2020_2021学年高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案2新人教版选修1
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标：知识目标能力目标3.学会用稀释涂布平板法进行微生物数量测定的方法情感、态度与价值观目标1.体验科学知识的形成过程，加深对科学本质的理解2.体会在实验活动中合作学习的有效性，养成严谨的科学态度学习重点和难点：微生物的选择培养、分离、计数等技术的原理和方法教材分析与课时安排：“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”是人教版高中生物（选修1）专题2“微生物的培养与应用”的第二个课题，学生已学习了有关培养基和无菌技术的基本知识，在掌握使用平板划线法和稀释涂布法、分离和纯化微生物的实验操作的基础上，研究培养基对微生物的选择作用，并测定其数量。
其中既有关于特定菌株的选择策略等知识性内容，又有土壤溶液的稀释、菌落数量统计等操作性内容，难度较大、探究性较强，是培养学生设计实验、动手操作等科学探究能力，提高生物科学素养的好素材。
本课题教学实施中的关键在于两点：①教师要处理好知识性内容与操作性内容的关系，要让学生理解特定菌株的选择策略，并学习有关的实验方法和操作程序;②处理好课上与课后的关系。
本课题的实验操作时间不长，但是操作前要制备培养基、对培养基和其他操作用具进行灭菌，操作后的培养时间和对微生物进行观察则需要较长时间，因此需要教师精心设计教学程序，统筹安排教学时间。
根据这一教材特点，本课题教学可分2个课时进行，2个课时之间应留有2 d左右的间隔，以便进行微生物的培养与观察。
本教学设计主要针对第一课时。
教学准备：1. 土壤样品的采集以及土壤溶液的配制为保证实验取得预期效果，应选择经常施用尿素的农田，铲去表土后采集3～8 cm深度范围内的土壤;回实验室后，去除土壤中的植物枯枝败叶及其他杂物，用托盘天平称取样品10 g，加入到盛有90 g无菌水的锥形瓶中，震荡10 min，即制得101土壤溶液;制备完成后可置于冰箱冷藏室内备用（1～2 d）。
配制牛肉膏蛋白胨固体培养基（配方：牛肉膏5 g，蛋白胨10 g，氯化钠5 g，琼脂20 g，加热溶解后，加水定容至1 000 mL。
《专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学历案-高中生物人教版选修1
《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学历案（第一课时）一、学习主题本课学习主题为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”。
我们将通过实验操作和理论学习，探究土壤中存在哪些能够分解尿素的细菌，并学习其分离与计数的科学方法。
二、学习目标1. 掌握细菌培养的基本原理和方法；2. 学会如何从土壤中分离出分解尿素的细菌；3. 理解选择性培养基在细菌分离中的作用；4. 学会用稀释涂布平板法进行细菌计数；5. 培养实验操作能力和科学探究精神。
三、评价任务1. 观察学生在实验操作过程中的规范性和准确性；2. 评价学生对细菌培养原理和方法的理解程度；3. 考察学生能否正确使用选择性培养基进行细菌的分离；4. 通过学生完成的实验报告和计数结果，评价其分析问题和解决问题的能力。
四、学习过程1. 导入新课通过介绍生活中的尿素分解现象，引出本课学习主题——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。
同时，简单介绍细菌培养的基本原理和方法。
2. 理论学习讲解细菌培养的基本原理、方法及注意事项，重点介绍选择性培养基的作用及如何利用其进行细菌的分离。
同时，介绍稀释涂布平板法进行细菌计数的原理和方法。
3. 实验操作学生进行实验操作，从土壤中分离出分解尿素的细菌。
教师在此过程中应进行巡回指导，及时纠正学生的错误操作。
4. 结果观察与讨论学生观察培养皿中的菌落生长情况，并讨论如何进行菌落的计数和记录。
教师引导学生分析实验结果，提出问题和解决方案。
五、检测与作业1. 完成实验报告：学生需根据实验过程和结果，撰写实验报告。
报告应包括实验目的、原理、步骤、结果分析和结论等部分。
2. 练习题：布置相关练习题，巩固学生对细菌培养方法和原理的理解。
3. 预习作业：预习下一课时的内容，为下一课时的学习做好准备。
六、学后反思1. 反思实验操作过程：学生在完成实验后，应反思自己在实验操作过程中的规范性和准确性，总结经验教训。
2. 分析实验结果：学生应分析实验结果与预期的差异，探讨可能的原因和改进措施。
教案专题2 课题2：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
◆预习案1．不能氨和CO2，脲酶。
1．2 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，原理是人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
1．3 是稀释涂布平板法。
除此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。
1．4 来源于样品稀释液中一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，选择菌落数在30～300 的。
1．5比活菌的实际数目低。
只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数来表示。
1．6设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
1．7对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。
方案1：其他同学用A同学的土样进行实验。
方案2：A同学以不接种的培养基作为空白对照。
2．实验设计2．1 实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。
2．2 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。
2．3 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。
