《基因工程》复习题（填空和选择）（15页）

《基因工程》复习题（填空和选择）（15页）
基因工程复习题（填空和选择）
复习题1
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning），gene cloning 的基本要点
有，和。

2. 是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。

它可以是连续
的，也可以是；可以是，也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以
3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的、、
和等与基因研究相关的内容。

4.启动子（Promotor）是指。

通常一个Gene 是否
表达，是关键的一步，是起决定作用的。

在转录过程中，Promoter 还是的结合位点。

5.原核生物的RNA polymerase 主要由两部分组成：和，其中σ-因子并
不参与RNA 的合成，它的作用主要是。

6.从到的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其中可包
括一个或者多个Gene 。

7.转录终止子主要有两种，一种是，另一种是。

8.重叠基因（Overlapping gene）是指，间隔基因（Interrupted gene）是指
复习题2
二、填空题：
1.Ecok 的一般分子组成为R2M2S ，在这些亚基中，R 亚基具有的作用，M 亚
基具有的作用，S 亚基具有的作用。

2.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的命名是按属名和种名相结合的原则的，通常第一个大
写字母取自，第二、三个字母取自，第四个字母则用表示。

3.Ⅱ型限制酶识别回文对称序列，在回文序列或切割DNA ，产生带（3'
－OH）和（5'－P 基团）的DNA 的产物，需（Mg2+）的存在才能发挥活性，相应的修饰酶只需SAM 。

4.识别相同序列的限制酶称
5.有些限制酶只切割双链DNA 中的一条链，产生单链缺口，即
6.个体间DNA 限制性片段长度的差异叫
7.DNA 载体经HindⅢ切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影响载体与外源DNA 的连接效率，
常用的防止载体自连的方法有、。

8.完全的回文序列应具备两个特点即和。

9.Dcm Methylase（Dcm 甲基化酶）的识别序列为和，该酶的作用位点
为。

10.大肠杆菌中至少有三种依赖于甲基化的限制系统、、。

它们识别的序列各不相同，但只识别经过甲基化的序列，都限制CpG 甲基化酶作用的DNA 。

11.分别写出以下限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的识别序列EcoRⅠ、Sau3A Ⅰ、HindⅢ。

12.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）通常保存在（50%）浓度的甘油溶液中。

13.载体和外源DNA 经酶切，在进行下一步操作前，需消除限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）
的影响。

常用的方法有、、、。

参考答案：EDTA 法；加热法；苯
酚抽提法；试剂盒除酶法
14.反转录酶来自AMV 或Mo－MLV ，即依赖于RNA 的DNA 聚合酶，它有活性，但
无活性。

15.末端转移酶来源于，是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的
DNA 聚合酶，在存在下，末端转移酶催化dNTP 加于DNA 分子的3' 羟基端。

参考答案：小牛胸腺；Mg2＋
16.T4 DNA 连接酶的分子量为68kDa ，它可以催化DNA 5' 磷酸基与3' 羟基之间形成磷酸二酯键。

反应底物为粘端、切口、平端的RNA 或DNA 。

低浓度和可以提高平端连接效率。

参考答案：聚乙二醇PEG；单价阳离子
三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.限制性内切酶一般保存在（）浓度的甘油溶液中。

A.10%
B.20%
C.50%
D.60%
2.限制性图谱与限制性片段长度多态性（RFLP）图谱的最显著区别在于（）
A. 前者是物理图谱后者是连锁图
B. 前者是连锁图后者是物理图谱
C. 前者是遗传图谱后者是物理图谱
D.前者是物理图谱后者是遗传图谱
3.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（）
A. 既可以作用于双链DNA ，又可以作用于单链DNA
B.只能作用于单链DNA
C. 只能作用于双链DNA
D.只能作用于RNA
4.已知某一内切酶在一个环状DNA 上有4 个切点，当用此酶切割该环状DNA ，可以得到（）个
片段
A. 3
B. 4
C. 5
D. 6
5.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶星星活性的主要原因之一，防止的
办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在（）以下
A.5%
B. 10%
C. 20%
D.30%
6.在下列进行DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（）
A..反应体积
B.酶反应温度
C. 反应时间
D.酶量
7.DNA 被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列原因中，哪一项不太可能（）
A. 蛋白质（如BSA）同DNA 结合
B.有外切核酸酶污染
C.酶失活
D.酶切条件不适合
8.nick 与gap 的区别在于（）
A.前者是断开了一个磷酸二酯键，后者是指DNA 的单链中有较小的缺失
B.前者是是指DNA 的单链中有较小的缺失，后者是指断开了一个磷酸二酯键
C.二者无本质区别
D.前者无法回复，后者可以回复
9.限制酶的命名遵循一定的原则，涉及来源（宿主），菌株或生物型。

