家兔在发育过程中外侧腓肠肌内MyHCs变化与诱发电位的关系
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
５ ０ ０— ｌ ２
基金项 目：南通市社会发展科技计划资助项 目 （ ２０ ０ ２ ￥０ ８２ ）
作 者 简 介 ：朱 道 立 （９ １年 生 ） １５ ，男 ，教 授 ；Ｅｍ ｉ ｈ ｄｏｉ ｎｕ ｅｕ ｃ — ａ ：ｚｕａｌ ｔ． ｄ． ｎ ｌ ＠
第 １期
００ｒｍｎ ｎ ０ ／ ｉ，５ｍｉ。离 心后 取 上 清 液 ，保 存 在 一２ ０
℃冰箱 内。先后 配 制十二 烷基 硫 酸钠 一聚丙 烯 酰胺 凝 胶 电泳 （ Ｄ ．Ａ Ｅ） 小 孔 梯 度 凝 胶 Ｊ Ｓ ＳＰ Ｇ 、制 胶 、 加 样及 电泳 ，双胺 银染 色法 和 照相 。 Ｉ２ ３ 组 织切 片的 制 作 在 大 鼠后 肢 取 外侧 腓 肠 ． ．
ｌ ｉ ｓ ｕ ｎ ｎ ｏ ｉｍ ｄｄ ｃｌ ｕｐ ａｅｐ ｌ ｃｙ ｍｉｅｇｌ ｌ ｒｐ ｏｅｉ （ Ｄ —Ａ Ｅ ．Ｔ ｅｒ— ａ ｏ ｉ ｔ ｍｅｔ ｄｓｄ ｏｅｙ ｌｈ ｔ—ｏ ａｒｌ ｄ ｅ ｅｅ ｏ ｈ ｒｓ Ｓ ＳＰ Ｇ ） ｈ ｅ ｔｎ ｎ ｒ ａ ｕ ｓ ｙ ａ ｔ ｓ
Ａｂｓｒ ｔ：Ｉ ｒ ｅ ｏ ｉｖ ｓｉ ａｅ ｔｅ ｒ ｌ ｔ ｎ ｏ ｓ ｌ ｂ ｒＭｙ ｔａｃ ｎ ｏ ｄ ｒｔ ｎ ｅ ｔｇ ｔ ｈ ｅａｉ ｆｍｕ ｃｅ ｆ ｅ ＨＣｓｃ ａ ｇ ｎ ｖ ｋ ｄ ｐ ｔ ｎ ｉｌｏ ａ ｈ ｏ ｉ ｈ ｎ ｅ ａ ｄ ｅ ｏ ｅ ｏｅ ｔ ｆｅ ｃ ａ ｓ ｂ ｏ ｕ ｆｔ ａｅ ａ ａ ｔｏ ｎｅ ｕ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ｏ ｈｅ ｌｔ ｒｌｇ ｓｒ ｃ ｍｉ ｓ ｍｕｓ ｌ ｎ ｒ ｂ ｉｓ ａ ｆｅ ｅ ｔｐｏ ｔ ａａ ｇ ｓ， Ｅａ ｈ ｓ ｂ ｏ ｕ ｆ ｃ ｅ ｉ ａ ｂ ｔ ｔｄｉ ｒ ｎ ｓｎ ｔ ｌａ ｅ ｃ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ｏ
Ｊ ｎ ２ １ ａ． ０ｌ
家兔在发育过程 中外侧腓肠肌 内 ＭＨ ｓ ｙ Ｃ 变化 与诱 发 电位 的关 系
朱道 立 ，宋旭 延 ， 大刚 徐
（ 南通大学生命科学学院，江苏 南通 ２ ６０ ／ ２ ０７／ 上 海 交通 大学 医学院 ，上 海 ２ ０ ２ ） ００５
摘 要 ：为研究在生后不同年龄组家兔外侧腓肠肌各亚体肌纤维 Ｍ Ｈ ｓ ｙ Ｃ 变化与诱发电位的关系，探讨生后发
ｌｔ ｒ ａ ｔ ｃ ｅ ｕ ｓ ｌ ｎ ｒ ｂ ｉ ｔ ｏ ｔ ａａ ｇ ｓｗｅ ｅ ｅ ａ ｎ ｄ ｂ ｐ ｌｉ ｇ ｔ ｅ ｃ ｅ ｔ ｎ ｃ ｓ ｍｕ ａｅ ａ ｇ ｓｒ ｎ ｍｉ ｓ ｍｕ ｃｅ ｉ ａ ｂ ｔ ａ ｓｎ ｔ ａ ｅ ｒ ｘ ｍｉｅ ｙ ａ ｐ ｙｎ ｈ ｌｃ ｒ ｉ ｔ — ｌ ｏ ｓ ｐ ｌ ｏ ｉ