细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。
2．4 培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。
2．5在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。
选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
2．6菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面。
2．7 实验过程1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
2）应在火焰旁称取土壤10 g。
将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。
3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。
专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(第1课时)
专题2 微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（高二生物）第1课时研究思路分离原理【学习目标】1 学生预习教材P21 “（一）筛选菌株”，能够整理归纳出实验室筛选微生物的原理，能简单描述如何能得到耐高温的DNA聚合酶，如何分离Taq细菌。
2 学生预习教材P22结合右侧培养基配方基的内容，结合培养基配置及分类能整理归纳选择性培养基的原理及配制要求3学生预习教材P21“课题背景”内容结合选择性培养基的作用能阐述分离分解尿素的细菌的原理及培养基配置中各物质提供的成分3学生预习教材P22，整理归纳统计菌落数目的方法4课堂上通过教师提示，学生合作探究，学生能够对统计菌落数目的方法进行区别,填表整理归纳两种方法的比较5课堂上通过观看视频，学生能够掌握统计菌落数目的正确操作与计算6课堂上通过教师提示，学生合作探究，学生能够正确的设置实验对照重点选择性培养基的配制，菌落数目的统计难点菌落数目的统计【课前预习】一筛选菌株阅读教材P21 “（一）筛选菌株”，整理归纳出筛选菌株的基础知识1筛选菌株(1) 自然界中目的菌株的筛选①原理：根据目的菌对的要求，到相应的环境中去找。
②实例：DNA多聚酶链式反应（PCR）是一项的技术，要求使用。
能产生耐高温的TaqDNA聚合酶的就是从热泉中筛选出来的(2)实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。
(2)分解尿素的细菌的分离原理尿素是一种农业，只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是_________________________________________。
2选择培养基在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
【土壤中分解尿素的细菌的分离和计数】一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为和CO2，才能被植物利用，土壤中的这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成。
可以利用这一特点，将其从土壤中筛选出来。
(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于_____ _生长的条件(包括营养、、pH等)，同时____ _或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
2．统计菌落数目(1)常用来统计样品中数目的方法是__________ _______。
即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
例如每克样品中的菌株数= ,C代表 ,V代表 ,M代表。
通常统计出的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为。
因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
(2) 也是测定微生物数量的常用方法。
(3)细菌的数目还可以通过法来测定。
例如，测定饮水中大肠杆菌的数量，可将的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现色，可以根据培养基上的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
在该实验中至少应取___个水样。
3．设置对照(1)设置对照的主要目的是排除实验组中___________对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需用______________________________ 作为空白对照。
(2)对照实验是指除了的条件外，其他条件都的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤微生物约70%～80%为，主要分布在距地表的近性土壤中。
《专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计
《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计方案（第一课时）一、教学目标：1. 掌握土壤中分解尿素的细菌的分离和计数方法；2. 了解细菌的分类和作用；3. 培养实验操作技能和科学探究精神。
二、教学重难点：1. 教学重点：掌握细菌分离和计数的实验方法；2. 教学难点：实验中可能出现的问题及解决方法，培养周密的科学态度。
三、教学准备：1. 实验用器械：无菌土壤、无菌水、稀释液、涂布器、显微镜、计数板等；2. 实验用试剂和培养基：尿素、琼脂培养基、抗生素等；3. 教师准备教学PPT，介绍细菌分类、作用以及尿素分解菌的介绍；4. 预先设计好实验表格，方便学生记录数据。
课时安排：共2课时，本设计为第一课时。
四、教学过程：1. 导入新课向学生介绍本节课的目标和意义，讲解尿素分解菌在农业、工业和医药等领域的应用，激发学生的兴趣和求知欲。