命名时（）
A.属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）
B.种名第一字母，属名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）
C.属名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）
D.种名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）
10.以下对同裂酶的描述中，哪一项是正确的（）
A.识别相同序列的限制酶称同裂酶
B.可以产生相同的粘性突出末端的限制酶称同裂酶
C.同裂酶的切割位点一定相同
D.同裂酶的切割位点不相同
11.下列哪一种酶作用时需要引物（）
A. 末端转移酶
B.反转录酶
C.DNA 连接酶
D.限制酶
12.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下述描述中只有（）不恰当
A.由作用于同一DNA 序列的两种酶构成
B.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA 进行修饰
C.不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
D.这一系统的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶
13.限制性内切核酸酶可以特异性地识别（）
A. 特定的三联密码
B.双链DNA 的特定碱基对
C.双链DNA 的特定碱基序列
D.单链DNA 的特定碱基序列
14.在大肠杆菌中，大多数都有三个位点特异性的DNA 甲基化酶，以下选项中哪一种酶不包括在内（）
A. dam
B. dcm
C. EcoKⅠ
D. SssⅠ
15.在大肠杆菌中，至少有3 种依赖于甲基化的限制系统，以下选项中不属于这3 种的为（）
A. mcrA
B. mcrBC
C. mcrD
D. mrr
16.下面有关限制酶的叙述哪个是错误的（）
A.. 限制酶是外切酶而不是内切酶
B. 同一种限制酶切割DNA 时留下的末端序列总是相同的
C. 一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA ，产生粘末端
D.一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA ，产生平末端
17.DNA 连接酶在体内的主要作用是在DNA 复制、修复中封闭缺口，下列对DNA 连接酶的描述中，
哪项是正确的（）
A. 将双链DNA 分子中的5' 磷酸基团同3'－OH 末端重新形成磷酸二酯键
B.作用时不消耗能量
C. 需要Mn2+ 等二价辅助离子
D.也可以连接RNA 分子
复习题3
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.载体（Vehicle）的类型有，，，等。

2.Gene cloning 是指，
基因文库（Gene library）是指。

3.Plasmid 的定义是，Plasmid 能进行自我复制，大多数为链
状DNA 分子，大小一般为kb。

4. 即为质粒的拷贝数，按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为
和，质粒多数是一些具有转移能力的大质粒；质粒多数是一些不具有转移能力的小质粒。

5.松弛型质粒和严谨型质粒融合以后，杂合质粒一般优先使用的复制子。

6. 称之为质粒的不相容性。

如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞
中，则它们属于（填相同或不同）的不相容群。

7.质粒具有转移性，它是指，它需要（移动基因mob），（转移基因tra）和（转移起
始位点）
8.根据质粒的转移性可以将质粒分为和，一般大质粒都是，
一般都是小质粒，其上没有
9.按其用途可将标记基因分为选择标记和筛选标记，选择标记一般用于，筛选标记一般用
于
11.pBR322质粒是基因工程最重要的人工质粒之一，它的大小约为kb，用于其组建的三个亲
本质粒是, ,和。

此质粒具有一个colE1松弛型质粒复制子，两个筛选标记氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，其中colE1松弛型质粒复制子来源于，氨苄青霉素抗性基因来源于，四环素抗性基因来源于
12.pUC 系列的质粒载体是由和两种质粒构建而来的，其中氨苄青霉素抗性
基因来自于，多克隆位点MCS 来自于。

pUC 系列的质粒载体一般是成对存在的如pUC18 和pUC19 ，其主要区别是。

14.λ噬菌体Genome 的长度约为kb，其DNA 分子为（填单或双）链。

它
的DNA 分子既可以以状存在也可以以环状存在，而且可以自然成环，其原因是在λ噬菌体的线性分子的两端各有一个长度为个碱基的天然粘性末端，这种粘性末端可以自然成环，成环后的粘性末端就叫做。