第５ Ｏ卷 第 １ 期 ２１ ０ １年 １ 月
中山大学 学报 （自然科学版 ） Ａ Ｔ Ｓ ＩＮ ＩＲ Ｍ Ｎ Ｔ Ｒ ＬＵ Ｃ Ａ ＣＥ ＴＡ Ｕ Ａ Ｕ Ａ Ｉ Ｍ Ｕ Ｉ Ｅ Ｓ Ａ Ｉ Ｓ Ｎ Ａ Ｓ Ｎ Ｎ Ｖ Ｒ １ ＴＳ Ｕ Ｙ Ｔ Ｅ Ｉ Ｔ
Ｖｏ． ０ Ｎｏ １ １５ ．
（ｃｏｌ ｆ ｉ ｃ ｎｅＮ ｎ ｎ ｎ ｅ ｔ， ａｔ ｇ ２０７ Ｃ ｉ ／ Ｓｈｏ ｏ Ｌ ｅ ｉ ｃ ，ａｔ ｇＵ ｉ ｓｙＮ ｎ ｎ ６０ ，ｈ ａ／ ｆＳ ｅ ｏ ｖｉ ｏ ２ ｎ
Ｓ ｈｏ ｏ Ｍ ｄｃ ｅ Ｓ ａｇ ａ Ｊ ｏＴ ｎ ｎ ｅｓｙ Ｓ ａ ｇａ ２ ０ ２ ， ｈｎ ） ｃ ｏｌ ｆ ｅ ｉｉ ，ｈ ｎ ｈｉ ｉ ｏ ｇＵ ｉ ｒ ｔ，ｈｎ ｈ ｉ ０ ０ ５ Ｃ ｉａ ｎ ａ ｖ ｉ
ｄｕ ｎ ｏ ｔ ａａ ｖ ｌｐ ｅ ｔ ｉ ｒ ｇ ｐ ｓｎ ｔ ｌｄｅ ｅ ｏ ｍ ｎ ． Ｋｅ ｒ ｓ： ｌｔ ｒ ｌｇ ｓｒ ｃ ｅ ｕ ｕ ｃｅ； ｍｕ ｃｅ ｓ ｂ ｏｕ ｅ； ｅ ｏ ｅ ｏｅ ｔａ ； ｍｙ ｓｎ ｈ ａ ｈ ｉ ｙ ｗｏ ｄ ａｅ ａ ａ ｔｏ ｎ ｍｉ ｓ ｍ ｓ ｌ ｓ ｌ ｕ ｖ ｌ ｍ ｖ ｋ ｄ ｐ ｔｎ ｉｌ ｏ ｉ ｅ ｖ ｃ ａｎ ｙ ｉｏ ｏ ｍ ； ａ ｔｍｙ ｓｎ ａ ｅ ｏ ｉ ｒｐ ｏ ｐｈ ｔ ｓ ｓｆ ｒ ｃ ｏ ｏ ｉ ｄ ｎ ｓｎｅ ｔｉ ｈ ｓ ａａ ｅ； ｒ ｂｂｔ ａ ｉ
ｈ ａｙ ｃ ａｎ ｉｏｏｍｓ （ ＨＣ ） ｏ ａ ｈ ｓｂ ｏｕ ｆ ｈ ａｅａ ａ ｔ ｃ ｅ ｕ ｓｌ ｎｒｂ ｉ ｈ ｗｅ ｅ ｖ ｈ ｉ ｓｆｒ Ｍｙ ｓ ｆ ｃ ｕ ｖ ｌｍｅｏ ｅｌｔｒｌ ｓｒ ｎ ｍｉｓｍｕ ｃｅｉ ａ ｂｔ ｓ ｏ ｄ ｅ ｔ ｇ ｏ ｓ
ｒｓｅｔ ｅｙＭｙ Ｃ ，Ｍｙ Ｃ （ Ｉ ） ｅｐ ｃ ｖｌ ｉ Ｈ ｓＩ Ｉａ Ｈ ｓＩ Ｉｄ １ｘ ，Ｍｙ Ｃ ａｄＭｙ ｓ ．Ｔ ｅ ｏｒｓｏｄ ｄｔ ｔｅｍｕ— Ｈ ｓＩ ｎ ＨＣ ｈｙｃｒ ｐｎ ｅ ｓ ｌｂ Ｉ ｅ ｏｈ ｃｅｆ ｅ ｈｎ ｔ ｅｔｐ （ Ｏ ， １Ｘ （ Ｏ） ＩＢ （ Ｇ） ａｄ Ｉ（ Ｏ） ｆ ｅ． Ｓ ，ｔｅｒｌ ｉ ｌ ｉ ｒ ｅｏｙ ｅ１ ｂ ｐ ｐ ｙ １Ａ Ｆ Ｇ） １ Ｆ ， １ Ｆ ｎ Ｓ ｉ ｒ ｏ ｈ ｅ ｔ ｎ ｂ ａｏ
１ ２ 操 作方 法 ．
具 有独特 的结 构蛋 白和 代谢 酶 联 合 表 达 特点 ，Ａ — Ｔ Ｐｓ ａｅ染色确 定 Ｉ Ｉ 、Ｉ Ａ、Ｉ 及 Ｉ 型肌 纤 维 型 通 常 Ｉ Ｘ Ｉ Ｂ 由肌球蛋 白重 链异构 体 （ Ｈ ｓ 所确 定 。Ｍｙ ｓ Ｍｙ Ｃ ） ＨＣ 足肌 原纤维 粗 丝的重 要结 构蛋 白质 ，它 能将化 学 能 量转 变成机 械能 以供 肌 肉收缩 。诱 发 电位 的产 生受 多种 素 的影 响 ，如 电压 、电流强 度 、刺 激频 率 、刺激 范 围 等 。根 据 家 兔 腓 肠 肌 外 侧 头 的起 止