2. 实验原理讲解向学生介绍实验的背景、目标、方法、步骤和实验原理，包括选择培养基的制备、分离尿素的指示剂的配制、细菌的接种和培养等。
3. 实验操作示范教师进行实验操作示范，包括无菌操作、接种、培养等步骤，并强调实验中的注意事项，如无菌操作、菌落的识别等。
4. 学生分组实验将学生分成若干小组，每组分别进行实验操作，并记录实验结果。
教师巡视指导，纠正学生的错误操作，确保实验的顺利进行。
5. 结果分析与讨论学生根据实验结果进行讨论，分析哪些菌落可能是分解尿素的细菌，并尝试诠释分离到的细菌数量差别的原因。
教师对学生的讨论进行点评和指导，帮助学生更好地理解实验结果和实验原理。
6. 知识拓展介绍土壤中其他类型的细菌及其作用，如分解纤维素的细菌、分解脂肪的细菌等，以及它们在农业、工业和医药领域的应用。
同时，引导学生思考如何利用这些细菌来改善土壤质量、提高农作物的产量和品质。
7. 课后作业与反思要求学生回顾本节课的内容，完成相关作业，思考自己在实验操作和结果分析中存在的问题，并在今后的学习中加以改进。
2020-2021高二生物1学案：专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数含解析
2020-2021学年高二生物人教版选修1学案：专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数含解析课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数知识点一菌株的筛选与选择培养基1．筛选菌株(1）原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
（2）实例：从热泉中筛选出Taq细菌。
热泉70～80 ℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的Taq细菌脱颖而出。
（3）方法:利用选择培养基分离。
归纳总结：选择培养微生物的方法通常有两种：(1)可利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好"的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基；（2)可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质,经培养后，其他微生物生长受抑制,而分离对象却可乘机大大繁殖，在数量上占优势.2．选择培养基(1)概念：选择培养基指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
（2）选择培养基的制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某一化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
(3)选择培养基的制备方法：在培养基中加入某种允许特定种类微生物生长，抑制或阻止其他种类微生物生长的化学成分。
（4)选择培养基的用途：使混合菌株中的目的菌变成优势菌，提高该菌的筛选率。
（5)实例:在培养基中以尿素为唯一的氮源可得到能利用尿素的微生物；在培养基中加入青霉素可分离得到酵母菌和霉菌。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基配方培养基组成提供的营养或作用KH2PO4 1.4 g、Na2HPO4 2。
1无机盐g、MgSO4·7H2O 0。
2 g葡萄糖10.0 g碳源尿素1.0 g氮源、碳源琼脂15.0 g凝固剂用蒸馏水定容至1 000 mL氢元素、氧元素尿素，以尿素为氮源,缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，会因缺乏氮源而不能生长繁殖，所以，用该培养基能够筛选出可分解尿素的微生物。
高中生物 专题二 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数知能提升 新人教版选修1
高中生物专题二课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数知能提升新人教版选修1一、单项选择题1．取少量酵母菌液放入血球计数板直接记数，测得的数目是( )A．活细胞数 B．死细胞数C．菌落数 D．细胞总数解析：显微镜直接计数法的缺点就是不能区分活菌和死菌。
答案：D2．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因可能有( )①由于土样不同②由于培养基被污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③ B．②③④C．①③④ D．①②④答案：A3．关于土壤取样的叙述错误的是( )A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3 cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤答案：C4．土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做实验( )A．街道旁 B．花盆中C．农田中 D．菜园里解析：因为取样要在肥沃、湿润的土壤，农田土壤较硬且因喷洒农药，导致微生物种类少，而菜园有中落叶烂叶形成腐殖土，富含纤维素。
答案：D5．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水答案：A6．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果解析：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
基础知பைடு நூலகம்：
（一）筛选菌株
KH2PO4
1.4g
NaH2PO4
2.1g
MgSO4`7H2O 葡萄糖
0.2g 10.0g
尿素 琼脂
选择培养基
1.0g 15.0g
培养基配方
思 考：该培养基对微生物具有选择作用吗？如果 具有，是如何进行选择的？
只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长
选择培养基：在微生物学中，将允许特定种