15.λ噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入Lytic growth 也可以进入Lysogenic state 。

如果其基因组
DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入；它也可以选择进入，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。

16.在λ噬菌体载体中，常用的选择标记有，cⅠ基因失活，和等。

17.改造后的λ噬菌体才可用作载体，按照改造方式的不同可将其分为两种类型，即插入型载体
（insertion vectors）和替代型载体（replacement vectors）。

其中Insertion vectors 是指；
Replacement vectors 是指
18.λgt10 是一个由λ噬菌体衍生而来的insertion vectors ，主要用于。

它缺失了含有溶
源整合的；λgt11 载体也是一种insertion vectors ，该载体的最大特点是在最左侧可替代区置换了一段基因，可编码β-半乳糖苷酶，在IPTG/X-gal 平板上可形成色噬菌斑。

参考答案：克隆小的cDNA；b257；lacZ；蓝
19.λ噬菌体由于受到包装的限制，插入外源DNA 片段后，其总的DNA 长度应该在噬菌体genome
的范围内。

20.Cosmid 实际上是由和构成的杂合载体，也可以说是带有序
列的质粒。

22.Cosmid 的组成包括三个部分：，和，其中复制子来源
于，cos 序列来源于。

23.λ噬菌体的最大克隆片段是kb，Cosmid 的最大克隆片段可达到kb。

24.利用λ噬菌体载体构建的gene library 中，文库是以的形式存在的；用质粒载体构建
的gene library 是以的形式存在的；粘粒载体构建的gene library 是以的形式存在的。

25.M13 噬菌体颗粒是状的，其基因组为（填单或双）链DNA 。

它只感染
性大肠杆菌，感染宿主以后，其噬菌体颗粒的释放不像λ噬菌体那样要裂解宿主菌，而是。

28.M13K07 辅助噬菌体是的衍生株，它带有一个来自的复制起点，还带有一
个来自的卡那霉素抗性基因，用作选择标记；基因Ⅱ带有一个的突变，导致基因蛋白质第40 位氨基酸由甲硫氨酸变为异亮氨酸。