朱道立等 ：家兔在发育过程 中外侧腓肠肌 内 Ｍｙ Ｃ 变化 与诱 发电位的关系 Ｈｓ
１５ ０
骨骼 肌纤 维是 由各 式 各样 的肌 原 纤 维 构成 的 ，
铵 等均 为 国产 分 析 纯 。十 二 烷 基 硫 酸 钠 （ Ｄ ） ＳＳ 、 高 相对分 子 质 量 标 准 蛋 白质 （ ｒｅ） Ｍａｋｒ 、腺 苷 三 磷 酸 酶系 Ｓｇ ａ 司 产 品。 ｉｍ 公
中 图分类 号 ：Ｑ ４ ４５
文献标 志码 ：Ａ 文 章编号 ：０２ — ５９（０１ １ ００ — ６ ５９ ６７ ２ １）０ — １４ ０
Ｔｈｅ Ｒｅａ ｉｎ ｏ ｙ ｓｎ ａ ｙ Ｃｈａｎ ｓ ｆ ｒ ｌｔｏ ｆＭ ｏ ｉ Ｈｅ ｖ ｉ Ｉｏ ｏ ｍ Ｃｈａ ｇ ｎ ｏ ｅ ｎ ｅ ａ ｄ Ｅｖ ｋ ｄ
ａ Ｉｄ （ Ｉ ） Ⅱｂ Ｉ ４种 ，对 应 于 骨 骼 肌 纤 维 表 型 ⅡＡ 型 （ Ｏ 型 ） ⅡＸ （ Ｏ 型 ） １Ｂ型 （ Ｇ 型 ） 、 Ｉ 或 Ｉ 、 ｘ 、 共 ＦＧ 、 Ｆ 、１ Ｆ 及 Ｉ型 （ Ｏ型 ）４类 。 Ｓ
关键 词 ：外侧腓肠肌； 肌亚体 ； 诱发电位；肌球蛋白重链异构体 ； 腺苷三磷酸酶； 家兔
ｔ ａ ｒ ｗｎ ｒ ｂ ｉｇ ｄ ｒ ｔｏ ｓｌ ｎ ｅ ｈａ ｎ ａ ｃ ｎ ｓ ｉ ｆｗｈｉｈ ｓ ｖ ｌ ｈ ｔｇ ｏ ａ ｂ ｔ ｕ ａｉｎ ｗａ ｏ ｇ ｒｔ ｎ ｉｆ ｎ ｙ ｉ ｐｔ ｏ ｃ ｕｂ ｏｕｍｅ ｈ ｉ ｓｇ ｅ ｔ ｅａ ｅ ｅ ．Ｔ ｓｗａ ａ ｙ ｒｌ ｔｄ ｒ ｌ ｗｉｈ ｔ ｅ ｃ ｍｐ ｎｅ ｔ ｐ ｏ ｏ ｔｏ ｆ ｆ ｅ ｙ ｅ ｏ ａ ｈ ｕｂ ｏ ｕ ． Ａｎ ｌ ｔｏ ｏ ｅ ｉ ｂ ｎ ｓ ｆ ｍｙ ｓｎ ｔ ｈ ｏ ｏ ｎ ｒ ｐ ｒｉｎ ｏ ｂ ｒ ｔ ｐ ｓ ｆ ｅ ｃ ｓ ｖ ｌ ｍｅ ｉ ｄ ｅｅ ｒｐｈ ｒ ｓｓ ａ ｄ ｏ ｏ ｉ
Ｐｏ ｅ ｔａ ｎ ｔ ｅ Ｌａ ｅ ａ ｓ ｒ ｃ ｅ ｉ ｓ ｏ ｂ ｉ ｔＰｏ ｔ ｔ ｌＤｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｔ ｎ ｉ ｌｉ ｈ ｔ ｒ ｌＧａ ｔ ｏ ｎ ｍ ｕ ｆＲａ ｂ ｔ ａ ｓｎａ ａ ｖ ｌ ｐ ｎ ｓ
ＺＨ Ｕ ｏ ｉ Ｓ Ｄａ ｌ， ＯＮＧ ． Ｘｕ ｈｕ， ｓ ＸＵ ｇａ ｇ Ｄａ ｎ
