初识病理学 ppt课件

粘膜和皮肤组织应“立埋”，以便观察各层结构。

使用镊子夹取标本时严防挤压标本。
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固定、脱水、透明、浸蜡

⑴70％乙醇 1h； ⑵80％乙醇 1h； ⑶95％乙醇Ⅰ 1h； ⑷95％乙醇Ⅱ 1h； ⑸95％乙醇Ⅲ 1h；

⑺100％乙醇Ⅱ 1h； ⑻二甲苯Ⅰ ⑼二甲苯Ⅱ ⑽浸蜡Ⅰ ⑾浸蜡Ⅱ 30min； 1h； 1h； 1h；
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超声内镜穿刺标本的处理
超声内镜穿刺技术以获取细胞标本为主，部分患者还可
获得组织标本。对标本的病理学处理非常重要，除了传 统的直接涂片法外，其他方法还包括液基细胞学、细胞 块技术、组织碎片的病理检查、PCR、流式细胞检查等 。
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4242
超声内镜穿刺标本的处理
1.涂片法
可以是直接涂片，也可以是在液基细胞学基础上涂片检 查。直接涂片法在 EUS-FNA 操作现场厚薄均匀地涂在 玻片上观察，涂片应立即放入95%乙醇溶液中固定。
平坦型：病灶周边或中央、黏膜皱襞中断处 溃疡型：边缘粘膜隆起的顶部或内侧黏膜多点活检
局部黏膜可根据染色及放大内镜结果针对最可疑或最
典型病变部位进行活检
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定位性活检（为了明确病变性质、程度）
应在胃肠道黏膜多个固定的部位进行活检。 疑为Barrett食管者，应在食管下段黏膜根据内镜所见的病 变范围或疑似伴有异型增生的区域进行活检； 检测Hp感染，应在胃窦小弯侧距幽门5cm（邻近胃角处 ）或胃窦大弯侧正对胃角处活检取材１～２块，进行尿素 酶试验或组织病理学诊断； 疑为萎缩性胃炎者，应在胃角;胃窦距幽门2～3cm的大弯
色、放大内镜观察后，针对最可疑的部位进行活检。
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2626
黏膜活检标本的处理
内镜医师应及时将标本放入4%中性甲醛溶液进行固定，
固定液应超过标本体积的10倍以上，标本固定时间为6～ 48 h，固定温度为室温。
如临床疑似乳糜泻的小肠活检标本可先平铺在滤纸上再立
即固定。有蒂的息肉切除标本，可直接放入固定液中，但 亚蒂或无蒂的息肉可在切缘处用墨汁标记后，再放入固定 液中。
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黏膜活检标本病理送检申请的填写
同常规病理送检申请
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EMR/ESD标本的处理
EM Ｒ /ESD 是消 化 道早期 癌 治疗的 标 准方法 ， EM Ｒ
/ESD 标本的病理学检查要求不同于黏膜活检标本，不 仅需确定病变的组织学类型，而且应提供黏膜水平、垂 直切缘状态、浸润深度以及是否有淋巴管和血管侵犯等 信息。
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1717
消化内镜相关病理学标本 的采集和处理
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1. 2. 3. 4.
消化道黏膜活检标本
EMR/ESD标本 超声内镜穿刺标本 ERCP 胆胰管标本
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1919
常规病理送检申请的填写
向病理医师准确地提供患者姓名、性别、年龄、住院号/门
诊号、送检科室、送检时间，内镜所见、取材部位、数量 和患者简要病史等情况。既往有病理检查者，标注病理号 、病理诊断。
乙状结肠各活检取材至少2块；
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定位性活检
疑为IBD者，初次诊断考虑为CD时，应至少在5个部
位进行活检，其中应包括回肠末端、直肠，每个部位 活检取材２块以上；如内镜表现为左半结肠和直肠的 疑似UC的病变，活检的部位和数量可适当减少；内镜 表现疑似异型增生的病灶均需活检，也可进一步行染
侧和小弯侧；胃体距贲门8cm的大弯侧和小弯侧（胃体中 部大小弯），共取材５块进行活检；
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定位性活检
疑为自身免疫性胃炎者，应在胃体、胃底，内镜表现为
糜烂、溃疡、结节、息肉、肿块等病变处多部位活检； 疑为乳糜泻者，应在十二指肠球部和远端十二指肠取活 检组织4～6块； 为显微镜下结肠炎者，应在升结肠、横结肠、降结肠、
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超声内镜穿刺标本的处理
Trucut穿刺针获得的组织标本，可用细针将其从针道
挑出，放在固定液中，与黏膜活检标本的处理相似。 经Trucut穿刺针获得的标本长度一般约10 mm（2～18 mm），其中有1/3 可能是组织碎片，提取标本要十分 仔细，以免遗失微小的组织碎片。
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4646
ERCP 胆胰管标本
在ERCP技术的基础上，刷检法可获取胆胰管黏膜的细 胞标本，收集胆汁或胰液也可进行细胞学检查，活检 法还可获取胆胰管黏膜的组织标本。
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4747
胆胰管标本的获取
1. 胆胰管细胞标本：
双腔外鞘型细胞刷是最常用的刷检器械。 在放大X线透视下，胆胰管充分显影后，细胞刷在导丝引导下通
过胆胰管的狭窄部位，将外鞘退至狭窄段远端，细胞刷在狭窄
段内前后移动，刷拭5～10次获取标本，再与外鞘一起退出内 镜活检孔道。建议在胆胰管的狭窄部位进行扩张前后，各用一 个细胞刷重复刷检，可增加诊断敏感性。除细胞刷外，还可以 在胆胰管的狭窄部位行扩张后，使用专用网篮通过狭窄段获取
细胞标本。
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38
超声内镜穿刺标本的获取
３．EUS-FNA病灶穿刺部位的选择；
淋巴等实性病灶：推荐在病灶中央及边缘的多个不同部 位进行穿刺； 囊性病灶：不仅要抽吸囊液，如果壁厚、有实性结节囊 内有实性成份，建议先对实性部分进行穿刺。
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超声内镜穿刺标本的获取
４．EUS-FNA穿刺的次数；
是否能获得充足标本，与穿刺次数及内镜操作医师经验 相关。目前推荐对于淋巴结和肝脏病灶穿刺 3针，胰腺
初识病理学
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1
何为是病理学？
病理学是用自然科学的方法，研究疾病的病因、发病
机制、形态结构、功能和代谢等方面的变化，揭示疾 病的发展规律、从而阐明疾病本质的医学科学。 病理学既是医学中的基础学科，同时又是一门实践性 很强的具有临床性质学科，称之为诊断病理学。
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ห้องสมุดไป่ตู้
2
病理诊断被医学界公认为疾病诊断的“金标准”，也是









