cprime科研报告
碳点联合适配体构建荧光“关-开”癌胚抗原探针
基于荧光碳点(CDs)的荧光“开-关”效应,构建 CEA 检测方法简便,成本低,无需大型检测设备,在荧光探 针的构建方面表现出巨大潜力。荧 光 CDs是 一 种 至 少 在 一 维 空 间 内,尺 寸 小 于 10nm,能 稳 定 发 光 的 纳 米碳点,是目前最热门的碳纳米材料之一 。 [9] 与传统的 有 机 荧 光 染 料 相 比,CDs具 有 优 异 的 生 物 相 容 性, 化学及光稳定性且绿色环保性等诸多优点 。 [10,11] 本文采用水热法,制备单分散荧光 CDs。利用紫 外-可 见 光谱、荧光光谱、纳米粒径分析和红外光谱,对所制备的 CDs结构形貌、表面电荷、水化半径、荧光特性、表 面基团等特性进行了分析。CDs表面存在π 电子云,与适配体(Aptamers,Apts)之间由于π→π* 堆积 作 用 相互吸附,从而猝灭 CDs的荧光。当体系中出现 CEA 时,将适配体竞争性从 CDs表面解脱 附,体 系 的 荧
307
第3期
张 益 霞 等 :碳 点 联 合 适 配 体 构 建 荧 光 “关-开 ”癌 胚 抗 原 探 针
第 37 卷
光得到恢复。本文基于此原理,构建一种荧光“关-开”探针体系,用于 CEA 快速分析。
1 实验部分
1.1 仪器及试剂 UV-4802紫外-可见分光光度计(上海龙尼柯仪器 有 限 公 司);NicoletiS5 傅 立 叶 变 换 红 外 光 谱 仪(美
系用于 CEA 快速检测。优化实验表明10μg/mLCDs和50μmol/L 适配体体系,荧光
唯一敢公布科研数据的能量手环——来自美国的Cprime手环
唯一敢公布科研数据的能量手环——来自美国的Cprime手环
众所周知,Cprime能量手环已经风靡美国市场,无论是驰骋体坛的运动健将、大红大紫的嫩模明星,还是身着西装的办公白领都对它有了一定程度的认识。
他的功能毋庸置疑——简单、舒适、益于身心。
作为时尚圈的宠儿,它可以瞬间改变人体健康模式,增强人体机能的神奇效果已经在人们的口中渐渐传开。
当然这只是我们了解到的表面,下面两张实验图标可以让你看到cprime 的强大之处。
放射图1
图1参与者在没有带上Cprime手环前(基准线测量),除了两个脉轮外,其它均处于不平衡状态,其中多个脉轮接近完全不均衡状态。
反射图2
而图2中参与者带上Cprime手环后,所有脉轮均处于平衡状态。
通过观看射线图和脉轮就能很清晰的发现。
当你戴上cprime能量手环,能让你一天都保持最佳状态,充满正能量的面对身边的环境。
曾经有喜欢佩戴手环之后Cprime手环的女学生接受采访,她说她喜欢佩戴这个手环。
她的右手手腕断过,情绪常常失控,而佩戴了cprime能量手环之后,她明显的感觉到自己的身体平衡性和情绪比以前好多了。
当然,在佩戴cprime手环30分钟后,平衡度有更为明显的改善,而脉轮释放的能量也有提升。
这些改善都是大幅度提升的,只要你仔细去感受,你会发现能量手环对你的有效的调节达到了最佳平衡状态。
美洲大蠊变应原 的表达、纯化与免疫学特性鉴定
昆虫学报Acta Entomologica Sinica ,February 2005,48(1):13-17ISS N 045426296基金项目:国家自然科学基金项目(39660073);广东省科技重点项目(2003A3080502);深圳市科技计划资助项目作者简介:高波,男,1972年生,现为江西医学院2001级硕士研究生3通讯作者Author for correspondence ,T el.:0755226558940;Fax :0755226536629;E 2mail :lzg @ 收稿日期Received :2003212229;接受日期Accepted :2004207207美洲大蠊变应原Cr PI 的表达、纯化与免疫学特性鉴定高 波1,刘志刚1,23,邢 苗1,2,徐 宏2,罗时文2,赖 仞2(11深圳大学生命科学学院,深圳 518060;21深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳 518060)摘要:以阳性噬菌体克隆为模板,通过PCR 扩增出目的基因片段并克隆入T 载体,经测序证实为美洲大蠊Periplaneta americana 变应原Cr PI 后,将该基因亚克隆入表达载体p GEX 25X 21。
美洲大蠊变应原Cr PI 在大肠杆菌中得到高效表达,但主要以包涵体形式存在于沉淀中。
目的蛋白溶于6m ol ΠL 盐酸胍并经稀释复性后,经G lutathione Sepharose T M 4B 亲和层析,纯度达90%以上。
以蟑螂过敏病人血清进行免疫印迹检测,结果显示重组变应原具有良好的IgE 结合活性。