29.YAC 载体基本组成元件有，，，
和。

30.表达载体（Express vector）是在常规载体的基础上衍生而来的，其构建的原理主要是增加一
个，以及有利于表达产物的分泌、分离或纯化的元件；穿梭载体（Shuttle vector）是指
三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.氨苄青霉素的工作原理为（）
A. 可以抑制细胞壁肽聚糖的合成
B. 可以抑制核糖体的转位
C. 可以与核糖体50S 亚基结合并抑
制蛋白质合成D.可以与核糖体30S 亚基结合并抑制蛋白质合成
3.载体所具备的特点中，以下描述不恰当的是（）
A. 必须具备复制起点，能够自主复制
B.必须具备合适的酶切位点，供外源DNA 片段插入
C.有一定的筛选标记，用于筛选
D. 必须具有较高的拷贝数，便于制备
4.复制子由三部分组成，以下不属于的为（）
A. 复制起点
B. 复制区
C. 复制终点
D.启动子
5.pBluescript M13 载体在多克隆位点的两侧引入了T7 和T3 两个噬菌体的启动子，这样增加了该载
体的功能，以下4 种功能哪一种是不正确的（）
A. 可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析
B. 利用这两个启动子的通用引物进行PCR 扩增
C. 利用通用引物进行序列分析
D.利用这两个启动子进行定点突变
6.以粘粒为载体转染受体菌后，平板上生长的菌落会出现大小不
一、生长速度不一的现象，其原因是（）
A. 营养成分不足
B.重组后的质粒复制不稳定
C. 重组后的粘粒整合到宿主染色体上
D. 重组体中插入片段的大小不同
7.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA 共同构成的，其中来自质粒的主要结构是（），而来自噬菌体的主要
结构是（）
A.复制区；
B. IG 区IG 区；
C. 复制区多克隆位点；
D. IG 区IG 区；多克隆位点
9.M13 单链噬菌体的复制分为三个阶段，以下哪一项不属于此（）
A. SS→RF
B. RF→RF
C. RF→SS
D. SS→SS
10.λ噬菌体DNA 和M13 单链噬菌体DNA 在成熟前的DNA 复制类型为（）
A. 滚环复制模型
B.θ复制模型
C. 前者为滚环复制模型，后者为θ复制模型
D.前者为θ复制模型，后者为滚环复制模型
12.以下对粘粒为载体的重组体的描述正确的是（）
A. 各重组体在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的
B. 各重组体在平板上生长的速度不同，转化子中插入片段的扩增量也是不同的
C. 各重组体在平板上生长的速度相同，而且转化子中插入片段的扩增量也是相同的
D.各重组体在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的
13.下列哪种克隆载体对外源DNA 的装载量最大（）
A. 粘粒
B. 酵母人工染色体（Y AC）
C. 质粒
D.λ噬菌体
14.同一种质粒DNA ，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是（）
A. L DNA>OC DNA>SC DNA
B. SC DNA>L DNA>OCDNA
C. SC DNA> OC DNA> L DNA
D. OC DNA>SC DNA> L DNA
15.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确（）
A. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点
B. 在不同的宿主中具有不同的复制机制
C. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶
D.在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率
16.反向重复序列：（）
A. 参与转座子的转座
B.可以是某些蛋白的结合位点
C.可以回折形成发夹结构
D.以上说法都不对
17.λ噬菌体线性DNA 分子的两端各有一个（）个碱基组成的天然黏性末端
A. 10
B. 12
C. 14
D. 16
18.下列关于细菌人工染色体（BAC）的特点描述，除（）以外都是正确的
A. BAC 载体在细菌中以环状超螺旋状态存在，使分离操作比YAC 容易
B. BAC 载体在大肠杆菌中为高拷贝
C.用电击法将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高了10～100 倍
D.克隆在载体上的外源片段可以直接进行末端测序
19.粘粒（cosmid）是一种人工建造的载体，下列对它的描述中哪一项是不正确的（）
A. 它具有cos 位点，因而可以进行体外包装
B.它具有质粒DNA 的复制特性
C. 进入受体细胞后，可引起裂解反应
D. 进入受体细胞后，可引起溶源化反应
20.松弛型质粒：（）
A. 在寄主细胞中拷贝数较多
B. 采用θ型复制方式
C.一定具有抗性标记
D. 以上均正确
21.关于质粒的不相容性，下列哪一种说法正确（）
A. 相同相容群的质粒能够共存于同一个细胞
B. 质粒可以分成若干个相容群，但不能分为若干个不相容群
C. 如果两个质粒不相容，说明它们的复制机制相同属
D. 于同一个不相容群中的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数和分子量也相同
22.一般情况下，质粒的存在情况以下描述正确的是（）
A. 独立存在
B. 整合在染色体上
C. 既可以整合在染色体上，也可以独立存在
D.不能独立存在
24.下列哪一项不是质粒载体必备的基本特征（）
A. 可以独立复制
B. 有选择标记
C. 有多克隆位点
D.含lacZ
28.下面关于松弛型质粒的性质描述中，（）是不正确的
A. 通常带有抗性标记
B.可以使用氯霉素作用增加拷贝数
C.同严谨型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
D.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数
30.以下不是表达载体所必须的条件是（）
A. 必须具备很强的启动子
B. 必须具备很强的终止子
C. 启动子不需要受控制
D. 所产生的mRNA 必须具有翻译的起始信号
复习题4
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.抽提含pBR322 系列质粒的细菌前，需在培养基中加入一定浓度的氯霉素，此氯霉素的作用
是。

2.在用SDS分离DNA时，要注意SDS的浓度，0.1%和1%SDS 的效果是不同的，前者，
后者
3.在Southern hybridization 中，DNA 经琼脂糖凝胶电泳后，通常须经NaOH 处理，其原因
是。