育期间肌纤 维 Ｍｙ Ｃ 组成和作用差异与表型之间的相关联 系 ，采用 电生理 记录仪结合 十二烷基硫 酸钠 一聚丙烯 Ｈｓ 酰胺凝胶电泳 （ Ｄ －Ａ Ｅ）检测外侧腓肠 肌各 亚体 。结果 表 明中间亚 体在刺 激时各 年龄组 的峰值 电压基 本相 Ｓ ＳＰ Ｇ 同 ，而外侧 亚体 和内侧亚体分别有些变化 。同时发现成 年家兔 的持续 时间都较 幼年 的长 ，这 可能与各 亚体的肌 纤维型构成 比例 有很 大关 系。外侧腓肠肌各亚体 的肌球蛋 白重链异 构体 （ Ｈ ｓ 电泳条 带分别显示 Ｍｙ Ｃ Ｍｙ Ｃ ） Ｈ ｓＩ ｌ
１２ １ 电刺激 仪 器 的连 接 与 参数 的设 置 引 导电 ．．
极 与前置 放大 器输 入端 连接 ，输 出端 连接 电脑 。刺 激 电极连 接刺 激器 输 出。给 出信 号记 录参数 ：采样 周期 ０ ０ ０ ２ｍｓ ． ５～ ． ，增 益 ２ ０ ，滤 波 １ｋ ００ ，时 间常 数０１ ． ，刺激 宽度 １４ ｓ ｍｐ一 ． ５ｖ ． ８ ｍ ，Ａ ８３ 。 １２ ２ 肌 肉蛋 白质 样 品 的准备 ．． 取 出家 兔 外 侧腓 肠 肌各 肌 亚体 ，分别 切碎 后 与液氮 一起 在研钵 中碾 磨 成粉 末状 ，置 放 于高 速冷 冻 离心 机 内 ，４ ，ｌ ２
ｂｅｗｅ ｎ ｄ ｆｅ ｅ ｃ ｆｆ ｎ ｔ ｎ， ｔ ｏ ｏ ｉｉｎ ｏ ｓ ｌ ｂ ｒＭｙ ｔ ｅ ｉｆｒ ｎ ｅ ｏ ｕ ｃ ｉ ｏ ｈｅ ｃ ｍｐ ｓｔ ｆｍｕ ｃｅ ｆ ｅ ＨＣｓ ａ ｄ ｐ ｅ ｏｙ ｅ ｗｅ ｅ ａ ｐ ｏ ｃ ｅ ｏ ｉ ｎ ｈ ｎ ｔｐ ｒ ｐ ｒａ ｈ ｄ
点 、肌束 排 列 、肌 运 动 终 板 分 布及 神 经 分 布 的 特 征 Ｊ ，可 明确分 为 内 侧 亚 体 、 中问 亚 体 和 外 侧 亚
体 ３个 肌亚体 。根 据蛋 白质 相对 分子 质量 大小 的不 同 ，通 过 十 二 烷 基 硫 酸 钠 一聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电
泳 （ ｏｉｍ ｄ ｄｃｌ ｕｐ ａｅｐ ｌ ｃ ｌｍ ｄ ｅ ｅ ｓｄｕ ｏ ｅｙ ｌｈ ｔ—ｏ ａｒ ａ ｉｅｇｌ — ｓ ｙ ｙ
ｓ ｉｓｉ ｄ ｃ ｔｄ ｔ ａ ｎ ｙ ｔ ｅ ｉ ｔｒ ｄ ａｅ ｓ ｂ ｏｕ ｕ ｔ ｎ ｉａ ｅ ｈ ｔｏ ｌ ｈ ｎ ｅ ｍｅ ｉｔ ｕ ｖ ｌ ｍｅｇ ｐ ａ ｏ ｔｇ ｓｂ ｓｃ ｌ ｎｉ ｒ ， ｂ ｔｔ ｅ ｌｔｒ ｅ ｋ ｖ ｌａ ｅ ｗａ ａ ｉａ ｙ ｕ ｆ ｍ ｌ ｏ ｕ ｈ ａｅ ａ ｌ
ｌｃ ｏ ｈ ｒｓ ，Ｓ ＳＰ Ｇ ） 识别 肌球 蛋 白重链 异构 ｅｔ ｐ ｏｅｉ Ｄ —Ａ Ｅ ｒ ｓ 体 的分 布 。以家兔 外侧 腓肠 肌为 实验 对象 ，深 入研 究 其各肌 亚体 的生 理生 化特 征 ，以充 实骨骼 肌运 动
ｓ ｂ ｏｕ ｅ ａ ｄ ｔ ｅ ｍｅ ａ ｕ ｖ ｌｍ ｅ ｗｅ ｅ ｓ ｐ ｒ ｔ ｌ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ Ａｔｔ ｅ ｓ ｍｅ ｔｍ ｅ， ｉ ｃ ｕｄ ｂ ｅ ｎ ｕ ｖ ｌ ｍ ｎ ｈ ｄｉｌｓ ｂ ｏｕ ｒ ｅ ａ ａｅｙ ｓ ｍ ｈａ ｇ ． ｈ ａ ｉ ｔ ｏ ｌ ｅ ｓ ｅ
