PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液的配制方法
在免疫组化和细胞培养中，常用到PBS缓冲液。

以下是我们实验室的配方，供大家参考：
A液：0.1mol/L磷酸二氢钾
将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4，分子量136.09)加入100ml双蒸水中。

B液：0.1mol/L磷酸氢二钠
将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)加入100ml双蒸水中。

或者将3.58g酸酸氢二钠
(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)加入100ml双蒸水中。

pH值。

A液(ml)。

B液(ml)
5.60.9.50.0.25
5.91.9.00.1.00
6.24.8.00.2.00
6.4
7.7.00.3.00
6.64.6.00.4.00
6.81.5.00.5.00
6.98.4.00.6.00
7.17.3.00.7.00
7.38.2.00.8.00
7.73.1.00.9.00
8.04.0.50.9.50
免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）、NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）和NaCl。

用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。

配方如下：
取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后
加蒸馏水定容至1L，浓度为0.01M。

PBS缓冲液的配方如下：
取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24g
KH2PO4，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调节pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。

PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一，但不同实验室的配方可能不同。

以下是我的总结：
母液的配制：
0.2M Na2HPO4：取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于
1000ml水。

0.2M NaH2PO4：取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水。

不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制：
先配制0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。

To prepare 0.2M PB (pH=7.4)。

simply dilute XXX。

For example。

to make 0.1M PB (pH=7.4)。

take 500ml of 0.2M PB and add water to make a total volume of 1000ml。

To make 0.01M PB (pH=7.4)。

take 50ml of 0.2M PB and add water to make a total volume of 1000ml。

For 0.02M PB (pH=7.4)。

take 100ml of 0.2M PB and add water to make a total volume of 1000ml。

If you need NaCl。

add it to a n of 0.9% (g/100ml).
Here are the formulas for 0.2M PB (100ml) at different pH values:
pH。

0.2M NaH2PO4 (ml)。

0.2M Na2HPO4 (ml)
5.7.93.5.
6.5
5.8.92.8
5.9.90.10
6.0.8
7.7.12.3
6.1.85.15
6.2.81.5.18.5
6.3.7
7.5.22.5
6.4.73.5.26.5
6.5.68.5.31.5
6.6.62.5.3
7.5
6.7.56.5.43.5
6.8.51.49
6.9.45.55
7.0.38.62
磷酸盐缓冲液（PB）是一种常用的缓冲液，其配制方法如下：取19ml的0.2mol/L NaH2PO4和81ml的0.2mol/L
Na2HPO4·12H2O，充分混合即可得到0.2mol/L的PB，pH值
约为7.4～7.5.如果pH值偏高或偏低，可以通过改变两者的比例来进行调整。

该缓冲液可以在室温下保存。

磷酸缓冲溶液（PBS）是一种常用的缓冲液，其英文缩写可以为三种，分别是phosphate buffered n、phosphate buffered saline和phosphate buffered sodium。

不同的配制方法和pH值会对生物学作用产生影响。

一般情况下，生物学上常用的是中性磷酸盐缓冲溶液。

无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）的配制方法如下：将8.0g NaCl、0.2g KCl、1.15g Na2HPO4（如果为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g）和0.2g KH2PO4依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，进行高压灭菌
10min~15min，然后存放在4℃冰箱中备用。

该液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。

我们使用的是磷酸盐缓冲盐水（PBS），为什么不使用第一种或第三种呢？多年来，我一直认为PBS就是磷酸盐缓冲液，但我经常看到另外两种说法的英文名称。

虽然这些不同的汉语翻译让我有点困惑，但我仍然认为它们都是相似的东西。

我们公司使用的PBS有很多种，例如抗体组使用的中和PBS 配方比较简单，没有K+离子，只起到缓冲PH的作用。

Na2HPO4和KH2PO4按照不同的比例混合，可以得到不同
PH的缓冲液，用于不同的目的。

在分子生物学中，这种方法被广泛使用。

对于活细胞或细菌的处理，为了保持渗透压，我们会加入其他溶液，最常见的是NaCl和KCl调节离子浓度。

这只是我的个人理解，欢迎批评。

既然抗体组的PBS只起到缓冲PH的作用，那么加入80克的NaCl是为了什么？需要平衡渗透压吗？另外，加入K离子是因为细胞上的Na-K泵吗？但是血清中没有细胞，为什么还要考虑Na-K泵呢？我认为这样的配方只是为了模拟血清中的缓冲环境。

对于我们使用的PBS，我们没有加入K离子。

如果不加入NaCl会怎么样呢？这是因为在磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用是维持一定的离子浓度，以保持抗体的活性。

如果离子浓度过高或过低，蛋白质会变性，抗体也不例外。

另外，哺乳类需要使用浓度为0.9%的生理盐水。

我们可以称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，然后稀释到100毫升。

对于鸟类，需要使用浓度为0.75%的生理盐水。

我们可以称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。