红豆杉组织培养繁育方法

红豆杉组织培养繁育方法

孙兴志组织培养是利用植物细胞的全能性和可克隆性，繁殖的一种方法。利用红豆杉植株的嫩茎、针叶、树皮、形成层、假种皮、胚等做为植体进行培养繁殖。

（1）选用红豆杉优良品种，如东北红豆杉的优质器官（紫杉醇含量较高）做为外植体，接种培养基中，经过愈伤组织形成、生根、幼苗芽丛形成等骤，在实验室可获得大量的组培苗。在经过基质移栽、练苗、检查防疫后成为生产用苗。

（2）红豆杉的愈伤组织形成的迟与早的比率，在不同的种类和同一种类不同植株之间存在差异。同时与外植体类型、取样部位及采集季节、光照条件、培养基种类等因素有关。在诱导培养基上，东北红豆杉、南方红豆杉、云南红豆杉均能形成愈伤组织。但形成情况因红豆杉的种类及植株的不同也有差异。一定程度的水解络蛋白（CA）能促进东北红豆杉、南方红豆杉的伤愈组织生长，但浓度大于0.5%时不利于紫杉醇的形成和积累。而当浓度大于1%时又能促进伤愈组织的的愈合，和形成新的生长点，又不影响紫杉醇的积累。细胞悬浮培养基、炭源蔗糖培养基也可增加紫杉醇的含量。但高农度蔗糖中的葡萄糖会抑制紫杉醇的合成。同时半乳糖对促进细胞生长显著。无论是

细胞悬浮培养还是诱导愈伤组织细胞生长以及紫杉醇含量的形成，在黑暗情况下好于光照条件下。

无论组培的方式用什么品种和部位都要选择中层增殖能力旺盛的细胞组成（表层细胞含大量的淀粉颗粒、中心细胞无核，容易出现分化的管状分子）。这样有利于形成细胞间的细胞链丝，从而形成大的细胞团，有利于细胞间小物质的信号传递。从而使得红豆杉的细胞以细胞团的形式存在，产生功能性细胞肌体，促进细胞团区域化，和细胞功能分化，这一点是使红豆杉产生代谢物的前提。