⑹100％乙醇Ⅰ 1h；

⑿浸蜡Ⅲ
2h以上；
1414
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包埋

将包埋用蜡倾注于包埋 容器内，用镊子夹取浸 透石蜡的组织块，将其 平整切面向下平置于包 埋容器底部，并用镊子 轻轻压平，待石蜡凝固 后检查蜡块内是否有气 泡，如有气泡需重新包 埋。
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1515
切片、漂片 烘（烤）片
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3131
EMR/ESD标本的处理
注意标本伸展的程度应与本身的生理状态相当，不要过分牵拉
而破坏标本的完整性；亦不要剐蹭标本的粘膜面，以免影响病
理组织学观察； 还应注意铁的固定针经甲醛固定液浸泡后会生锈，生锈的物质 沉着在黏膜表面，会影响病理组织学观察；较粗的固定针会腐 蚀标本边缘，影响切缘病变情况的判断；
响病理学的诊断。活检部位的准确性是避免诊断假阴 性的关键，同一活检部位的第一块标本尤为重要，后
续活检因黏膜出血易影响其准确性。黏膜活检要求取
材标本应足够大，深度需尽可能达到黏膜肌层。 根据内镜粘膜活检的要求可分为： 选择性活检和定位性活检
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选择性活检（为了明确病变性质）
隆起型：顶端及基底部活检，息肉可完整切除后送检
此外，还应用墨汁在标本周围标记该标本在体内的相对位置。
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32
EMR/ESD标本的处理
3. 及时、恰当地固定标本，避免标本干燥：
EMR/ESD标本在体外暴露的时间过长会造成黏膜组织过度
干燥，黏膜上皮会发生形态学改变，造成病理诊断的偏 差； 切除的标本应及时浸没于４％中性甲醛溶液中，并将标 本固定12～48ｈ，过短或过长的固定时间都会对标本的 后续处理造成影响； 固定时间过短，标本内水分没有完全脱掉不利于长时间 保持；固定时间过长，则组织会变脆，不利于切片。
为患者提供个体化治疗的基本保证。病理诊断报告的准 确与否将直接影响患者的健康和命运，尤其在肿瘤治疗
中的作用也越来越大。
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3 3
作为一名临床医师/内镜医师 为什么要学习病理学？
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4 4
作用
诊断疾病
为疾病的诊治和预防提供理论基础
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研究内容
• 病因学
• 发病学 • 病理改变 • 转归和预后
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EMD/ESD标本病理送检申请的填写
除了之前提到的常规内容外，还需要提供：
1.内镜下病变的表现和分型。 2.手术部位、术式。 3.标本上需标注方位（如口侧、肛侧、前壁、后壁等）。
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EMR/ESD标本的组织固定
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3535
超声内镜穿刺标本
穿刺针是在超声内镜引导下获取标本的器械，25G、 22G 或19G 的穿刺针主要用来抽吸细胞标本，而 Trucut穿刺针可以取得组织标本用于病理学检查。
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3636
超声内镜穿刺标本的获取
１．超声内镜引导下细针抽吸活检术（ EUS-FNA ）穿
刺针直径的选择； G25：获得的标本少，污染少，操控性能好，成功率高 G19：获得的标本多，难度大，失败率高
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37 37
超声内镜穿刺标本的获取
２．EUS-FNA负压吸引和针芯的使用；
负压吸引：用注射器进行连续负压吸引可获取更多标本， 但更容易受血细胞污染，是否使用由操作者决定。 针芯：对标本的质量和病理诊断结果的影响暂无充分证 据，是否使用由操作者决定。
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29
EMR/ESD标本的处理