基金项 目：南通市社会发展科技计划资助项 目 （ ２０ ０ ２ ￥０ ８２ ）
作 者 简 介 ：朱 道 立 （９ １年 生 ） １５ ，男 ，教 授 ；Ｅｍ ｉ ｈ ｄｏｉ ｎｕ ｅｕ ｃ — ａ ：ｚｕａｌ ｔ． ｄ． ｎ ｌ ＠
第 １期
００ｒｍｎ ｎ ０ ／ ｉ，５ｍｉ。离 心后 取 上 清 液 ，保 存 在 一２ ０
℃冰箱 内。先后 配 制十二 烷基 硫 酸钠 一聚丙 烯 酰胺 凝 胶 电泳 （ Ｄ ．Ａ Ｅ） 小 孔 梯 度 凝 胶 Ｊ Ｓ ＳＰ Ｇ 、制 胶 、 加 样及 电泳 ，双胺 银染 色法 和 照相 。 Ｉ２ ３ 组 织切 片的 制 作 在 大 鼠后 肢 取 外侧 腓 肠 ． ．
ｌ ｉ ｓ ｕ ｎ ｎ ｏ ｉｍ ｄｄ ｃｌ ｕｐ ａｅｐ ｌ ｃｙ ｍｉｅｇｌ ｌ ｒｐ ｏｅｉ （ Ｄ —Ａ Ｅ ．Ｔ ｅｒ— ａ ｏ ｉ ｔ ｍｅｔ ｄｓｄ ｏｅｙ ｌｈ ｔ—ｏ ａｒｌ ｄ ｅ ｅｅ ｏ ｈ ｒｓ Ｓ ＳＰ Ｇ ） ｈ ｅ ｔｎ ｎ ｒ ａ ｕ ｓ ｙ ａ ｔ ｓ
Ａｂｓｒ ｔ：Ｉ ｒ ｅ ｏ ｉｖ ｓｉ ａｅ ｔｅ ｒ ｌ ｔ ｎ ｏ ｓ ｌ ｂ ｒＭｙ ｔａｃ ｎ ｏ ｄ ｒｔ ｎ ｅ ｔｇ ｔ ｈ ｅａｉ ｆｍｕ ｃｅ ｆ ｅ ＨＣｓｃ ａ ｇ ｎ ｖ ｋ ｄ ｐ ｔ ｎ ｉｌｏ ａ ｈ ｏ ｉ ｈ ｎ ｅ ａ ｄ ｅ ｏ ｅ ｏｅ ｔ ｆｅ ｃ ａ ｓ ｂ ｏ ｕ ｆｔ ａｅ ａ ａ ｔｏ ｎｅ ｕ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ｏ ｈｅ ｌｔ ｒｌｇ ｓｒ ｃ ｍｉ ｓ ｍｕｓ ｌ ｎ ｒ ｂ ｉｓ ａ ｆｅ ｅ ｔｐｏ ｔ ａａ ｇ ｓ， Ｅａ ｈ ｓ ｂ ｏ ｕ ｆ ｃ ｅ ｉ ａ ｂ ｔ ｔｄｉ ｒ ｎ ｓｎ ｔ ｌａ ｅ ｃ ｕ ｖ ｌ ｍｅ ｏ
Ｊ ｎ ２ １ ａ． ０ｌ
家兔在发育过程 中外侧腓肠肌 内 ＭＨ ｓ ｙ Ｃ 变化 与诱 发 电位 的关 系
朱道 立 ，宋旭 延 ， 大刚 徐
（ 南通大学生命科学学院，江苏 南通 ２ ６０ ／ ２ ０７／ 上 海 交通 大学 医学院 ，上 海 ２ ０ ２ ） ００５
摘 要 ：为研究在生后不同年龄组家兔外侧腓肠肌各亚体肌纤维 Ｍ Ｈ ｓ ｙ Ｃ 变化与诱发电位的关系，探讨生后发
ｌｔ ｒ ａ ｔ ｃ ｅ ｕ ｓ ｌ ｎ ｒ ｂ ｉ ｔ ｏ ｔ ａａ ｇ ｓｗｅ ｅ ｅ ａ ｎ ｄ ｂ ｐ ｌｉ ｇ ｔ ｅ ｃ ｅ ｔ ｎ ｃ ｓ ｍｕ ａｅ ａ ｇ ｓｒ ｎ ｍｉ ｓ ｍｕ ｃｅ ｉ ａ ｂ ｔ ａ ｓｎ ｔ ａ ｅ ｒ ｘ ｍｉｅ ｙ ａ ｐ ｙｎ ｈ ｌｃ ｒ ｉ ｔ — ｌ ｏ ｓ ｐ ｌ ｏ ｉ
第５ Ｏ卷 第 １ 期 ２１ ０ １年 １ 月
