学 工 业 出版 社 ，９ ４ ３王 Ｍ］ 化 １９ ．
７ 培 养 时 间 ２ 。 、 ５ｄ
关 键词 ： 辣椒褐斑病 菌 ； 毒素 ； 培养条件
中 图分 类 号 ： ４ ６ ４ ８ １ ￥ ３ ． １ ． 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ １０ ３２ ２ １ ）３—０４ ０ １９— ３
１ 材 料 与 方 法 １ １ 供 试 菌 种 ．
究对辣椒褐斑病菌致病机 制 中产 毒条件进 行初步分 析 ， 以便 为进 一步探讨辣椒褐斑病病害 的发病规律及防治途径与方法
奠 定基 础 。
收稿 日期 ：０ ９— ９—２ ２０ ０ ３ 作者简介 ： 孙 俊 （９ ３ ） 女 ， １８ 一 ， 辽宁大 连人 ， 士研究 生， 博 从事 园艺
三角坐标图法不仅可快速筛 选多组 分体系配 方 ， 而且 也 是研究混合体系性质随配 比变 化规律 的一种直 观、 晰和准 清 确的简单方法 ， 具有较高的实用价值 。选择用润湿剂、 分散剂 和 崩解 剂 为 ３个 变量 ， 合 制 剂 润 湿 性 、 散 性 和 悬 浮 剂 ３个 结 分 检测指标 ， 快速筛选出 了性能较佳且 比较经济的配方 ， 明显的 缩短了配方 的研 制时间 ， 得到了 ７ ％除 虫脲 水分散粒剂 的理 ５ 想配方 ， 大大减少 了配方筛选的工作量。
的生 物 测 定 ） 。
通信作者 ： 刘志恒 ， 授 ， 教 从事 植物病 理 学 、 菌学 等教 学 与研究 工 真 作 。Ｔ ｌ（２ ） ２ ３７ ６； ｅ：０ ４ ８ １９２ Ｅ—ｍ ｉ ｌ ｈ９ ４ ｓ ａｃｒ。 ａｌ ｚ １ ５ ＠ ｉ ．ｏ ：ｈ ｎ ｎ
（ 上接 第 １８页 ） ４ 度 考 虑 ， 择 ３ 最 佳 配 方 ， ７ ％ 除 虫 脲 ＷＤ 的 最 佳 组 选 ５为 即 ５ Ｇ
植 物 病 理 学 研 究 。Ｅ—ｒｍ ： ｔｕａ２０ １３ ｃｒ。 ａ １ｓ ｒ ０ ＠ ６ ．ｏ ｕ ｌ ｎ
纸 ） 冷冻离心 ３ ｎ ３ ０ ｍｉ）弃去沉淀 ， ， ０ｍｉ（ ０ｒ ｎ ０ ／ 上清滤液采 用乙醇小分子萃取法 （ 乙醇 萃取 去沉淀 ， 续 ３次收集 合 用 连
并 上 清 液 进 行 减 压蒸 发 ， 后 将 浓 缩 物 复 溶 于 水 中进 行 毒 性 然
江 苏农 业 科 学
孙
２ １ 第 ３期 恒 ， 杨 红 ， 等．辣椒 褐斑 病菌产 毒培养 条件的研究［ ］ Ｊ ．江 苏农业科学 ，０ ０ ３ ：４ ２ １ （ ） １９—１ １ ５
辣椒褐斑 病菌 产毒培养条件 的研究
孙 俊 ，刘 志恒 ， 杨 红 ，刘 歆 ， 欣 阳 黄
２ ０世 纪 末 辣 椒 褐 斑 病 已 对 印 度 、 日本 、 国 温 室 辣 椒 生 韩 产 造 成 了 极 大 的损 失 ， 些 年 在 中 国保 护 地 辣 椒 栽 培 中 也 开 近
始发生
， 我国南方辣椒褐斑病有蔓延的趋 势 ， 在北方地 但
区很少发 生。２０ ０ ５年 ５月在 辽 宁省 葫芦 岛兴 城 市 （ 家岭 高 镇） ２０ 、０ ７年 ５月在辽 宁省鞍 山海城 市保护 地 中均发现 辣椒 褐斑病且 发病严重 Ｊ 。辣椒 褐斑病是 由辣 椒尾孢 菌 （ ｅ ｏ— Ｃｒ ｓ ｃ
原 菌 。
辣椒 生产上 的新病 害， 目前 的报道仅 限于病原 菌 的鉴 定及症
状描述 ， 尚无 关 于 辣 椒 褐 斑 病 菌 致 病 机 制 的 研 究 报 道 。 本 研
