结直肠癌中LC3与CD4^+、CD8^+、CD68^+免疫细胞浸润的相关性及其临床意义
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
ｗｓｈ６１Ｏ８＠ Ｉ２６ ｃｏｒ ｎ
理 因 素分 析 结 直 肠 癌 中 自噬 对 免 疫 细 胞 功 能 的 影 响 ，为结直 肠 癌 的治疗 提供 新思 路 。
１ 材 料与 方 法
１．１ 材 料 １．１．１ 组织 标本 收 集 滨 州 医 学 院 附 属 医 院病 理 科 ２０１０年 １月 ～２０１ １年 １２月存 档 的 １ ２８例结 良肠 癌标 本及 相应 的癌旁 正 常黏膜 组 织作 为对 照 。根据 ＷＨＯ（２０１６）消化 系统 肿瘤 分类 标 准 ，由 位 资深病 理 医师 经双 盲 法 重新 阅 片诊 断 １２８例 中 ，男 性 ７８ 例 ，女性 ５０例 ，年 龄 ３０～８６岁 ，平 均 ６０岁 ；结 肠 癌 ６２例 ，直肠 癌 ６６例 ；组织 类 型 ：管 状 腺癌 Ｊ０２例 ，黏 液腺 癌 ２６例 ；分 化 程 度 ：高 分 化 ３０例 ，巾 分 化 ４２ 例 ，低分 化 ５６例 ；浸 润深度 ：黏 膜 及黏 膜下 ２３例 ， 肌层 ３５例 ，外 膜 ７０例 ；有 淋 巴结 转 移者 ８６例 ，ｌ尢淋 巴结 转 移者 ４２例 ；ＴＮＭ 分 期 ：Ｉ＋Ⅱ期 ４４例 ，珊 ＋ Ⅳ期 ８４例 。所选 病例 均 为首 次发 现 ，术 前未行 任何 放 、化疗 ，术 后 均进行 联 合化 疗 。 １．１．２ 试 剂 兔 抗 人 ＬＣ３Ａ／Ｂ（ａｂｌ２８０２５）、兔抗 人 ＭＡＧＥ—Ｄ４（ａｂ２０９６６７）购 自 Ａｂｃａｍ公 司，鼠抗 人 ＮＹ— ＥＳＯ一２（ｂＳ。６８０７Ｒ）购 自 Ｂｉｏｓｓ公 司 ，即用 型 抗 体 ＣＤ４
接受 日期 ：２０１７—１１—２８ 基金项 目：山东 省科技 发展 汁划项 目（２０１０ＧＳＦ１０２５９） 作者单位 ：滨 州医学 院附属医院病理科 ，滨州 ２５６６０３ 作 者 简 介 ：刘 梦 瑶 ，女 ，硕 士 研 究 生 。Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｍｙｍｉｒａｃｌｅＩ９９２＠ ｌ２６
吴 淑 华 ，女 ，教 授 ，硕 士 生 导 师 ，通 讯 作 者 。 Ｅ—ｍａｉ
· １２４ ·
临床 与 实验病理 学杂 志 Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１８ Ｆｅｂ：３４（２）
网 络 出版 时 间 ：２０１８—２—８ ９：１０ 网络 出版 地 址 ：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔ０９０９．００２．ｈｔｍ ｌ ．
结直 肠 癌是 消 化 系 统 常见 的恶 性 肿 瘤 之 一 。 近年 来 ，结 直肠 癌 的治疗 包括 手 术或 内镜 切 除 ，其 次 是化 疗 、放疗 和靶 向治疗 等治 疗措 施 ，而其 引起 的不 良反应 在一 定程 度 上 影 响 了 治疗 效 果 ，因此 人 们 探索新的治疗方法 ，尤其是近年来 的免疫治疗在许 多 肿瘤 的 综 合 治 疗 中取 得 良好 的疗 效 和 突破 性 进 展 Ｊ。然 而 ，有 研 究 发 现 ，由于 结 直 肠 癌 中肿 瘤 细 胞存 在 免疫 逃逸 现 象 故 而 对 免 疫 治 疗 并 不 敏感 。 影 响肿 瘤免 疫 功能 的 因素 较 为 复 杂 ，新 近 研 究 发 现 细 胞 自噬 活 性 改 变 可 影 响 免 疫 细 胞 的功 能 。本 实 验拟 采用 免疫 组 化 ＥｎＶｉｓｉｏｎ法 、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法 检 测 结直 肠癌 组 织 中 自噬 相 关 蛋 白 ＬＣ３和 肿 瘤 表 面 抗 原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｄ４ 的 表 达 以 及 ＣＤ４ 、 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免 疫 细 胞 的浸 润情 况 ，并 结 合 临 床 病
· 论 著
结 直 肠 癌 中 ＬＣ３与 ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ６８＋免 疫 细 胞 浸 润 的相 关 性 及 其 临 床 意 义
刘 梦瑶 ，吴 淑华 ，温 菲 菲 ，张香 芝 ，许 晓 阳 ，刘远 航