中山大学 学报 （自然科学版 ） Ａ Ｔ Ｓ ＩＮ ＩＲ Ｍ Ｎ Ｔ Ｒ ＬＵ Ｃ Ａ ＣＥ ＴＡ Ｕ Ａ Ｕ Ａ Ｉ Ｍ Ｕ Ｉ Ｅ Ｓ Ａ Ｉ Ｓ Ｎ Ａ Ｓ Ｎ Ｎ Ｖ Ｒ １ ＴＳ Ｕ Ｙ Ｔ Ｅ Ｉ Ｔ
Ｖｏ． ０ Ｎｏ １ １５ ．
（ｃｏｌ ｆ ｉ ｃ ｎｅＮ ｎ ｎ ｎ ｅ ｔ， ａｔ ｇ ２０７ Ｃ ｉ ／ Ｓｈｏ ｏ Ｌ ｅ ｉ ｃ ，ａｔ ｇＵ ｉ ｓｙＮ ｎ ｎ ６０ ，ｈ ａ／ ｆＳ ｅ ｏ ｖｉ ｏ ２ ｎ
Ｓ ｈｏ ｏ Ｍ ｄｃ ｅ Ｓ ａｇ ａ Ｊ ｏＴ ｎ ｎ ｅｓｙ Ｓ ａ ｇａ ２ ０ ２ ， ｈｎ ） ｃ ｏｌ ｆ ｅ ｉｉ ，ｈ ｎ ｈｉ ｉ ｏ ｇＵ ｉ ｒ ｔ，ｈｎ ｈ ｉ ０ ０ ５ Ｃ ｉａ ｎ ａ ｖ ｉ
ｄｕ ｎ ｏ ｔ ａａ ｖ ｌｐ ｅ ｔ ｉ ｒ ｇ ｐ ｓｎ ｔ ｌｄｅ ｅ ｏ ｍ ｎ ． Ｋｅ ｒ ｓ： ｌｔ ｒ ｌｇ ｓｒ ｃ ｅ ｕ ｕ ｃｅ； ｍｕ ｃｅ ｓ ｂ ｏｕ ｅ； ｅ ｏ ｅ ｏｅ ｔａ ； ｍｙ ｓｎ ｈ ａ ｈ ｉ ｙ ｗｏ ｄ ａｅ ａ ａ ｔｏ ｎ ｍｉ ｓ ｍ ｓ ｌ ｓ ｌ ｕ ｖ ｌ ｍ ｖ ｋ ｄ ｐ ｔｎ ｉｌ ｏ ｉ ｅ ｖ ｃ ａｎ ｙ ｉｏ ｏ ｍ ； ａ ｔｍｙ ｓｎ ａ ｅ ｏ ｉ ｒｐ ｏ ｐｈ ｔ ｓ ｓｆ ｒ ｃ ｏ ｏ ｉ ｄ ｎ ｓｎｅ ｔｉ ｈ ｓ ａａ ｅ； ｒ ｂｂｔ ａ ｉ
ｈ ａｙ ｃ ａｎ ｉｏｏｍｓ （ ＨＣ ） ｏ ａ ｈ ｓｂ ｏｕ ｆ ｈ ａｅａ ａ ｔ ｃ ｅ ｕ ｓｌ ｎｒｂ ｉ ｈ ｗｅ ｅ ｖ ｈ ｉ ｓｆｒ Ｍｙ ｓ ｆ ｃ ｕ ｖ ｌｍｅｏ ｅｌｔｒｌ ｓｒ ｎ ｍｉｓｍｕ ｃｅｉ ａ ｂｔ ｓ ｏ ｄ ｅ ｔ ｇ ｏ ｓ
ｒｓｅｔ ｅｙＭｙ Ｃ ，Ｍｙ Ｃ （ Ｉ ） ｅｐ ｃ ｖｌ ｉ Ｈ ｓＩ Ｉａ Ｈ ｓＩ Ｉｄ １ｘ ，Ｍｙ Ｃ ａｄＭｙ ｓ ．Ｔ ｅ ｏｒｓｏｄ ｄｔ ｔｅｍｕ— Ｈ ｓＩ ｎ ＨＣ ｈｙｃｒ ｐｎ ｅ ｓ ｌｂ Ｉ ｅ ｏｈ ｃｅｆ ｅ ｈｎ ｔ ｅｔｐ （ Ｏ ， １Ｘ （ Ｏ） ＩＢ （ Ｇ） ａｄ Ｉ（ Ｏ） ｆ ｅ． Ｓ ，ｔｅｒｌ ｉ ｌ ｉ ｒ ｅｏｙ ｅ１ ｂ ｐ ｐ ｙ １Ａ Ｆ Ｇ） １ Ｆ ， １ Ｆ ｎ Ｓ ｉ ｒ ｏ ｈ ｅ ｔ ｎ ｂ ａｏ
１ ２ 操 作方 法 ．
具 有独特 的结 构蛋 白和 代谢 酶 联 合 表 达 特点 ，Ａ — Ｔ Ｐｓ ａｅ染色确 定 Ｉ Ｉ 、Ｉ Ａ、Ｉ 及 Ｉ 型肌 纤 维 型 通 常 Ｉ Ｘ Ｉ Ｂ 由肌球蛋 白重 链异构 体 （ Ｈ ｓ 所确 定 。Ｍｙ ｓ Ｍｙ Ｃ ） ＨＣ 足肌 原纤维 粗 丝的重 要结 构蛋 白质 ，它 能将化 学 能 量转 变成机 械能 以供 肌 肉收缩 。诱 发 电位 的产 生受 多种 素 的影 响 ，如 电压 、电流强 度 、刺 激频 率 、刺激 范 围 等 。根 据 家 兔 腓 肠 肌 外 侧 头 的起 止
