十七常用培养基配方

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十七常用培养基配方
十七常用培养基配方
17.1 营养琼脂培养基
成分
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化钠5g
琼脂15~20g
蒸馏水1000mL
制法:
将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2ML,校正PH7.2—7.4,加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。

分装在三角锥瓶中,在121℃下高压灭菌15分钟。

17.2 乳糖胆盐发酵管培养基(单料)
成分
蛋白胨20g
猪胆盐5g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液25mL
蒸馏水1000ml
PH7.4
制法
将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正PH值,加入指示剂分装,每支管10ml,并放入一个小倒管(产气管),在115℃下高压灭菌15分钟。

注:双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外,其他成分加倍。

17.3 乳糖发酵管培养基(单料)
成分
蛋白胨20g
乳糖10g
0.04%溴甲酚紫水溶液25ml
蒸馏水1000ml
PH7.4
制法
将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正PH,加入指示剂分装,每支管3ml,并放入一个小倒管(产生气),在115℃下高压灭菌15分钟。

注:双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外,其他成分加倍。

17.4 伊红美琼脂(EMB)培养基
成分
蛋白胨10g
乳糖10g
磷酸氢二钾2g
琼脂2g
2%伊红溶液20ml
0.65%美兰溶液10 ml
蒸馏水1000ml
PH7.1
制法
将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于三角锥瓶内,在121℃下高压灭菌15分钟后备用。

临用时加入乳糖并加热熔化琼脂,冷却至50—60℃,加入伊红和美蓝溶液摇匀,浇注平板。

17.5 远藤氏培养基
配方:
蛋白栋10.0g
乳糖10.0g
磷酸氯二钾 3.5g
亚硫酸氢钠 2.5g
碱性品红0.4g
琼脂10.0g
蒸馏水100ml
制备:
配料放入蒸馏水中,搅拌15分钟,使其溶解,分装到三角瓶或试管,121℃灭菌20分钟,冷却后贮于暗处,最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。

17.6 UBA培养基
酵母浸膏 6.1g
蛋白胨15g
番茄汁(244ml)12.2g
葡萄糖16g
K2HPO4 0.31g
KH2PO4 03.1g
MgSO27H2O 0.12g
NaCl 0.006g
FeSO427H2O 0.006g
MnSO42H2O 0.006g
琼脂12g蒸馏水750ml
啤酒250g
将上述配料加入水中,加热至沸,搅拌至完全溶解,趁热加入未脱气的啤酒,轻轻搅拌混合,用HCI 或NaOH调pH为6.0+0.1,分装于三角瓶中,,121℃蒸汽灭菌20min。

待冷却后,放置在36±℃培养24h 小时备用。

17.7 乳酸杆菌培养基
UBA+ABP抑制剂溶液(UBA见前)
ABP抑制剂溶液
配料
放线菌酮0.1g
溴甲酚绿0.15g
无离子水80ml
2-苯乙醇20ml
配制
把溴甲酚绿放入50毫升水中,煮沸至完全溶解,把放线菌酮溶于30毫升水中,将两种溶液混合,分装于带螺旋盖的瓶中,每瓶20毫升,在121℃蒸汽灭菌10分钟,冷却后,每个瓶内加5毫升2-苯乙醇,并拧紧瓶盖。

该溶液会分成两层,使用前须用力摇匀。

17.8 KOT培养基
配方
胰朊酶蛋白胨 5.0g
麦汁浸出生 2.5g
酵母浸出物 2.5g
肝浓缩物 1.0g
麦芽糖 5.0g
葡萄糖 5.0g
L-苹果酸0.5g
吐温-80 1ml
K2HPO4 0.5g
MgSO427H2O 0.125g
MnSO425H2O 0.025g
盐酸半光氨酸0.5g
胞苷0.2g
胸苷0.2g
啤酒800ml
放线菌酮100ml
NaN3 50mg
琼脂20g
蒸馏水至100ml
PH25.4
17.9 日本KL-2B培养基
配方:
胰蛋胨20.0g
麦汁浸生物10.0g
酵母浸出生 5.0g
麦芽糖10.0g
K2HPO4 3.0g
MgSO427H2O 1.0g
MnSO425H2O 0.25g
柠檬酸 2.75g
吐温-80 100mg
NaN3 50mg
琼脂20g
蒸馏水至1000ml
PH5.2
17.10 MRS麦芽糖琼脂培养基
没有一种单独的方法能够检测所有的乳酸细菌,这些细菌对各种糖的利用能力是有差别的,许多菌株能在好氧条件下在琼脂培养基上生长,而另一些菌株则更容易在厌氧条件下生长。

下面列出的培养基,能检测出许多种的乳酸细菌。

但是,这些培养基不是绝对的,使用者可根据自己的经验进行修正后采用。

原理:液体样品培养在含有合适的不同种类琼脂培养基的培养皿中,计算活菌落数。

麦芽糖 5.0g
蛋白胨10.0g
牛肉浸膏粉8.0g
酵母浸出物 4.0g
葡萄糖20.0g
吐温-80 1.0ml
K2HPO4 2.0g
醋酸钠 5.0g
柠檬酸铵 2.0g
MnSO425H2O 0.2g
MgSO427H2O 0.05g
琼脂15g
在蒸馏水中溶解,并定容至1L。