4.复性是指，杂交是指。

5.DNA 或RNA 在杂交前，需将其转移到膜上，常用的膜有和。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.用SDS－酚抽提DNA 时，SDS 浓度十分重要，0.1% 和1% 的SDS 的作用分别为（）
A. 前者能将DNA 和RNA 一起分离出来；后者只能将RNA 分离出来
B. 前者只能将RNA 分离出来；后者能将DNA 和RNA 一起分离出来
C.二者均只能将DNA 分离出来
D. 二者均能将DNA 和RNA 一起分离出来
2.从细胞或组织中分离DNA 时常用蔗糖的作用（）
A. 抑制核酸酶的活性
B. 加速蛋白质的变性
C. 保护DNA ，防止断裂
D. 有利于细胞破碎
3.以下保存DNA 的温度中，哪一种是最好的（）
A. 室温
B. 4－5℃
C. －20℃
D. －70℃
4.在分离DNA 过程造成DNA 分子断裂的因素很多，下列说法中哪一项是不正确的（）
A. 核酸酶的降解
B. 化学降解
C. 保存液中未加一滴氯仿
D. 物理剪切
5.关于cDNA 的最正确的说法是（）
A. 以mRNA 为模板合成的双链DNA
B. 同mRNA 互补的单链DNA
C. 同mRNA 互补的双链DNA
D. 以上都正确
6.一个典型的哺乳动物细胞中，大部分的RNA 为（）
A. tRNA
B. mRNA
C. rRNA
D. 核内小分子RNA
7.Agarose-EB 电泳法分离纯化cccDNA 的原理是（）
A. EB 可以较多的插入到cccDNA 中，因而迁移速度快
B. EB 不容易插入到cccDNA 中，因而迁移速度快
C. EB 不容易插入到线性DNA 中，因而迁移速度快
D. EB 不容易插入到线性DNA 中，因而迁移速度慢
8.下列哪一项不是Southern blotting 的步骤（）
A. 用限制酶消化DNA
B. DNA 与载体的连接
C. 凝胶电泳分离DNA 片段
D. DNA 片段转移到硝酸纤维膜上
9.Southern blotting 的DNA 探针（）杂交
A. 只与完全相同的片段
B. 可与用某些限制性内切酶切成的DNA 片段
C. 可与任何含有相同序列的DNA 片段
D. 可与任何含有互补序列的DNA 片段
10.以下（）方法才能说明外源基因进行了表达
A. 原位菌落杂交
B. Southern blotting
C. Northern blotting
D. Western blotting
11.斑点杂交的缺点在于（）
A. 杂交速度较Southern blotting 要快
B. 一次比Southern blotting 可以分析多个样品
C.可分析混合的DNA 样品中是否存在能与特定探针杂交的序列
D. 假阳性较高
12.菌落杂交筛选重组体时，（）
A. 需要外源基因的表达
B. 不需要外源基因的表达
C.不需要对菌体进行处理
D.以上说法都正确
13.Southern blotting 与Northern blotting 的区别在于（）
A. 印记的对象不同，前者是对DNA ，后者是对RNA
B. 印记对象不同，前者是对DNA ，后者是对蛋白质
C. 电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件
D. 电泳条件相同，均为非变性条件
14.以下不属于核酸探针的是（）
A. RNA 探针
B. 基因组探针
C. cDNA 探针
D. 抗体
复习题5
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.PCR 是的简称。

PCR 反应体系的基本要素
有，，，等。

2.PCR 反应过程分为三个步骤，即，和。

3.在PCR 反应体系中，Taq polymerase 的合成速率取决于，，dNTP 的
浓度，，等。

4.PCR 反应体系中往往要加入适量的矿物油，其作用是。

5.PCR反应过程的最适温度仅与有关，其定义是指。

6.一般常规的PCR 仅能扩增kb 以下的DNA 片段。

7.PCR 的标准缓冲液含mmol/L KCl，mmol/L Tirs.HCl，mmol/L
MgCl2。

8.A/T cloning 是利用。

9.随机引物（Random primer）是指
10.在简并引物的设计中，常常要用到dI（次黄嘌呤），其原因是。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.聚合酶链反应可表示为（）
A. PEC
B. PER
C. PDR
D. PCR
2.催化聚合酶链反应的酶是（）
A. DNA 连接酶
B. 反转录酶
C. 末端转移酶
D. Taq DNA 聚合酶
3.以下各项中不是PCR 反应所必须的是（）
A. 模板和引物
B. dNTP
C. Taq 酶和buffer
D. 甘油
4.关于PCR 技术的叙述，下列哪项是错误的？（）。