• 2.提示：反刍动物的瘤胃中含有大量的微生 物，其中也包括分解尿素的微生物。由于 瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后 会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生 物除了需要准备选择培养基外，还应参照 厌氧菌的培养方法进行实验设计。
分析P22实例:
你认为哪个同学的结果更接近真实值？你认 为这两位同学的实验需要改进吗？如果需要，如 何改进？
第一位同学没有重复实验(至少涂布3个平板)，结 果不具有说服力。
第二位同学有重复实验，但结果不一致（误差较 大），说明在操作过程中可能出现错误，需要重 新实验。
【例1】为了计数微生物的数量，一位同学在4
1、酚红培养基： 鉴定分解尿素的细菌。 原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增
强，PH升高→酚红指示剂，变红 2、伊红—美蓝培养基： 鉴定大肠杆菌。 原理：代谢产物与伊红-美蓝结合→菌落呈黑
色。
大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征
大肠杆菌呈黑色中心 ,有或无金属光泽
本课题知识小结:
课后练习
——利用血球计数板在显微镜下直接计数。
（2）活菌计数法——统计菌落数目
方法： 稀释涂布平板法。 原理：
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长 的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
生物选修一2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
一、 筛选菌株
自然界筛选 生存环境 寻找目的菌种时要根据它对________ 的要求， 相应 的环境中去寻找。 到______ 实验室筛选 目的菌株 生长的条件（包括营养、 人为提供有利于_________ 抑制或阻止 温度、PH等），同时__________ 其他微生物生长。 特定 选择培养基：在微生物学中，将允许＿＿＿
脲酶
CO2 + 2NH3
（一）筛选菌株 KH2PO4 1.4g
NaHPO4 2.1g
MgSO4 H2O
葡萄糖
0.2g
10.0g
该培养基的配方中，为 微生物的生长提供碳源和氮 源的分别是什么物质？ 碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素
此配方能否筛选出产生 琼脂 15.0g 脲酶的细菌？为什么？ 将上述物质溶解后， 能。只有产生脲酶的 用蒸馏水定容到 细菌能利用尿素作为氮 1000mL。 源而生存。
(四) 实验过程
2．1 根据图示2－7填写以下实验流程： 配制土 壤溶液 系列 稀释 涂布平板 与培养 菌落计 数
（五）操作提 示 （六）鉴定： 鉴别培养基：不影响微生 物的生存 酚红培养基： 原理：脲酶催化尿素分解 成氨→培养基碱性增强→ 酚 红变红→脲酶阳性
甲：没有重复实验（至少涂布3个平板） 乙：A组结果误差过大，不应用于计算平均值
（二）统计菌落数目 为什么？ 1、活菌计数法 （4）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的实 际数目低，因此统计结果一般用菌落数表示。 每克样品中的菌株数=（C/V)* M C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数； V:所用稀释液的体积；M:稀释倍数。 当两个或者多个细胞连在一起时，平板 上只能观察到一个菌落。
１．某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平 板上ห้องสมุดไป่ตู้落数的平均值为234，涂布平板时所用稀 释液的体积为0.1mL，那么每克样品中的菌落数 是 (Ｂ ) A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.4
人教版高中生物选修一专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学案含解析
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C ÷V )×M 。
C ：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M ：代表稀释倍数。
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取其平均值。
.1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
3．测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，依据是否变红进行判断。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3．设置对照(1)对照实验：指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计1．土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
2020-2021学年人教版生物选修1课件：2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
3．下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是( A ) A．在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落 B．在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒 C．土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌 D．在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后， 可以用于制取土壤稀释液