用1.0NHCl或0.1NNaOH调至4.7。

蒸汽灭菌121℃,20分钟。

17.11 Ra-Ray培养基
NBB培养基是德国进行啤酒有害菌检查常用培养基,正如大家所知德国在有害菌研究领域处于领先地位,所以很多文献中提到使用NBB培养基有必要讲清楚。

NBB培养基是Prof.Back专门为检查啤酒有害菌而开发的。

NBB培养基分三种,NBB-A(琼脂型)、NBB-B(试液型)、NBB-C(浓缩型),最近又推出NBB-Am,是在NBB-A的基础上开发的。

NBB培养基是专利产品,由德国Doher公司制造销售。

NBB-A适用于刷洗水、啤酒为样品的细菌检查。

NBB-B适用于酵母(回收酵、培养酵母)的细菌检查。

NBB-C适用于有酵母的混浊啤酒(发酵液、未过滤啤酒)。

培养温度:25-28℃
培养时间:严重污染样品,1天可以检出。

污染轻微或生长缓慢的菌5天左右。

培养条件:厌氧二氧化碳充气下。

注:虽然NBB有很高的检出率,但由于样品过滤或残有空气都可能使Pectinatus菌、Megashaera菌不能检出。

17.12 LMDA培养基
番茄汁固形物
蛋白胨2%
泛酸钙0.2%
酵母浸膏1%
葡萄糖1%
碳酸钙0.5%
柠檬酸0.11%
磷酸氢二钾0.05%
磷酸二氢钾0.05%
硫酸镁0.02%
硫酸锰0.001%
氯化钠0.001%
硫酸铁0.001%
溴甲酚红绿0.0022%
吐温-80 0.05%
放线菌酮0.0007%
琼脂 1.5%
配制
加水溶解,分装三角瓶,121℃蒸汽灭菌10分钟,冷却后,避光保存。

17.13 日本Pectinatus属菌检出培养基
配方:
蛋白胨10.0g
麦芽浸出物8.0g
酵母浸出物 4.0g
K2HPO4 2.0g
NaCl 5.0g
MgSO427H2O 0.2g
MnSO425H2O 0.05g
吐温-80 1ml
L-Cystine-HClCMonnhydrate 0.5g
Resazurin钠盐1mg
Erythromycin 5mg
琼脂20g
蒸馏水至1000ml
PH6.0
17.14 麦汁液体培养基
取原麦汁(头滤麦汁),用单层滤纸过滤后,冷却至40℃以下。

过滤后的原麦汁800—1000ml中加一个蛋清,(加蛋清之前,往蛋清里加少许蒸馏水或麦汁充分搅匀,产沫为止,然后加入麦汁里)混匀。

加热煮沸(最好间接加热)20—30分钟,然后冷却至70℃左右后用双层滤纸过滤。

把过滤后的麦汁冷却至20℃后,测糖度,然后稀释至糖度为12°P。

调整PH值为5.4—5.7,然后分装(试管加6ml,小三角锥瓶加50ml,中三解瓶加200ml),用牛皮纸包扎。

在高压灭菌锅里110℃压力下,灭菌20分钟。

17.15 麦汁固体培养基
步骤同上
调整PH值为5.4—5.7后,加1.5—2.0%的琼脂粉,加热(最好间接加热)溶化琼脂,分装,包扎。

在高压灭菌锅里110℃下,灭菌20分钟,冷却至60℃左右后,摆斜面或倒平板。

17.16 WLN琼脂培养基
酵母浸膏 4.0g
干酷素酮 5.0g
葡萄糖50.0g
磷酸二氢钾0.55g
氯化钾0.425 g
氯化钙0.124g
氯化铁0.0025g
硫酸镁0.125g
硫酸锰0.0025g
琼脂20.0g
溴甲酚绿0.022g
蒸馏水 1.0L
上述组分除琼脂外溶解于蒸馏水中,调整溶液PH为5.5,加琼脂,
很好混合,加热,使琼脂溶解,高压斧121℃蒸汽灭菌不少于15min,冷却至40—45℃,分装于无菌培养皿中。

17.17 YPD培养基
配方:
酵母浸出物10g
蛋白胨20g
葡萄糖20g
琼脂20g
蒸馏水1000ml
溶解后121℃灭菌15分钟,冷却,制成平皿固体培养基。

17.18 TTC琼脂培养基
溶液A:
三苯基四唑氯2.0g
磷酸缓冲液100.0ml
(磷酸缓冲液浓度为0.134mol/L,PH7.2)(无水NaH2PO41.26g,无水Na2HPO41.16g加水溶解至100ml)溶液B:
琼脂20.0g
蒸馏水100.00ml
制备溶液A和B。

制备溶液B时要加热使琼脂溶解。

两溶液混合,冷却至45℃。

17.19 MYGP培养基
配方
酵母浸膏 3.0g
麦牙浸出物 3.0g
蛋白胨 5.0g
葡萄糖10.0g
琼脂15.0g
吐温-80 10ml
冷蒸馏水1000ml
配制:
把配料放入水中,边搅拌边加热至沸,然后分装到带螺旋盖的瓶内,121℃蒸汽灭菌10分钟。

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