河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(809)

河南农业大学考研专业课《现代分子生物

学》

课程试卷（含答案）

__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试

考试时间：90 分钟年级专业_____________

学号_____________ 姓名_____________

1、分析题（5分，每题5分）

1. 现要求以某一植物或动物组织cDNA为模板扩增A基因，并构建该基因的重组表达质粒pET28aA，并在大肠杆菌BL21中进行表达。[宁波大学2019研]

答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：

①将组织在液氮中磨碎，每50～100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品，充分吹打混匀。

②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置

5min。

③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中，投身于等体积异丙醇，室温放置10min。

⑤4℃，10000g离心10min，此时可在离心管底部凝固仔细观

察到白色沉淀，即为RNA。

⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀，4℃，7500g以下，离心5min，弃上清。

⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。

（2）检测RNA质量的方法如下：

①凝胶成像：取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖凝胶电泳，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在18S条带的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯度良好，大分子等其他物质自然界的污染可以接受。

解析：

2、判断题（55分，每题5分）

1. 蛋白质的磷酸化和去磷酸化是可逆反应，该可逆反应是由同一种酶催化完成的。（）

答案：错误

解析：蛋白质激酶是由蛋白激酶催化的，而顺便磷酸化是由蛋白质磷酸酯酶催化。

2. 线粒体DNA的编码方式与通用密码子不同，有些密码的编码氨基酸和编码性质不同。（）

答案：正确

解析：

3. 当大肠杆菌培养基中的葡萄糖浓度较低时，在培养基中加入乳糖，可以诱导相应的乳糖操纵子启动表达。（）

答案：错误

解析：当培养基中的葡萄糖浓度较低时，在培养基中参与乳糖，不会

诱导相应的乳糖操纵子启动表达，只有当柠檬酸消耗完全，才会诱导

全面铺开相应的乳糖操纵子启动表达。（）

4. DNA半不连续复制是复制时一条链的合成方向是5′→3′，而另

一条链的合成方向是3′→5′。（）

答案：错误

解析：DNA的半不连续复制是指DNA复制过程中，前导链的连续复

制和后随链的不连续复制的现象。

5. Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于

检测结构基因的表达。（）

答案：错误

解析：Northern印迹用于化验基因的转录；Southern印迹只是证明

是否有结构基因的存在。

6. 增强子通过结合某些蛋白质因子，改变染色质DNA的结构而促进转录。（）

答案：正确

解析：增强子是DNA上为一小段可与蛋白质结合的区域，与蛋白质紧密结合之后，基因的转录作用将会加强。

7. 在所有原核与真核生物中，AUG都是唯一的翻译起始密码子。（）

答案：错误

解析：在所有真核生物与大多数原核生物中，AUG是翻译的起始密码子。少数细菌（属于原核生物）以GUG（缬氨酸）或UUG为起始密码子。线粒体和叶绿体使用的遗传密码稍有差异，如线粒体和叶绿体以AUG、AUU、AUA为起始密码子。

8. 癌基因仅存在于肿瘤细胞中，正常细胞一旦表达即引起细胞的恶变。（）

答案：错误

解析：癌基因不仅仅存在肿瘤细胞中，在正常细胞也有存在和传达，只有在多种诱因存在时，细胞才会发生癌变。

9. 线粒体DNA的复制方式是共价延伸。（）

答案：错误

解析：线粒体DNA的复制方式是Dloop复制方式。

10. RNA的化学稳定性比DNA高。（）

答案：错误

解析：由于2′羟基的存在，RNA化学稳定性比DNA差。

11. 癌细胞生长旺盛，因而内质网特别发达。（）

答案：正确

解析：内质网是细胞内除核酸以外的一系列重要的生物大分子，如蛋白质、脂类（如甘油三酯）和果糖合成的基地。癌细胞生长旺盛，需要大量的蛋白质、脂质、糖类等，因而内质网特别更发达。

3、名词解释（50分，每题5分）

1. Intron[暨南大学2019研]

答案：Intron的中文名称是内含子，又称间隔顺序，指真核基因中无编码作用的间插序列，这些序列被转录在前体RNA中，经过剪接被去除，最终不存在于成熟RNA分子中。在真核生物的基因中会，内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因。真核基因所含内含子的数目、位置和长度大不相同。

解析：空

2. 启动子[暨南大学2019研]

答案：启动子是指一段位于结构基因5′端上游区的DNA序列，它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的位点。原核古菌的启动子含有10区和35区，真核生物启动子含有TATA框和CAAT框，这些区域是启动子与

RNA聚合酶结合的位点。启动子与RNA聚合酶的结合活性的改变可

以基因的表达量。

解析：空

3. RNA的组成型剪接（RNA constitutive splicing）

答案：RNA的组成型剪接是指编码蛋白质的不连续基因通过RNA剪

接将内含子从mRNA前体中依次除去，规范便成地将外显子剪接成成熟的mRNA的过程。RNA剪接是真核细胞基因表达操作过程中非常

重要的一个生物过程，通过RNA剪接，可以产生许多具有功能的，带有编码信息的mRNA，它对生物的发育及进化至关重要。

解析：空

4. RACE[宁波大学2019研]

答案：RACE的中文名称是cDNA末端快速扩增技术，指是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5′和3′末端的有效方法。RACE电子技术的原理是利用poly（A）的尾巴作为引物的位点，反

转录合成第四条cDNA，利用反转录酶MMLV的末端转移酶活性，

在反转录达到第一链的5′末端时自动加上3～5个（dC）残基。退火

后（dC）残基与含有SMART寡核苷酸序列Oligo（dG）通用接头

引物配对后，转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头。然后用一个含有部分中游接头序列的通用引物作为上游引物，用一个

基因特异引物2作为下游引物，以SMART第一链cDNA为模板，进行PCR循环，把目的基因5′末端的cDNA片段扩增出来。