解析：要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，①正确、 ②错误；分离土壤中分解尿素的细菌用固体培养基需加入琼脂， ③正确，④错误；培养基中需要加碳源即葡萄糖，⑤正确，⑥错 误；不需要氮源，故不加硝酸盐，⑦错误，⑧正确，因此 B 正确。
2．下列关于微生物计数的实验分析中，说法错误的是( C ) A．取样不同，会导致实验结果不同 B．微生物不同，需要稀释的倍数一般不同 C．实验过程中需要对样品、培养基进行灭菌 D．实验需要空白对照，以确保培养基和操作过程未被污染
专题2 微生物的培养与应用
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课
课
堂
后
巩
检
固测课基堂础Fra bibliotek训练固一、选择题(每小题 4 分，共 20 分) 1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( B ) ①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦
(4)在实验中，当菌落数目稳定时，应选取平板计数方法计数；在 实验中，研究者每隔 24 小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定 时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。
4．在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在 培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入 10%酚 可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体 中分离出( C )
2021 2021学年高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案新人教版选修1
2021 2021学年高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案新人教版选修1----da2d3490-6ea0-11ec-8cee-7cb59b590d7d2021-2021学年高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案新人教版选修1专题2土壤中尿素分解菌的分离与计数学习目标：1.明确用培养基对微生物进行选择的原理。
(重点)2.学会统计微生物数量的方法。
(重点)3.能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。
(难点)1.研究思路（1）菌株筛选思路① 自然界中目标菌株的筛选∫谰荩焊据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
（6）从从温泉中筛选出的耐高温Taq细菌中提取用于PCR技术的Taq-DNA聚合酶。
②实验室中目的菌株的筛选≡ 原理：人为提供有利于目标菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。
⒎椒ǎ豪用选择培养基分离。
a、选择性培养基：允许特定种类微生物生长，同时防止或抑制其他种类微生物生长的培养基。
b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
（2）数一数殖民地的数量①常用方法：稀释涂布平板法。
?? 一个不断增长的群体来自≡ 样品稀释剂中的原理？活细菌b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中??大约含有的活菌数⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓⒓: 每个培养皿中的细菌数×MC：它代表在一定稀释度下培养皿上生长的菌落平均数。
v：表示涂板时使用的稀释剂体积（ML）。
m：代表稀释倍数。
（14）测试a．为了保证结果准确，一般设置三个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
a、当样品稀释度足够高时，介质表面b．统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c、设置对照：主要目的是消除实验组非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可靠性。
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1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g
1.0 g 15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到 1 000 mL
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(1)在该培养基的配方中,为微生物提供碳源的是葡萄糖,提供氮源的 是尿素。
(2)绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物 才能利用尿素。
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(2)请设计记录和计数的表格,以便进行结果统计。 答案:
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(3)该实验是用活菌计数法进行计数的。 ①该方法在同一稀释度下,至少涂布3个平板作为重复组。分析 结果时,需考虑重复组的结果是否一致,如果结果差异太大,则意味 着操作有误,需要重新实验。 ②为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 (4)除上述方法外,细菌的计数还可用显微镜直接计数法等。
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取样涂布:取9个上述选择培养基分成三组,并做好标记,然后用三 支1 mL无菌吸管分别从104,105,106倍的三种土壤稀释液中吸取0.1 mL对号放入已做好标记的平板中,用无菌涂布器在培养基表面轻 轻地涂布均匀