１ ２ 滤 液制 备 及 粗 毒 素提 取 ． 将 配 好 的 培 养 液 装 入 １０ｍ ５ Ｌ的 三 角 瓶 中 ， 瓶 １０ ｍ ， 每 ０ Ｌ 将 辣 椒 褐 斑 病 菌 移 至 Ｐ Ａ平 板 上 培 养 后 ， 直 径 ５ ｍ 的 打 Ｓ 用 ｍ 孔 器 沿 菌 落 边 缘 打 孔 ， 直 径 为 ５ ｍ 的菌 柄 ５片 放 入 液 体 将 ｍ 培 养 基 中培 养 ， 养 液 经 过 过 滤 （ 用 ４层 纱 布 ， 用 ３层 滤 培 先 再
３ 讨 论
成为 （ 以质量分数 计 ） ９ ． ％ 除虫脲 原药 为 ７ ％ ； Ｌ一１０ ：７ ４ ７ Ｍ ０
为 ４ ５ ；Ｔ８ ． ％ Ｄ ８ ６为 ３ Ｏ ； 水 硫 酸 钠 ３ Ｏ ； 萄 糖 ２ ０ ； ．％ 无 ．％ 葡 ．％ 用 玉 米 淀 粉 补 至 １０ 。 ０％
表 ２ ７ ％ 除 虫 脲 ＷＤ ５ Ｇ配 方 组 成 及 性 能指 标
（ 沈阳农 业大学植物保护学院 ， 辽宁沈 阳 １０ ６ ） １ １ １
摘要 ： 本研究对辣椒 褐斑病 （ ｅ ｓｏａｃｐ￣ ｅｌ． ｔ ｌ Ｃ ｃ ｐ ｒ ａｓ ｉ ａｄ ｅ Ｗｏ ｏ Ｈ Ｌ）病原 菌离体 培养 的产 毒条件进 行 了系统 分析 。试 验结果表明 ， 同培养 基 、 不 培养 时间 、 培养 温度 、 培养液 ｐ Ｈ值等条件下 的辣椒褐斑 病菌 离体培养所 产生 的毒 素素性有 显 著差异。从毒素毒性考虑 ， 辣椒褐斑病菌离体 液体培养 的最佳条件 是 ：ｒ ｓ Ｆｉ 培养液 、 ｅ 培养 温度 ２ ５℃ 、 培养液 ｐ Ｈ值
从辽 宁省鞍 山海城市保 护地 中温室大棚 里采集病 株 ， 经 常规组织 分离后 ， 对病原菌进 行单孢分离 ， 获得其单孢 菌株 ， 并 按柯 赫 氏法则 回接辣 椒 ， 明获 得菌 株 为辣椒 褐斑 病病 证
参考 文献 ：
［］ １ 华乃震．农 药剂型 的进展和 动向 ［ ］ Ｊ ．农药 ，０ ８ ４ （ ） １７— ２０ ，７ ３ ：５
１ ０． ６
［ ］ 步 林 ．农 药 剂 型 加 工 技术 ［ ．北 京 ： 学 工 业 出版 社 ，９ ８ ２刘 Ｍ］ 化 １９ ． ［ ］ 早 骧 ．农 药 助 剂 ［ ．北 京 ： 学 工 业 出版 社 ，９ ４ ３王 Ｍ］ 化 １９ ．
７ 培 养 时 间 ２ 。 、 ５ｄ
关 键词 ： 辣椒褐斑病 菌 ； 毒素 ； 培养条件
中 图分 类 号 ： ４ ６ ４ ８ １ ￥ ３ ． １ ． 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ １０ ３２ ２ １ ）３—０４ ０ １９— ３
１ 材 料 与 方 法 １ １ 供 试 菌 种 ．
究对辣椒褐斑病菌致病机 制 中产 毒条件进 行初步分 析 ， 以便 为进 一步探讨辣椒褐斑病病害 的发病规律及防治途径与方法
奠 定基 础 。
收稿 日期 ：０ ９— ９—２ ２０ ０ ３ 作者简介 ： 孙 俊 （９ ３ ） 女 ， １８ 一 ， 辽宁大 连人 ， 士研究 生， 博 从事 园艺
三角坐标图法不仅可快速筛 选多组 分体系配 方 ， 而且 也 是研究混合体系性质随配 比变 化规律 的一种直 观、 晰和准 清 确的简单方法 ， 具有较高的实用价值 。选择用润湿剂、 分散剂 和 崩解 剂 为 ３个 变量 ， 合 制 剂 润 湿 性 、 散 性 和 悬 浮 剂 ３个 结 分 检测指标 ， 快速筛选出 了性能较佳且 比较经济的配方 ， 明显的 缩短了配方 的研 制时间 ， 得到了 ７ ％除 虫脲 水分散粒剂 的理 ５ 想配方 ， 大大减少 了配方筛选的工作量。
的生 物 测 定 ） 。
