微生物平板划线法

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培养基
在土壤、水、食品、空气以及人和动、植 物中，不同种类的细菌混杂地生活在一起。若 要研究其中某种细菌，就必须将各细菌进行 分离，以得到只含有这一种细菌的纯培养。当 细菌分离成纯种后，常需要接种到有关的培养 基中，以测试其各种生物学性状，不同的细菌
需要不同的培养基进行培养。
培养基的种类
按其物理性状分为： 固体培养基 液体培养基 半固体培养基
变形杆菌培养 物痢疾杆菌培
养物 半固体琼脂
培养基
平板划线法
平板划线法主要是借划线而将细菌在琼脂 平板表面分散开，使单个细菌能固定在某一点， 生长繁殖后形成单个的菌落从而达到分离纯种 的目的。常用于分离单个菌落，也可用于观察 细菌的生长状况和观察某些生化反应。
平板划线法——接种方法
（一）标记 在培养皿底面，用记号笔注明接种
（4）旋转琼脂平板90度，接种环不必再灭菌 ，接三区连续平行划线，划满平板其余部分，此 视为四区。
各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐 渐稀释的目的。
平板划线法——接种方法
平板划线法——接种方法
（5）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养 皿倒放，送进37℃温箱培养。
（6）培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平 板表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边 缘、表面结构、透明度、颜色等性状。
的菌名、接种者姓名、日期等。
平板划线法——接种方法
（二）灭菌接种环 点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环
，并放置火焰中烧灼灭菌，先将接种环的接 种丝部分置于火焰中，待金属丝烧红并蔓延 至金属端，再直接烧灼金属环直至烧红，然 后由金属环至金属杆方向快速通过火焰，随 后再反方向通过火焰，如此2~3次。然后将接 种环移开火焰，待其冷却。
平板划线实验
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细菌的培养
细菌的培养
细菌培养是一种用人工方法使细菌 生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布 极广，数量大，种类多，它可以造福人 类，也可以成为致病的原因。大多数细 菌可用人工方法培养，即将其接种于培 养基上，使其生长繁殖。培养出来的细 菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是 一个复杂的技术。
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按用途分为： 基础培养基、加富培养基、选择培
养基、鉴别培养基
3
细菌接种方法
常见的几种细菌的培养和基接种方法举例
菌种
培养 基
平板划线接种 斜面培养基
法
接种法
液体培养基 接种法
葡萄球菌和大 肠杆菌的混合
菌液
大肠杆菌培养 物
大肠杆菌培养 物枯草杆菌培
养物
普通琼脂平板
琼脂斜面 培养基
普通肉汤 培养基
穿刺接种法
平板划线法——接种方法
（四）分离划线接种细菌（四区接种法） （1）左手手掌持琼脂平板培养基，大
拇指与中指轻轻将平皿盖子拿起，右手持接 种环在琼脂平板上端来回划线，涂成一细菌 薄膜（约占平板的1/10），视为一区。划线 时使接种环与接种平板面呈30~40度角，以 腕力在平板表面行轻而快地来回滑动动作。
平板划线法——接种方法
（2）旋转琼脂平板90度，烧灼接种环，以 杀灭环上的残留细菌，将接种环触及培养基表面 以使其冷却。灭菌接种环通过薄膜处作连续平行 划线（约占平板1/5），此视为二区。
平板划线法——接种方法
（3）旋转琼脂平板90度，灼烧接种环灭菌并 使之冷却。将灭菌接种环接二区连续平行划线（ 约占平板1/4），此为三区。
平板划线法——接种方法
（三）取菌种 左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液
的试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试 管塞，将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中， 取一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管 管口及试管塞再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管 塞，放至原来的位置。