A. 以DNA 复制为基础而建立起来的技术
B. 利用PCR 技术可完全无误地扩增基因
C.反应体系需模板、一对引物、4 种dNTP 、耐热DNA 聚合酶和缓冲溶液
D. 以变性-退火-延伸为一周期
5.有关PCR 的描述下列哪项不正确：（）
A. 是一种酶促反应
B. 引物决定了扩增的特异性
C. 扩增的对象是氨基酸序列
D. 扩增的对象是DNA 序列
6.以下关于简并引物的描述中，正确的是（）
A. 简并引物是根据已知DNA 序列设计的引物群
B.简并引物是根据已知蛋白质的氨基酸序列设计的引物群
C.设计简并引物不需要考虑密码子的偏爱性
D.简并引物与普通的PCR 引物是相同的
7.PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（）
A. 退火温度过低
B. 退火温度过高
C. dNTP 浓度过高
D. 循环次数过多
9.设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的（）
A. 5' 端特定序列互补
B. 5' 端任意序列互补
C. 3' 端特定序列互补
D. 3' 端任意序列互补
复习题6
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1. 年，创立了测定DNA 序列双脱氧终止法；同年，Maxam 和Gilbert 发展了。

3.在开始测序前，必须根据待测序列区的长度，所要求的测序精确度以及现有的设施来制定测序总策略。

根据测序的目的，通常可将测序分为和。

4.常用的双脱氧终止法测定DNA 序列，其长度一般不会超过1Kb ，因此进行大分子DNA 测序时，
需，常用的方法有、和。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法（Maxam-Glbert）和酶学序列分析法（Sanger）。

酶学测序法的基本原理/优点是( )
A. 碱基与特殊燃料间不同的相互作用
B. 限制性位点与DNA 末端标记的相关性
C.一个合成引物的延伸和DNA 修复合成的可靠终止
D. 可同时对DNA 双螺旋的两条链进行测序
2.有关DNA 序列自动化测定的不正确叙述是( )
A. 用荧光代替了同位素标记
B. 激光扫描分析代替人工读序
C. 基本原理与手工测序相同
D. 不再需要引物
复习题7
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.基因突变（Gene mutation）的类型有，，等。

3.利用PCR 技术介导的定点诱变（Site-directed mutagenesis）。

较常用的方法一般有三种
即，和。

复习题8
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.构建Gene library 时，应根据所要分离的外源基因的大小选择合适的载体，这些载体通常包含有λ噬
菌体、YAC 以及、和等。

2.构建cDNA library 时，cDNA 的第二链合成的方法主要有、
和。

3.构建低丰度mRNA 的cDNA library ，需进行富集处理，常用的富集方法有、
和。

4.常规用于构建cDNA library 的两种λ噬菌体载体是λgt10 和，λgt10 用于构建只
用核酸探针筛选的文库，而后者用于
6.Gene cloning 的目的是，常用的方法有、和等。

7.噬菌斑形成选择法有两种判断标准，一是，二是。

8.基因克隆的本质是，重点是。

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.构建基因组DNA 文库时，首先要分离细胞的（）
A. 染色体DNA
B. 线粒体DNA
C. 总mRNA
D. tRNA
2.基因组代表一个细胞或生物体的（）
A. 部分遗传信息
B. 整套遗传信息
C. 可转录基因
D. 非转录基因
4.关于DNA 接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确（）
A. 给外源DNA 添加适当的切点
B. 人工构建载体
C. 调整外源基因的可读框
D. 增加调控元件
5.根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA 文库等。

在下列文库中，（）属于cDNA
文库
A. Y AC 文库
B. MAC 文库
C. 扣减文库
D. BAC 文库
复习题9
二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.转化（Transformation）是在1928 年由格里菲思在对菌进行研究时发现的。

转导
（Transduction）是1952 年由莱德伯格在研究菌的遗传重组时发现的。

2.重组DNA 导入宿主的一般方法有，，，和
等。

3. 称为感受态细胞（Competent cell）。

4.有关感受态出现的机制，目前主要有两种假说：和。

5.外源DNA 可以通过转化（transformation）的方法导入到宿主菌中，transformation 是指的
过程。

常用的transformation 的方法有，和。

6.转染（Transfection）是指的过程；感染（Infection）是
指。

7.细菌结合（Conjugation）是指的过程。