关键词:美洲大蠊;重组变应原Cr PI ;蛋白表达;亲和层析;免疫印迹中图分类号:Q966 文献标识码:A 文章编号:045426296(2005)0120013205Expression ,purification and characterization of the American cockroach Cr PI allergenG AO Bo 1,LI U Zhi 2G ang1,23,XI NG Miao1,2,X U H ong 2,LUO Shi 2Wen 2,LAI Ren 2(11C ollege of Life Sciences ,Shenzhen University ,Shenzhen ,G uangdong 518060,China ;21Shenzhen K ey Laboratory of Microbial G enetic Engineering ,Shenzhen ,G uangdong 518060,China )Abstract :Using the Cr PI clone from the λEXcell library as a tem plate ,the cDNA fragments were first generated by PCR techniques and then ligated into T vector.A fter being con firmed by DNA sequencing ,the cDNA encoding the American cockroach Cr PI allergen was subcloned into p GEX 25X 21and expressed as G ST 2fusion protein in the form of inclusion bodies.A fter being diss olved in 6m ol ΠL guanidine hydrochloride and renatured with a sim ple dilution method ,the proteins of target were purified to above 90%purity by affinity chromatography with G lutathione Sepharose 4B.T ested with sera from subjects allergic to cockroach ,the recombinant allergen was shown to possess g ood IgE 2binding activity as determined by Western blotting.K ey w ords :American cockroach ;Periplaneta americana ;recombinant allergen Cr PI ;protein expression ;affinity chromatography ;Western blotting 变态反应性疾病(过敏性疾病)是一种临床上的常见病和多发病,并有逐年增多的趋势,因此越来越受到世界各国卫生组织的关注。
《Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞的生物特性研究》范文
《Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞的生物特性研究》篇一摘要:本研究关注于Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞(ESCs)的生物特性研究。
通过基因编辑技术,我们成功构建了Bdh2基因敲除的ESCs模型,并对其细胞增殖、分化潜能、基因表达谱等方面进行了深入分析。
本文旨在解析Bdh2基因在小鼠ESCs中的作用,并进一步揭示其在生物医学研究中的应用潜力。
一、引言Bdh2基因,作为细胞内脂肪酸β-氧化途径的重要一环,其在生物体内具有至关重要的功能。
然而,Bdh2基因在小鼠胚胎干细胞中的具体作用尚未完全明确。
本研究旨在探讨Bdh2基因敲除对小鼠胚胎干细胞生物特性的影响,为研究其生物学功能提供理论基础。
二、材料与方法1. 材料实验选用的小鼠胚胎干细胞来自实验室前期培养的野生型和Bdh2基因敲除型ESCs。
2. 方法(1)通过CRISPR-Cas9技术,成功构建Bdh2基因敲除的小鼠胚胎干细胞模型;(2)运用细胞增殖实验、细胞周期检测、克隆形成实验等手段,研究Bdh2基因敲除对细胞增殖的影响;(3)采用实时定量PCR、免疫荧光等实验技术,探讨Bdh2基因敲除对小鼠胚胎干细胞分化潜能及基因表达谱的影响;(4)运用生物学信息分析方法,分析数据并绘制相关图表。
三、实验结果1. Bdh2基因敲除对小鼠胚胎干细胞增殖的影响实验结果显示,Bdh2基因敲除后,小鼠胚胎干细胞的增殖能力显著降低。
通过细胞周期检测发现,Bdh2基因敲除导致细胞周期停滞在G1期,S期细胞数量减少。
此外,克隆形成实验也证实了Bdh2基因敲除对细胞增殖的抑制作用。
2. Bdh2基因敲除对小鼠胚胎干细胞分化潜能的影响实时定量PCR和免疫荧光实验表明,Bdh2基因敲除后,小鼠胚胎干细胞的分化潜能发生改变。
在特定诱导条件下,Bdh2基因敲除的ESCs在向特定细胞类型分化的过程中出现障碍。
这表明Bdh2基因在小鼠胚胎干细胞的分化过程中发挥重要作用。
3. Bdh2基因敲除对小鼠胚胎干细胞基因表达谱的影响通过对Bdh2基因敲除前后小鼠胚胎干细胞的基因表达谱进行分析,我们发现一系列与细胞增殖、分化及代谢相关的基因表达发生改变。
《2024年向日葵列当寄生过程关键基因OcEXPA6的功能验证及siRNA特征分析》范文
《向日葵列当寄生过程关键基因OcEXPA6的功能验证及siRNA特征分析》篇一一、引言向日葵列当是一种常见的植物寄生生物,它通过寄生在向日葵等植物上获取营养,从而对植物的生长和发育产生重要影响。