↓ 培养观察:将培养基平板倒置于30~37 ℃温室中培养1~2天,每隔 24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果
成分
甲培养基 乙培养基
KH2PO4
0.2 0.2
M gSO4· 7H2O
0.2
0.2
NaCl
0.2 0.2
CaSO4· 2H2O
0.1
0.1
CaCO3
5 5
52 ——
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A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌;乙培养基适于分离异养 型自生固氮菌
B.甲培养基适于分离异养型自生固氮菌;乙培养基适于分离自养 型自生固氮菌
(5)分解尿素的细菌能通过合成的脲酶,将尿素分解成氨,使培养基pH 升高,故若在上述培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,指示剂变 红,则可以说明该种细菌能分解尿素。
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归纳提升 分离筛选微生物的几种方法
方法
特点
举例
利用营养缺
一
陷型选择培 养基进行的
选择培养
通过控制培养基的营养 成分,使营养缺陷型微生 物不能正常生长
缺乏氮源时可以分离 固氮微生物
在完全培养基中加入某
利用某种化 二 学物质进行
的选择培养
些化学物质,利用加入的 化学物质对微生物产生 的影响,抑制某些微生物,
加入青霉素可以分离 出酵母菌和霉菌
同时选择所需的微生物
利用培养条
将培养基放在高温环
三 件进行的选 改变微生物的培养条件 境中培养可以得到耐
择培养
样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图
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(1)请完善下列实验流程。 土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中,用无菌小铁铲铲去表层土,迅 速取土壤并装入无菌信封密封 ↓ 制备培养基:制备以尿素为唯一氮源的选择培养基 ↓ 样品的稀释:在火焰旁称取土壤10 g,放入盛有90 mL无菌水的三 角烧瓶中,振摇使土样与水充分混合,将菌分散。制成101倍土壤稀 释液,用一支1 mL无菌吸管从中吸取1 mL 土壤悬液注入盛有9 mL 无菌水的试管中,吹吸三次,充分混匀,制成102倍土壤稀释液,以此类 推,制成103,104,105,106倍土壤稀释液 ↓
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课标阐释
1.用进化与适应观去 分析微生物的代谢特 征,研究培养基对微生 物的选择作用。 2.讨论并学会从土壤 中分离尿素分解菌的 操作过程,发展科学思 维。 3.利用稀释涂布平板 法进行细菌数目的测 定。
思维脉络
一二
一、研究思路
一二
一二
一二
二、实验设计
(3)分析该培养基的配方,该培养基对微生物是否具有选择作用?如果 具有,又是如何进行选择的?
答案:具有。以尿素为唯一氮源的培养基可以分离到能产生脲酶的 微生物(即能分解尿素的微生物)。
(4)判断选择培养基是否具有筛选作用,还需同时接种到牛肉膏蛋白 胨固体培养基上进行培养,观察同一稀释度的菌液接种的两种培养基 上菌落的数目(其他条件相同且适宜),进行对比得出结论。
②计算公式:每克样品中的菌株数=C/V×M,其中C代表某一稀释
度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的 体积(mL),M代表稀释倍数。
探究点一 探Байду номын сангаас点二 当堂检测 本课必记
典例剖析 类型一 选择培养基的特点和应用 例1 现有两种固体培养基,已知其配制时所加的成分和含量(单 位:g)如下表(除水、琼脂外),用这两种培养基分别去分离土壤中的 两种微生物,下列叙述正确的是 ( )
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归纳提升 细菌的计数方法 (1)显微镜直接计数法 利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下对细菌进行直 接计数,计算一定容积的样品中细菌的数量。 (2)稀释涂布平板法(间接计数法、活菌计数法) ①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落, 来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能 推测出样品中大约含有多少活菌。
一二
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选择培养基与鉴别培养基
问题导引 选用什么样的培养基能把土壤中分解尿素的细菌筛选出来?对筛 选出的菌种如何作进一步的鉴定? 要把某种微生物从众多微生物中筛选出来,就要利用其代谢特点 选择合适的培养基。下面是本课题使用的选择培养基配方,请分析 回答问题。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖
C.甲培养基适于分离酵母菌;乙培养基适于分离真菌 D.甲培养基适于分离自养型共生固氮菌;乙培养基适于分离异养 型共生固氮菌 解析:固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌。甲培养基中含有有 机碳源(葡萄糖和淀粉),无氮源,由此推出该培养基适于分离异养型 的自生固氮菌;乙培养基中不含有机碳源,也不含氮源,所以可用来 分离自养型的自生固氮菌。 答案:B
高温的微生物
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土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 问题导引
给你一把无菌铁铲,到哪里去取土样能得到分解尿素的细菌?统 计菌落数目时应注意什么?
下面是土壤中尿素分解菌的分离与计数的实验流程示意图,请结 合教材提供的资料分析回答问题。
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