朱道立等 ：家兔在发育过程 中外侧腓肠肌 内 Ｍｙ Ｃ 变化 与诱 发电位的关系 Ｈｓ
１５ ０
骨骼 肌纤 维是 由各 式 各样 的肌 原 纤 维 构成 的 ，
铵 等均 为 国产 分 析 纯 。十 二 烷 基 硫 酸 钠 （ Ｄ ） ＳＳ 、 高 相对分 子 质 量 标 准 蛋 白质 （ ｒｅ） Ｍａｋｒ 、腺 苷 三 磷 酸 酶系 Ｓｇ ａ 司 产 品。 ｉｍ 公
中 图分类 号 ：Ｑ ４ ４５
文献标 志码 ：Ａ 文 章编号 ：０２ — ５９（０１ １ ００ — ６ ５９ ６７ ２ １）０ — １４ ０
Ｔｈｅ Ｒｅａ ｉｎ ｏ ｙ ｓｎ ａ ｙ Ｃｈａｎ ｓ ｆ ｒ ｌｔｏ ｆＭ ｏ ｉ Ｈｅ ｖ ｉ Ｉｏ ｏ ｍ Ｃｈａ ｇ ｎ ｏ ｅ ｎ ｅ ａ ｄ Ｅｖ ｋ ｄ
ａ Ｉｄ （ Ｉ ） Ⅱｂ Ｉ ４种 ，对 应 于 骨 骼 肌 纤 维 表 型 ⅡＡ 型 （ Ｏ 型 ） ⅡＸ （ Ｏ 型 ） １Ｂ型 （ Ｇ 型 ） 、 Ｉ 或 Ｉ 、 ｘ 、 共 ＦＧ 、 Ｆ 、１ Ｆ 及 Ｉ型 （ Ｏ型 ）４类 。 Ｓ
关键 词 ：外侧腓肠肌； 肌亚体 ； 诱发电位；肌球蛋白重链异构体 ； 腺苷三磷酸酶； 家兔
ｔ ａ ｒ ｗｎ ｒ ｂ ｉｇ ｄ ｒ ｔｏ ｓｌ ｎ ｅ ｈａ ｎ ａ ｃ ｎ ｓ ｉ ｆｗｈｉｈ ｓ ｖ ｌ ｈ ｔｇ ｏ ａ ｂ ｔ ｕ ａｉｎ ｗａ ｏ ｇ ｒｔ ｎ ｉｆ ｎ ｙ ｉ ｐｔ ｏ ｃ ｕｂ ｏｕｍｅ ｈ ｉ ｓｇ ｅ ｔ ｅａ ｅ ｅ ．Ｔ ｓｗａ ａ ｙ ｒｌ ｔｄ ｒ ｌ ｗｉｈ ｔ ｅ ｃ ｍｐ ｎｅ ｔ ｐ ｏ ｏ ｔｏ ｆ ｆ ｅ ｙ ｅ ｏ ａ ｈ ｕｂ ｏ ｕ ． Ａｎ ｌ ｔｏ ｏ ｅ ｉ ｂ ｎ ｓ ｆ ｍｙ ｓｎ ｔ ｈ ｏ ｏ ｎ ｒ ｐ ｒｉｎ ｏ ｂ ｒ ｔ ｐ ｓ ｆ ｅ ｃ ｓ ｖ ｌ ｍｅ ｉ ｄ ｅｅ ｒｐｈ ｒ ｓｓ ａ ｄ ｏ ｏ ｉ
Ｐｏ ｅ ｔａ ｎ ｔ ｅ Ｌａ ｅ ａ ｓ ｒ ｃ ｅ ｉ ｓ ｏ ｂ ｉ ｔＰｏ ｔ ｔ ｌＤｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｔ ｎ ｉ ｌｉ ｈ ｔ ｒ ｌＧａ ｔ ｏ ｎ ｍ ｕ ｆＲａ ｂ ｔ ａ ｓｎａ ａ ｖ ｌ ｐ ｎ ｓ
ＺＨ Ｕ ｏ ｉ Ｓ Ｄａ ｌ， ＯＮＧ ． Ｘｕ ｈｕ， ｓ ＸＵ ｇａ ｇ Ｄａ ｎ
育期间肌纤 维 Ｍｙ Ｃ 组成和作用差异与表型之间的相关联 系 ，采用 电生理 记录仪结合 十二烷基硫 酸钠 一聚丙烯 Ｈｓ 酰胺凝胶电泳 （ Ｄ －Ａ Ｅ）检测外侧腓肠 肌各 亚体 。结果 表 明中间亚 体在刺 激时各 年龄组 的峰值 电压基 本相 Ｓ ＳＰ Ｇ 同 ，而外侧 亚体 和内侧亚体分别有些变化 。同时发现成 年家兔 的持续 时间都较 幼年 的长 ，这 可能与各 亚体的肌 纤维型构成 比例 有很 大关 系。外侧腓肠肌各亚体 的肌球蛋 白重链异 构体 （ Ｈ ｓ 电泳条 带分别显示 Ｍｙ Ｃ Ｍｙ Ｃ ） Ｈ ｓＩ ｌ