近年来,随着分子生物学和基因编辑技术的发展,关于向日葵列当寄生的相关研究也越来越多。
本篇文章主要介绍在列当寄生过程中起关键作用的基因OcEXPA6的功能验证以及相关siRNA特征的分析。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的材料包括向日葵列当、向日葵植物、以及相关的生物试剂和仪器等。
2. 方法(1)基因克隆与表达分析:通过PCR技术克隆出OcEXPA6基因,并构建表达载体,进行表达分析。
(2)功能验证:利用基因编辑技术,对OcEXPA6基因进行敲除或过表达,观察其对向日葵列当寄生过程的影响。
(3)siRNA特征分析:通过高通量测序技术,对向日葵列当中与OcEXPA6相关的siRNA进行鉴定和特征分析。
三、实验结果1. 基因克隆与表达分析结果成功克隆出OcEXPA6基因,并构建了表达载体。
通过实时荧光定量PCR技术,发现OcEXPA6基因在向日葵列当寄生过程中表达量显著上升。
2. 功能验证结果通过对OcEXPA6基因进行敲除或过表达,发现该基因在向日葵列当寄生过程中具有重要作用。
敲除OcEXPA6基因后,向日葵列当的寄生能力明显减弱;而过表达OcEXPA6基因则能显著增强向日葵列当的寄生能力。
这表明OcEXPA6基因是向日葵列当寄生过程中的关键基因。
3. siRNA特征分析结果通过高通量测序技术,鉴定出与OcEXPA6基因相关的siRNA。
这些siRNA在向日葵列当中的表达量较高,且具有明显的时空特异性。
进一步分析发现,这些siRNA可能通过调控OcEXPA6基因的表达,从而影响向日葵列当的寄生过程。
四、讨论本实验结果表明,OcEXPA6基因在向日葵列当寄生过程中具有重要作用,且与相关siRNA的表达密切相关。
猪乳铁蛋白肽LFcinP基因在巴斯德毕赤酵母中组成型表达及其抑菌活性检测
胞膜结合 ,在膜上形成孔洞 ,质膜被破坏 ,使细胞
内容物泄 露 ,导致 细胞死亡1 fn 可通 过与原核 9 cB 1 。L i 细胞 膜 上 的 负 电荷 基 团产 生 静 电吸 引 而 与质 膜 结 合 ,以致 Lc B fi 作用 于原 核细 胞而 对真 核生 物作用 n 效 果 稍 弱 。在 这一 过 程 中 ,Lc B中 Tp 用 尤 为 fn i r作 重 要 ,Tp芳 香 族 环 结 构 与 磷 脂 头 部 甘 油 相 互 作 r
测 ,为猪乳 铁蛋 白肽在 生产 中应 用奠定 基础 。
硫键使 Lc 分子呈不完全环状 ,其抗菌活性是全 fn iB 乳 铁蛋 白的 4 0 [1 研究 通过 化学 合成 方法 获 0 倍 3。有 — 5
得 猪 源 乳铁 蛋 白肽 L P 2 及其 改 良肽 ,通 过最 小 F 一0
1 材 料 与方 法
p o e n a c n e or359% oft e t t el a r t i he c n enr t f e p e s d p o e n wa r t i c ou t d f . h o aIc l r p o en.t o c ta i o x r s e r t i s ul on ab u 8. U ・m :t e gr wt c r e s o d t att e Fcn h d c t n an ia t n o t4 5 g h o h u v h we h h L -『P a er t c e a}ablis t ai b it .J ie idc t d t a ad go h e o bn n c a pa t ss c s u ie e p e s n L _j n i e h twe h tt e r c m ia t Pihi sor i on ec t x r s i g FcnP.a d t s a v n hi
美国著名癌症中心发现联合两种表观遗传抑制剂逆转了肿瘤免疫逃避,强效治疗肺癌
Cell:美国著名癌症中心发现联合两种表观遗传抑制剂逆转了肿瘤免疫逃避,强效治疗肺癌订阅号APExBIO研究意义近日,来自美国约翰霍普金斯大学悉尼金梅尔综合癌症中心(The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center)的研究团队设计了一个新的顺序联合治疗方案——DNA甲基转移酶抑制剂(先)+HDAC抑制剂(后)——对非小细胞肺癌(NSCLC)具有强大的治疗效果。
该联合表观遗传治疗逆转了肿瘤免疫逃避,调节T细胞耗竭表型转向为记忆和效应T细胞表型,实现了通过阻止MYC驱动的细胞增殖和增强免疫信号传导介导的强大抗肿瘤免疫应答。
这些数据对于肺癌领域尤其是免疫相关的研究具有重大的意义,将表观遗传和免疫治疗相结合有望造福于更多的肺癌患者。
该论文发表于《Cell》。
图1 DNMTi+HDACi攻克肺癌的总机制肺癌(lung cancer)是一种常见的肺部恶性肿瘤,其发病率和死亡率增长最快,是威胁人类生命的最大恶性肿瘤之一。
免疫检查点(immune checkpoint)治疗的出现是一个巨大的进步,但只有极少数患者受益。
因此,寻求一个可以增强抗肿瘤免疫力并增加对免疫检查点治疗反应的高效组合是肺癌研究领域甚至其它肿瘤领域面临的主要挑战。
联合表观遗传治疗方案最常用的是用DNA甲基转移酶抑制剂(DNA methyltransferase inhibitors ,DNMTis)联合组蛋白脱乙酰酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis),前提是后者可以增强异常基因启动子DNA甲基化介导的异常沉默基因的重新表达。