通信作者 ： 刘志恒 ， 授 ， 教 从事 植物病 理 学 、 菌学 等教 学 与研究 工 真 作 。Ｔ ｌ（２ ） ２ ３７ ６； ｅ：０ ４ ８ １９２ Ｅ—ｍ ｉ ｌ ｈ９ ４ ｓ ａｃｒ。 ａｌ ｚ １ ５ ＠ ｉ ．ｏ ：ｈ ｎ ｎ
（ 上接 第 １８页 ） ４ 度 考 虑 ， 择 ３ 最 佳 配 方 ， ７ ％ 除 虫 脲 ＷＤ 的 最 佳 组 选 ５为 即 ５ Ｇ
植 物 病 理 学 研 究 。Ｅ—ｒｍ ： ｔｕａ２０ １３ ｃｒ。 ａ １ｓ ｒ ０ ＠ ６ ．ｏ ｕ ｌ ｎ
纸 ） 冷冻离心 ３ ｎ ３ ０ ｍｉ）弃去沉淀 ， ， ０ｍｉ（ ０ｒ ｎ ０ ／ 上清滤液采 用乙醇小分子萃取法 （ 乙醇 萃取 去沉淀 ， 续 ３次收集 合 用 连
并 上 清 液 进 行 减 压蒸 发 ， 后 将 浓 缩 物 复 溶 于 水 中进 行 毒 性 然
江 苏农 业 科 学
孙
２ １ 第 ３期 恒 ， 杨 红 ， 等．辣椒 褐斑 病菌产 毒培养 条件的研究［ ］ Ｊ ．江 苏农业科学 ，０ ０ ３ ：４ ２ １ （ ） １９—１ １ ５
辣椒褐斑 病菌 产毒培养条件 的研究
孙 俊 ，刘 志恒 ， 杨 红 ，刘 歆 ， 欣 阳 黄
２ ０世 纪 末 辣 椒 褐 斑 病 已 对 印 度 、 日本 、 国 温 室 辣 椒 生 韩 产 造 成 了 极 大 的损 失 ， 些 年 在 中 国保 护 地 辣 椒 栽 培 中 也 开 近
始发生
， 我国南方辣椒褐斑病有蔓延的趋 势 ， 在北方地 但
区很少发 生。２０ ０ ５年 ５月在 辽 宁省 葫芦 岛兴 城 市 （ 家岭 高 镇） ２０ 、０ ７年 ５月在辽 宁省鞍 山海城 市保护 地 中均发现 辣椒 褐斑病且 发病严重 Ｊ 。辣椒 褐斑病是 由辣 椒尾孢 菌 （ ｅ ｏ— Ｃｒ ｓ ｃ
原 菌 。
辣椒 生产上 的新病 害， 目前 的报道仅 限于病原 菌 的鉴 定及症
状描述 ， 尚无 关 于 辣 椒 褐 斑 病 菌 致 病 机 制 的 研 究 报 道 。 本 研
１ ２ 滤 液制 备 及 粗 毒 素提 取 ． 将 配 好 的 培 养 液 装 入 １０ｍ ５ Ｌ的 三 角 瓶 中 ， 瓶 １０ ｍ ， 每 ０ Ｌ 将 辣 椒 褐 斑 病 菌 移 至 Ｐ Ａ平 板 上 培 养 后 ， 直 径 ５ ｍ 的 打 Ｓ 用 ｍ 孔 器 沿 菌 落 边 缘 打 孔 ， 直 径 为 ５ ｍ 的菌 柄 ５片 放 入 液 体 将 ｍ 培 养 基 中培 养 ， 养 液 经 过 过 滤 （ 用 ４层 纱 布 ， 用 ３层 滤 培 先 再
３ 讨 论
成为 （ 以质量分数 计 ） ９ ． ％ 除虫脲 原药 为 ７ ％ ； Ｌ一１０ ：７ ４ ７ Ｍ ０
为 ４ ５ ；Ｔ８ ． ％ Ｄ ８ ６为 ３ Ｏ ； 水 硫 酸 钠 ３ Ｏ ； 萄 糖 ２ ０ ； ．％ 无 ．％ 葡 ．％ 用 玉 米 淀 粉 补 至 １０ 。 ０％
表 ２ ７ ％ 除 虫 脲 ＷＤ ５ Ｇ配 方 组 成 及 性 能指 标
（ 沈阳农 业大学植物保护学院 ， 辽宁沈 阳 １０ ６ ） １ １ １
摘要 ： 本研究对辣椒 褐斑病 （ ｅ ｓｏａｃｐ￣ ｅｌ． ｔ ｌ Ｃ ｃ ｐ ｒ ａｓ ｉ ａｄ ｅ Ｗｏ ｏ Ｈ Ｌ）病原 菌离体 培养 的产 毒条件进 行 了系统 分析 。试 验结果表明 ， 同培养 基 、 不 培养 时间 、 培养 温度 、 培养液 ｐ Ｈ值等条件下 的辣椒褐斑 病菌 离体培养所 产生 的毒 素素性有 显 著差异。从毒素毒性考虑 ， 辣椒褐斑病菌离体 液体培养 的最佳条件 是 ：ｒ ｓ Ｆｉ 培养液 、 ｅ 培养 温度 ２ ５℃ 、 培养液 ｐ Ｈ值