１２ １ 电刺激 仪 器 的连 接 与 参数 的设 置 引 导电 ．．
极 与前置 放大 器输 入端 连接 ，输 出端 连接 电脑 。刺 激 电极连 接刺 激器 输 出。给 出信 号记 录参数 ：采样 周期 ０ ０ ０ ２ｍｓ ． ５～ ． ，增 益 ２ ０ ，滤 波 １ｋ ００ ，时 间常 数０１ ． ，刺激 宽度 １４ ｓ ｍｐ一 ． ５ｖ ． ８ ｍ ，Ａ ８３ 。 １２ ２ 肌 肉蛋 白质 样 品 的准备 ．． 取 出家 兔 外 侧腓 肠 肌各 肌 亚体 ，分别 切碎 后 与液氮 一起 在研钵 中碾 磨 成粉 末状 ，置 放 于高 速冷 冻 离心 机 内 ，４ ，ｌ ２
ｂｅｗｅ ｎ ｄ ｆｅ ｅ ｃ ｆｆ ｎ ｔ ｎ， ｔ ｏ ｏ ｉｉｎ ｏ ｓ ｌ ｂ ｒＭｙ ｔ ｅ ｉｆｒ ｎ ｅ ｏ ｕ ｃ ｉ ｏ ｈｅ ｃ ｍｐ ｓｔ ｆｍｕ ｃｅ ｆ ｅ ＨＣｓ ａ ｄ ｐ ｅ ｏｙ ｅ ｗｅ ｅ ａ ｐ ｏ ｃ ｅ ｏ ｉ ｎ ｈ ｎ ｔｐ ｒ ｐ ｒａ ｈ ｄ
点 、肌束 排 列 、肌 运 动 终 板 分 布及 神 经 分 布 的 特 征 Ｊ ，可 明确分 为 内 侧 亚 体 、 中问 亚 体 和 外 侧 亚
体 ３个 肌亚体 。根 据蛋 白质 相对 分子 质量 大小 的不 同 ，通 过 十 二 烷 基 硫 酸 钠 一聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电
泳 （ ｏｉｍ ｄ ｄｃｌ ｕｐ ａｅｐ ｌ ｃ ｌｍ ｄ ｅ ｅ ｓｄｕ ｏ ｅｙ ｌｈ ｔ—ｏ ａｒ ａ ｉｅｇｌ — ｓ ｙ ｙ
ｓ ｉｓｉ ｄ ｃ ｔｄ ｔ ａ ｎ ｙ ｔ ｅ ｉ ｔｒ ｄ ａｅ ｓ ｂ ｏｕ ｕ ｔ ｎ ｉａ ｅ ｈ ｔｏ ｌ ｈ ｎ ｅ ｍｅ ｉｔ ｕ ｖ ｌ ｍｅｇ ｐ ａ ｏ ｔｇ ｓｂ ｓｃ ｌ ｎｉ ｒ ， ｂ ｔｔ ｅ ｌｔｒ ｅ ｋ ｖ ｌａ ｅ ｗａ ａ ｉａ ｙ ｕ ｆ ｍ ｌ ｏ ｕ ｈ ａｅ ａ ｌ
ｌｃ ｏ ｈ ｒｓ ，Ｓ ＳＰ Ｇ ） 识别 肌球 蛋 白重链 异构 ｅｔ ｐ ｏｅｉ Ｄ —Ａ Ｅ ｒ ｓ 体 的分 布 。以家兔 外侧 腓肠 肌为 实验 对象 ，深 入研 究 其各肌 亚体 的生 理生 化特 征 ，以充 实骨骼 肌运 动
ｓ ｂ ｏｕ ｅ ａ ｄ ｔ ｅ ｍｅ ａ ｕ ｖ ｌｍ ｅ ｗｅ ｅ ｓ ｐ ｒ ｔ ｌ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ Ａｔｔ ｅ ｓ ｍｅ ｔｍ ｅ， ｉ ｃ ｕｄ ｂ ｅ ｎ ｕ ｖ ｌ ｍ ｎ ｈ ｄｉｌｓ ｂ ｏｕ ｒ ｅ ａ ａｅｙ ｓ ｍ ｈａ ｇ ． ｈ ａ ｉ ｔ ｏ ｌ ｅ ｓ ｅ