然而,在HDACis的特定药理学特征、最佳给药策略以及与DNMTis最大协同作用的潜在机制这些方面,目前尚未引起重视。
锌螯合HDACis包含三大类:苯甲酰胺(benzamide),异羟肟酸(hydroxamic acid)和环四肽(cyclic tetrapeptides)。
使用CRISPR-CAS系统构建可遗传的基因敲除小鼠和大鼠
使用CRISPR-CAS系统构建可遗传的基因敲除小鼠和大鼠致编辑:CRISPR-CAS系统已经成为一种细胞和模式生物中有效的基因编辑技术。
我们使用CRISPR-CAS系统,通过同时注入两种单导向RNA靶向Uhrf2,同时带入Cas9 mRNA来诱导小鼠的DNA片段缺失。
此外,我们通过一种单一的显微注射方法得到了敲除Mc3R和Mc4R两种基因的大鼠。
在小鼠和大鼠中均观察到较高的种系转移效率(突变可遗传)。
成簇有序间隔短回文重复关联蛋白系统(CRISPR-CAS系统)是一种在细菌和古细菌中演变的针对病毒和质粒入侵的基于RNA的后天免疫系统。
【Bamboo注:该系统由一段Cas基因(双链DNA核酸酶)加一段特异序列组成,Cas作用为结合导向RNA,切割目的基因,导向RNA为CRISPR序列转录而成,有二级结构】根据作用机制不同,CRISPR-CAS系统目前有三种类型。
在第二类型(下文称该系统)中,CRISPR序列转录RNA(crRNA)和反式激活RNA(TraceRNA)结合后有能力引导Cas9核酸内切酶到特定的序列,从而导致目标DNA双链缺失。
【Bamboo注:机理:摄取了病毒DNA后,CRISPR 序列在转录产物tracrRNA,表达产物CAS蛋白,RNA酶共同作用下产生导向RNA,导向RNA含有病毒DNA序列,可遗传给下一代,再遇到病毒DNA时将其剪切】之前的研究表明在哺乳动物中有多种基因工程使用RNA介导的Cas9核酸酶系统。
最近,使用该系统进行高效基因编辑已经在斑马鱼、小鼠和细菌中实现。
几个小组也证明通过该系统介导的在细胞和斑马鱼中基因靶向效率与ZFNs(锌指核酸酶)和TALENs(转录活化因子效应核酸酶)【Bamboo注:另外两种常见DNA编辑方式】相似或较高。
虽然已经有报道在单个小鼠胚胎中可使用该系统打乱多个基因,但是在动物体中尚未见该系统介导的突变种系转移。
此外,长的特异的基因组DNA片段能否被该系统敲除也是未知的。
眼见为实:超高速视频级原子力显微镜实时成像CRISPR基因编辑过程
眼见为实:超高速视频级原子力显微镜实时成像观察CRISPR基因编辑过程北京佰司特科技有限责任公司自2012年以来,研究人员常用一种叫做CRISPR的强大“基因组编辑”技术对生物的DNA序列进行修剪、切断、替换或添加。
CRISPR来自微生物的免疫系统,这种工程编辑系统利用一种酶,能把一段作为引导工具的小RNA切入DNA,就能在此处切断或做其他改变。
CRISPR已经成为生命科学领域受关注的基因编辑技术,其效果得到大家一致认可。
虽然科学家可通过RT-PCR、WB等方法间接证明CRISPR的功能,但仍未有直接的证据来证实。
究其原因:一是生物分子间的相互作用速率快,需要高速的成像手段才能捕捉到;二是生物分子比较小,通常为纳米级,普通显微镜由于受光学衍射限所限不能分辨。
日本Kanazawa University的科学家利用超高速视频级原子力显微镜(High-Speed Atomic Force Microscope,HS-AFM)实时成像,成功观察到了CRISPR基因编辑的过程,为CRISPR技术的有效性提供了直接的证据。
超高速视频级原子力显微镜(High-Speed Atomic Force Microscope,HS-AFM)由日本Kanazawa 大学Prof. Ando 教授团队研发,日本RIBM公司(生体分子计测研究所株式会社,Research Institute of Biomolecule Metrology Co., Ltd)商业化的产品,可以达到视频级成像的商业化原子力显微镜。
HS-AFM突破了传统原子力显微镜“扫描成像速慢”的限制,能够在液体环境下超快速动态成像,分辨率为纳米水平。
样品无需特殊固定,不影响生物分子的活性,尤其适用于生物大分子互作动态观测。
超高速视频级原子力显微镜HS-AFM主要有两种型号,SS-NEX样品扫描(Sample-Scanning HS-AFM)以及PS-NEX 探针扫描(Probe-Scanning HS-AFM)。
产ampc酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌基因特征及耐药机制的研究
中国医科大学博士学位论文产AmpC酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌基因特征及耐药机制的研究姓名:***申请学位级别:博士专业:内科学指导教师:***20050301中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。
申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。