1. 用0.9%NaCl溶液将标本表面的血液、黏液等污染物
冲洗干净，充分暴露病变部位，避免用钉固定时破 坏病变组织。
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30
EMR/ESD标本的处理
2. 充分伸展标本，应保持病灶完整性：
在EMR/ESD标本标本边缘用不锈钢细针将其完整地 固定于泡沫塑料或橡胶板上，使整个标本充分展开， 暴露病变。
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43
超声内镜穿刺标本的处理
2.细胞块技术
将保存在专用保存液中标本离心后放入包埋盒内，经 4%中性福尔马林溶液固定，石蜡包埋再切片行常规HE 染色，以及其他病理检查。
可作为涂片检查的补充，但不能替代涂片检查。
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44
超声内镜穿刺标本的处理
3.组织标本处理
EUS-FNA如能获得组织标本，用0.9mlNaCl溶液冲出针 道后，放入固定液中固定。
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特殊病理检查
细胞化学及免疫组织化学
分子病理学 原位分子杂交 原位PCR等 超微病理学 其他 流式细胞仪检测技术 激光共聚焦显微扫描技术等
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1010
病理诊断
• 制片 • 读片
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1111
制片的流程
• 取材（活检标本 、器官组织）
• 固定、脱水、透明、浸蜡 • 包埋 • 切片、漂片、烘片 • 染色、封片

切片技术是核心技术，切片厚度一般3～5微米。 胃镜、纤支镜、穿刺等小活检组织切片须作非连续性 切片，数量不得少于8片。

烤片温度应在60～62℃左右，不得高于65℃,时间不
能少于20分钟。
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1616
染色、封片

切片封固前必须经酒精充分脱水，二甲苯透明，湿封。
不得用温箱烤干或电吹风吹干后干燥封片。
根据标本的类型不同，还需提供其他一些资料，在后面的
内容里将详细说明。
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2020
注重标本的获取和预处理
各类内镜技术不同，获取组织细胞标准的特点也不
同，所以规范的获取和处理标本，才能做出完整、 正确、规范的病理学诊断。
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消化道粘膜活检标本

食管及胃肠道黏膜活检标本取材的正确与否，直接影
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6
研究手段
常规病理（最主要）
肉眼观察 组织学观察（显微镜下观察） 石蜡包埋切片、 冰冻切片； HE染色、特殊染色等
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肉眼观察
（巨检）
结肠癌
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苏木素 Hematoxylin 与核酸结合呈蓝色
伊红 Eosin 与蛋白结合呈红色 HE 染色
组织学检查
（镜下）
印戒细胞癌
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1212
取材

活检组织包括：子宫内膜诊刮刮取物、浅表或深部组织穿 刺物、皮肤组织、内镜钳取粘膜、微创手术切去不完整组 织等。


应描述标本的数量、大小、形状、色泽、和质地等。
小量的小标本，应全部取材。 多量的小标本，原则上全部取材制片；数量过多时，尽量 多取材（肉眼观疑似异常），剩余保管好备用。
囊实性病灶穿刺3-5针。
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40
超声内镜穿刺标本的获取
5．Trucut穿刺针的使用。
对于淋巴瘤、肝实质疾病、结节病等疾病， EUS-FNA 获得细胞标本的组织病理学诊断价值有限，应用Trucut 穿刺针获取组织标本，进行组织病理组织检查和免疫组 织化学染色可进一步提高诊断的准确率。
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