论文作者签名:墨丝量一日期:—三坚.』.蛐中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了勰中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。
本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。
学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。
学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。
,、i中文论著摘要}、一…~…—~.,产AmpC酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌基因特征及耐药机制的研究前言随着广谱抗生素滥用的巨大压力,细菌经过突变和选择及耐药基因的传播,使耐药菌株逐渐增多。
据我国2001年院内感染监测资料,产AmpC酶菌株已占我国院内感染病原体的17.3%,约占革兰氏阴性杆菌的1/3,可见产AmpC酶革兰氏阴性杆菌已逐渐成为医院感染的流行菌。
AmpC酶属于ClassC类酶,在Bushk分类中属于groupI,是由革兰氏阴性杆菌产生的不被克拉维酸抑制的“丝氨酸”头孢菌素酶,多数为染色体介导,可被B一内酰胺类抗生素诱导。
诱导性AmpC酶存在于肠杆菌属,枸橼酸菌,沙雷菌属,摩根摩根菌,小肠结肠炎耶尔森菌以及铜绿假单胞菌等。
C1QBP在非小细胞肺癌中的表达及生物信息学分析
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期、稳定性、亲/疏 水 性 等。 利 用 SOPMA、PDBe
SMART 对 跨 膜 结 构 和 结 构 域 进 行 预 测, 利 用
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r 进 行 蛋 白 质 功 能 分 析, 采 用
STRING 数据库预测 C1QBP 相互作用蛋白,并分
析可能作用的信号通路。
1 5 统计学 分 析
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C-EBPZ在脂肪细胞中的功能及其表达调控机制的研究
C-EBPZ在脂肪细胞中的功能及其表达调控机制的研究C/EBPZ在脂肪细胞中的功能及其表达调控机制的研究引言:脂肪细胞是机体中贮存脂肪并产生脂类激素的重要细胞类型。
它们在能量平衡和脂肪代谢调节中起着关键作用。
为了更好地了解脂肪细胞的分化和功能,科学家们一直在研究脂肪细胞相关的转录因子及其表达调控机制。
近年来,C/EBPZ因子作为一个潜在的转录因子,引起了大量的研究兴趣。
本文将重点介绍C/EBPZ在脂肪细胞中的功能及其表达调控机制的研究进展。
一、C/EBPZ的结构特点和基本功能C/EBPZ 是一种C/EBP家族的转录因子,其结构与C/EBP因子相似,但其特殊结构使其可以在脂肪细胞的分化过程中发挥重要的调控作用。
C/EBPZ在脂肪细胞中的功能包括调控脂肪细胞的分化、脂肪细胞产生脂类激素以及调控脂肪细胞代谢等方面。
二、C/EBPZ的表达调控机制1. 转录水平调控C/EBPZ的基因表达是严格调控的,其转录水平与脂肪细胞分化过程相关。
研究发现,在脂肪细胞分化过程中C/EBPZ基因表达呈现上调趋势,这是由于一系列转录因子的相互作用与调节结果。
2. 翻译后调控除了转录调控,C/EBPZ的蛋白质水平调控也在脂肪细胞的分化中发挥重要作用。
研究发现,在脂肪细胞分化过程中,翻译后调控因子可以直接调节C/EBPZ这一转录因子的蛋白质水平,从而影响脂肪细胞的分化和功能。
三、C/EBPZ的功能调控网络C/EBPZ不仅通过直接调节靶基因的表达来发挥在脂肪细胞中的功能,还参与了复杂的调控网络中。
研究表明,C/EBPZ可以与其他转录因子如PPARγ和SREBP-1等相互作用,形成调控复合物,进一步调控脂肪细胞分化和功能。
结论:总结以上研究,C/EBPZ在脂肪细胞中发挥重要的调控作用,通过转录水平调控和翻译后调控来参与脂肪细胞的分化和功能调节。
此外,与其他转录因子的相互作用也构建了一个复杂的调控网络。
然而,C/EBPZ的具体功能机制还需要进一步的研究来解释。
23932065_ACS患者PCI后外周血单个核细胞中miR-326水平变化及意义
入F
i
c
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l
l分离液中获取单个核细胞。采用实时荧光
管中 提 取 总 RNA;检 测 总 RNA 纯 度 (A260/A280
在 1.
8~2.
1)后 用 Tr
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cDNA;用 PCR 仪扩增 cDNA,扩增条件为 95 ℃ 15
展,但与 ACS 预后的关系鲜有报道。去整合素 - 金
定量 PCR 法 [14]检 测 单 个 核 细 胞 中 miR326 水 平。
步骤如下:取 TRI
z
o
l试剂加至装有单个核细胞的试
伤 [6]、胃癌 [7]、宫 颈 癌 [8]和 肝 细 胞 肝 癌 [9]等 疾 病 进
属 蛋 白 酶 17(
ad
yi
[
3]
,
用,
但仍有主要不良心血
ACS 预 后 已 明 显 改 善
究经首都医科大学附属北京潞河医院医学伦理委员
会批准。
1.
2 外 周 血 单 个 核 细 胞 中 miR326 水 平 检 测 抽
取 ACS 患者入院 24h 内、
PCI后 3d、
7d 空腹肘部
静脉血,采用密度梯度离心法 [13]获取 外 周 血 中 单 个
第 42 卷第 5 期
2021 年 5 月
河
北
医
科
大
学
学
报
JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERS
NCAM三种亚型高表达细胞模型的建立与低剂量铅对其表达的影响的开题报告
NCAM三种亚型高表达细胞模型的建立与低剂量铅对其表达的影响的开题报告背景:NCAM是一种胞外域(EC)、跨膜域(TM)及细胞内域(IC)均具有功能的蛋白质,可转录出多种亚型。
NCAM在生物体内广泛存在,参与着胚胎发育、神经系统的形成、细胞增殖、细胞黏附等生理过程。
近年来,越来越多的研究表明,一些环境污染物,如铅等对NCAM的表达和功能有一定的影响,因此NCAM成为了环境污染和健康领域的重要研究对象。
为了研究铅对NCAM的影响,需要建立NCAM高表达的细胞模型。
研究意义:①探究铅对NCAM表达的影响机制及其对生物体健康的危害。
②为NCAM的功能研究提供高表达的细胞模型。
③为NCAM亚型特异的研究提供相应的细胞模型。
研究方法:首先,根据文献,筛选出NCAM不同亚型的编码基因,利用基因克隆技术将其分别克隆入表达载体进行构建。
接着,采用电穿孔等方法将包含不同NCAM亚型的表达载体转染到不同细胞系中,如293T细胞、PC12细胞和Neuro-2a细胞等,并通过Western blot、免疫荧光等方法检测NCAM在不同细胞系中的表达情况。
最后,给予不同浓度的铅处理,检测铅对NCAM表达的影响。
预期结果:成功构建出NCAM三种亚型高表达的细胞模型,并分别检测到不同亚型在细胞中的表达情况。
在铅处理后,不同亚型的NCAM表达量将受到不同程度的抑制,不同细胞系间也存在差异。
具体差异将在后续实验中进一步确定。
结论:铅对NCAM表达的影响具有亚型特异性和细胞特异性,NCAM在不同亚型和不同细胞系中的表达情况和铅的剂量、时间等有关。
通过本实验的结果,可以为探究铅的作用机制、NCAM功能的研究以及NCAM的临床应用提供一定的参考。
克氏原螯虾C型凝集素的表达与功能研究的开题报告
克氏原螯虾C型凝集素的表达与功能研究的开题报
告
一、选题背景及研究意义
克氏原螯虾是一种经济价值较高的水产养殖动物,同时也是一种具
有重要生物学意义的模式动物。
在其鳃上发现了一种C型凝集素,可以
参与免疫和炎症反应等生物学过程。
因此,研究该凝集素的表达和功能,对于深入探究其免疫和炎症反应机制,提高克氏原螯虾的免疫力和抗病
能力,具有重要的研究意义。
二、研究内容和研究方法
本研究旨在通过克氏原螯虾鳃组织中C型凝集素的表达和功能研究,探究其在免疫和炎症反应中的作用机制。
研究内容包括以下几个方面:
1. C型凝集素基因导入到大肠杆菌中,表达重组蛋白
2. 利用Western blot和ELISA方法检测C型凝集素在克氏原螯虾鳃中的表达
3. 研究C型凝集素对免疫和炎症反应的影响
4. 探究C型凝集素与其他免疫分子的相互作用
研究方法包括基因克隆、大肠杆菌重组蛋白表达、Western blot、ELISA、细胞培养等生物学实验。
三、预期结果及意义
预期结果为:
1. 成功表达C型凝集素重组蛋白
2. 检测到C型凝集素在克氏原螯虾鳃中的表达
3. 发现C型凝集素对免疫和炎症反应具有重要的调节作用
4. 发现C型凝集素与其他免疫分子(如淋巴细胞、巨噬细胞等)有交互作用
通过本研究的结果,可以深入探究克氏原螯虾鳃中C型凝集素的表达和功能,发现其在免疫和炎症反应中的作用机制,为提高其免疫力和抗病能力提供重要的理论基础和实验证据。
同时,本研究也可以为其他海洋动物的免疫研究提供一定的参考意义。
文昌鱼和斑马鱼C1q、C3及G10的进化分析及基因表达的研究的开题报告
文昌鱼和斑马鱼C1q、C3及G10的进化分析及基因表达的研究的开题报告1. 研究背景和意义作为免疫系统中最重要的组成部分之一,补体系统广泛存在于各种生物中,包括鱼类。
C1q是补体系统中的第一个成分,其作用是介导免疫细胞对病原体的清除。
C3是补体系统中最重要的成分之一,它的激活是补体系统中所有路径的共同点,能够介导上述病原体的识别和清除。
G10是一种重要的C3结合蛋白,可以增强C3分子作用的完整性和稳定性。
近年来,随着分子生物学和基因组学等技术的发展,研究人员越来越关注补体系统在鱼类中的作用。
目前已知,C1q、C3和G10基因在多种鱼类中都有表达,包括文昌鱼和斑马鱼。
然而,这些基因的进化关系以及在不同组织中的表达情况还未被深入研究。
因此,本研究旨在通过对文昌鱼和斑马鱼的C1q、C3和G10基因进行进化和表达分析,揭示其在鱼类免疫系统中的作用和机制,为今后在鱼类免疫系统领域的研究提供有价值的参考。
2. 研究内容和方法本研究将从以下两个角度进行探究:(1) C1q、C3和G10基因的进化关系通过使用生物信息学方法,从NCBI数据库中获取文昌鱼和斑马鱼的C1q、C3和G10基因序列,构建相应的进化树,并对基因序列进行进化分析。
(2) C1q、C3和G10基因在不同组织中的表达情况采集不同组织的文昌鱼和斑马鱼样本,在RNA提取和cDNA合成实验后,使用qPCR技术对C1q、C3和G10基因在不同组织中的表达情况进行分析,并根据分析结果探究不同组织中这些基因的分布情况和作用机制。
3. 研究预期结果和意义预计本研究将获得文昌鱼和斑马鱼C1q、C3和G10基因的进化关系及其在不同组织中的表达情况。
结果可以揭示这些基因在鱼类免疫系统中的作用机制,为今后的鱼类免疫系统研究提供有价值的基础研究工作。
此外,基于本研究结果的相关应用也为鱼类养殖领域的疾病预防和治疗提供了有力的理论支持。
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仰卧起 坐最大 值
伏地 挺身 最大 值
平均 速度
平均 功率
平均 功 率./ 千克
卡路 里
距离
平均 功率
平均 功 率./ 千克
卡路 里
距离
能力测试的详细结果
柔韧度(数据百分比变化汇总)
伸展
Active(有芯片)平均值 Placebo(无芯片)平均 值 Delta(三项数据)平均 值
cprime芯片研究第1部分
机构审查委员会(IRB)研究课题
三盲交叉临床试验
机构审查委员会(IRB)研究课题
背景
• 摘要: 亚利桑那大学IRB(机构审查委员会)认可,通过三盲交叉临床研究,对cprime芯片技术在18名健康受 试者的柔韧度、力量、平衡和耐力等方面所产生的效果和影响进行检测。 方法: 在科罗拉多大学波尔得学院Watts Up实验室进行的初步研究中,涉及18名健康的受测个体(11男, 7女),年龄在27-59岁之间,无疾病史、怀孕记录、毒品或饮酒历史,所有受试者均处于健康状态 良好,且不具有高体适能水平。 使用了下述的柔韧度和平衡性测试以及十种不同的力量和耐力测试作为基准测量。在基准测试中, 受试者的第二次测试均佩戴了Active(有芯片)手环或Placebo(无芯片)手环。
能力测试的详细结果
力量(数据百分比变化汇总)
左手力量
Active(有芯片)平均值
右手力量
二头弯举 最大值
仰卧起坐 最大值
伏地挺身 最大值
最快速度
最高功率
功率/千克 最大值
Placebo(无芯片)平均 值 Delta(三项数据)平均 值
能力测试的详细结果
耐力(数据百分比变化汇总)
重复二 头弯举 至力竭
心理科技实验室, LLC水研究
重点发现,GDV(气体放电可视化)形象分析
发光区域: • 对比样本1(紫色线条和竖线),显示出一片可视 光亮区域;这一区域比暴露于cprime芯片技术下60 分钟的测试样本(绿色线条和竖线)的区域更大。 该图表显示出1,200张两种水样本图片的时间序列。 表中每一帧代表每种水的12张图片平均值,垂线表 示这12张图片的RMS (均方根)偏差或标准偏差。 受已知不稳定因素影响每次测量的前20张图片均被 剔除掉(厂商建议的国际标准原则)。 可以看出,样本1比样本2更高,这意味着发光区域 更大,在统计上也会更明显。
B) 30秒内可做的仰卧起坐与伏地挺身的最大次数。 受试者双脚压在地上,膝盖弯曲,在30秒内尽可能多做仰卧起坐,并记录下所做次数。休息5分钟后再 以同样的方式斜靠墙面、膝盖撑地或脚尖撑地做伏地挺身。以同样的方式做所有的测试,记录30秒 内的最大次数。 C) 5分钟骑行肌力测试:平均速度与功率;平均速度与每千克所产生的功率,卡路里和距离。 受试者在固定单车上以最快的速度骑行5分钟。记录其骑行距离、速度、燃烧的卡路里以及每千克 所产生的功率峰值
•
机构审查委员会(IRB)研究课题
主要调查员签署的声明函
cprime芯片技术第2部分
水研究
光电成像/气体放电可视化(EPI/GDV)
心理科技实验室, LLC 水研究背景
光电成像/气体放电可视化(EPI/GDV)
摘要 • 这一初步研究的目的是通过光电成像/气体放电可视化(EPI/GDV)系统成像,发现cprime芯片技术对斐济水的 影响效果。该技术会产生一种电脉冲至目标物,目标物会以发射电子或光子的形式进行回应。电磁场内产生 气体放电,数码相机会捕捉到这种光子辐射出的光,再通过尖端软件处理,形成报告。样品中使用了生物电 线芯片(Bio Antenna chips)与斐济水。 • 盖坦•舍瓦利尔博士( Dr. Gaetan Chevalier )使用光电成像/气体放电可视化(EPI/GDV)材料测试装备,在加 州的恩西尼塔斯心理科技实验室进行了这一实验。 方法 • 两个10oz.的玻璃瓶内分别盛放着两份斐济水样品。作为对照用的瓶子(无芯片、无手环)始终距离cprime芯 片技术产品以及作为被测试的瓶子至少10英尺远。在测试瓶的底部放置一份生物电线芯片(Bio Antenna chips),瓶上套一个手环,放置1小时再进行GDV测量。 • 每个瓶子内取6滴水,测试两次。每个瓶子独立使用一支使用清洁的结核菌素注射器。在使用注射器前,对 注射器进行冲刷,在进行水滴测试取水前,先加满水样。 • GDV 以每秒5帧取像,每次测量为24秒,成120张像(每个水样或者说每瓶水合计做12次测试)。每滴水测量 时的前20张图片弃置不用。 • 留下的1,200张图片用于两种水样的分析。分析的参数包括:范围、平均强度、形状系数、熵以及空间分形 。
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Placebo(无芯片)手环仅对于平衡测试产生了安抚效果。但是, Active(有芯片)手环与Placebo (无芯片)手环均对此产生了显著的提升
在本次初步试验中用到的测试为客观测评柔韧度、平衡力、力量和耐力,它们都是用在标准的运动 员测试中的。它在学术上具有可信度,而且,它较常用于说明某种产品可提升运动表现的应用运动 学测试更优越。
机构审查委员会(IRB)研究课题
报告(续)
柔韧度测试 受试者靠墙坐在地上,双脚抵住伸展板,双手伸向测量设备,手尽可能向远处伸。取3次伸展距离,并 记录最大值。 平衡性测试 受试者闭上眼睛,双臂向外展开,单腿站立。两手食指轮流触摸鼻子。记录脚落地前的时长。
能力测试的详细结果
由Active(有芯片)手环到Placebo(无芯片)手环的数据百分比变化汇总
心理科技实验室, LLC水研究
重点发现,GDV(气体放电可视化)形象分析
基准线测量图(上图)显示出一个清晰的光亮区域,该区域比暴露于 cprime芯片技术下60分钟的测试样本(下图)所呈现的光亮区域更大。 这两幅图片展示的是运用GDV呈现的一滴斐济水所产生的光晕。它们是通 过前面所说的捕捉软件持续24秒拍摄记录下的图像。 •上方图片为第10次测量(第二次测量第5滴水)未使用芯片或手环的斐济 水(对照水样)时的第70张图片。 •下方图片为第10次测量(第二次测量第5滴水)使用了芯片和手环的斐济 水(测试水样)时的第70张图片。 请注意,这两幅图片没有经过任何处理。这一点可以通过图片左上角一致 的两组数据看出来。这些数字是分析软件(GDV科学实验室软件2.2.9版) 自动生成的,代表了测量的次数(左边)和日期。
•
瑞安•希林( Ryan Shilling ) • Watts Up公司是一家专门从事运动训练的公司,其所有人瑞安•希林,有着数十载职业运动员测试的经 验。他为一家名为Athletic Republic(运动共和),从事运动员培养的公司做测试。他对运动员进行实地 测试,具体而言,他做的是跑步和自行车运动员的测试。他擅长于针对训练这一目的,对运动员进行 力量、软开度和耐力的测试。
能力测试的详细结果
平衡性(数据百分比变化汇总)
平衡
Active(有芯片)平均值 Placebo(无芯片)平均 值 Delta(三项数据)平均 值
机构审查委员会(IRB)研究课题
重点发现
• cprime手环将伸展距离平均提升了1.3英寸,这是一个非常显著的提升。更换为Placebo(无芯片)手 环所产生的变化为0.23英寸,这一变化与基准线差异不大。在Active(有芯片)手环和Placebo(无 芯片)手环之间的变化是非常显著的。 闭上眼睛,双臂向外伸展,单腿站立保持平衡的时长在Active(有芯片)手环的影响下得到了显著 提升,平均加长了4.93秒,而Placebo(无芯片)手环显著提升了2.08秒。 除二头弯举最大值呈现出上升趋势外,其它所有的力量测试结果显示,较Placebo(无芯片)手环而 言, cprime手环均获得了更显著的绝对变化。 cprime手环对左右手力量、最快速度、最大力量、最 大每千克功率值均有着显著的提升。两种手环之间的最大力量提高值对比也是非常显著的。 除重复二头弯举至力竭的变化较不明显外,所有耐力测试(30秒钟仰卧起坐最大值,30秒钟伏地挺 身最大值,平均速度和功率,平均速度和每千克功率,卡路里和距离)较基准线均由非常显著的提 升。在Active(有芯片)手环和Placebo(无芯片)手环之间变化时,较基准线的提升都是非常显著 的。
心理科技实验室, LLC研究
光电成像/气体放电可视化(EPI/GDV) 主要研究者
盖坦•舍瓦利尔博士(Dr. Gaetan Chevalier) • 舍瓦利尔博士考取了蒙特利尔大学理工学院工程物理学博士。在这里,他成为测量原 子磁偶极子和91Zr同位素四极矩的第一人。之后,他进入加拿大瓦雷纳(蒙特利尔附近) “国立科学研究所” (National Scientific Research Institute)成为博士后学者,在这里,他研 发了碳探针,用于测量 “ Tokamac de Varennes”内墙的中性粒子流。之后,他去了加 州大学洛杉矶分校,首先作为M.A.N.E.(机械、航空、原子工程)系PISCES小组的博士 后学者;之后,他成为了机电工程系低能量等离子体小组的一名工作人员。他也是加 州学院人文科学系的研究部主任。
机构审查委员会(IRB)研究课题
报告(续)
力量测试 A) 数字液压手柄式握力计测器 受试者每只手分别用最大的力量紧握手柄。受测时,手臂呈直角,肘部靠近身体侧面。如有需要,可调整握 力计测器手柄 ——手柄固定端应位于第一掌骨(掌跟)上,同时,手柄应位于四肢中间位置。受试者以 最大的等轴力量紧握握力计测器,保持5秒。每只手取两次测量值并记录下最高值。 B) 重复至最大值测试,测取二头肌的最大力量值 受试者使用优势臂负重5英镑的自由重量做二头弯举,随后按每次增加5英镑的重量递增,至受试者无法正确 的举起负重,从而获得二头肌的最大负重值。如果受试者无法举起这一负重,则以2.5英镑作为递增重 量,确认最高可举起的负重值,并记录下这一负重值。 C) 30秒内可做的仰卧起坐与伏地挺身的最大次数 受试者双脚压在地面上,双腿弯曲,在30秒时间内尽可能多的做仰卧起坐。记录下这一数值。休息5分钟后, 再以同样的方式斜靠墙面、膝盖撑地或脚尖撑地做伏地挺身。以同样的方式做所有的测试,记录30秒内 的最大次数。 D) 5分钟骑行肌力测试:最快速度、功率以及最快速度与每千克所产生的功率。 受试者佩戴测力器,在固定单车上以最快的速度骑行5分钟。记录其最快速度、功率以及最快速度与每 千克所产生的功率峰值。