摘要 ：目的 观察 自噬标 志物 ＬＣ３与 肿 瘤表 面抗 原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｄ４在结 直 肠 癌及 癌 旁 正常黏 膜 组织 中 的表达 以 及 ＣＯ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫细胞 的浸润情 况 ，分析 ＬＣ３与 ＮＹ—ＥＳＯ－２、ＭＡＧＥ一１３４以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫 细胞浸 润 的棚炎 性 ，探讨结 直肠癌细胞 自噬对免疫 细胞 的影响及其 临床 意义 。方法 应用免疫组化 ＥｎＶｉｓｉｏｎ法 、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检 测 １２８例结 直肠癌及癌旁正 常黏膜组织 中 ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—ＩＭ 的表达 以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫 细胞浸｝ｌ：Ｉ＝Ｉ情况 ，探 讨各因子之 问的相关性并结合 临床病理特征进行分 析。结果 （１）ＬＣ３在结 直肠癌 组织 中 的表 达高 于癌旁 正常黏膜 组织 ，Ｎ Ｙ－ＥＳＯ一２侄 结直肠癌 中低表达 ，ＭＡＧＥ—Ｄ４在结直肠癌 中高表 达 ，两者 在癌 旁正常黏膜组织 中几乎不 表达（Ｐ＜０．０５）；ＣＤ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫细胞在结直肠癌 中的浸润量均高 于癌 旁正常黏膜组 （Ｐ＜０．０５）；（２）结直肠 癌 巾 ＬＣ３与肿瘤 表面抗原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡ（ Ｅ— Ｄ４的表达 以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量均呈正相关 （Ｐ＜０．０５）；（３）ＮＹ—ＥＳＯ一２的表达 与 ＣＩ）４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量均呈正 相关 ，ＭＡＧＥ—Ｄ４的表达 与 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量 均呈 正相关 （Ｐ＜０．０５）；（４）ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｉ）４ 的表达及 ＣＤ４ 、ＣＤ８ 免疫 细胞 的浸润量 均 与淋 巴结转 移呈 负相 关 （Ｐ＜０．０５）；ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ ２、ＭＡＧＥ—Ｄ４的表达 及 ＣＤ４ 、 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸 润量与 ＴＮＭ分期呈 负相 关（Ｐ＜０．０５）；ＬＣ３的表达与结直肠癌 的分化程度呈 上Ｅ相关 ；ＣＤ８ 细胞 的浸涧 量与组织学分级呈正相关 （Ｐ＜０．０５）。结论 结直肠癌 中 自噬标志物 ＬＣ３的表 达与肿瘤 表面抗原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ一１）４的灰 达 、免疫细胞 ＣＤ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 的浸润量具 有相 关性 ，自噬活性改变可能影响结直肠 癌的细胞免疫 关键 词 ：结 直肠 肿瘤 ；自噬 ；肿瘤表 面抗 原 ；免疫细胞 中 图 分 类 号 ：Ｒ ７３５．３ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１００１—７３９９（２０１８）０２—０１２４—０８ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１８．０２．００２
理 因 素分 析 结 直 肠 癌 中 自噬 对 免 疫 细 胞 功 能 的 影 响 ，为结直 肠 癌 的治疗 提供 新思 路 。
１ 材 料与 方 法
１．１ 材 料 １．１．１ 组织 标本 收 集 滨 州 医 学 院 附 属 医 院病 理 科 ２０１０年 １月 ～２０１ １年 １２月存 档 的 １ ２８例结 良肠 癌标 本及 相应 的癌旁 正 常黏膜 组 织作 为对 照 。根据 ＷＨＯ（２０１６）消化 系统 肿瘤 分类 标 准 ，由 位 资深病 理 医师 经双 盲 法 重新 阅 片诊 断 １２８例 中 ，男 性 ７８ 例 ，女性 ５０例 ，年 龄 ３０～８６岁 ，平 均 ６０岁 ；结 肠 癌 ６２例 ，直肠 癌 ６６例 ；组织 类 型 ：管 状 腺癌 Ｊ０２例 ，黏 液腺 癌 ２６例 ；分 化 程 度 ：高 分 化 ３０例 ，巾 分 化 ４２ 例 ，低分 化 ５６例 ；浸 润深度 ：黏 膜 及黏 膜下 ２３例 ， 肌层 ３５例 ，外 膜 ７０例 ；有 淋 巴结 转 移者 ８６例 ，ｌ尢淋 巴结 转 移者 ４２例 ；ＴＮＭ 分 期 ：Ｉ＋Ⅱ期 ４４例 ，珊 ＋ Ⅳ期 ８４例 。所选 病例 均 为首 次发 现 ，术 前未行 任何 放 、化疗 ，术 后 均进行 联 合化 疗 。 １．１．２ 试 剂 兔 抗 人 ＬＣ３Ａ／Ｂ（ａｂｌ２８０２５）、兔抗 人 ＭＡＧＥ—Ｄ４（ａｂ２０９６６７）购 自 Ａｂｃａｍ公 司，鼠抗 人 ＮＹ— ＥＳＯ一２（ｂＳ。６８０７Ｒ）购 自 Ｂｉｏｓｓ公 司 ，即用 型 抗 体 ＣＤ４
接受 日期 ：２０１７—１１—２８ 基金项 目：山东 省科技 发展 汁划项 目（２０１０ＧＳＦ１０２５９） 作者单位 ：滨 州医学 院附属医院病理科 ，滨州 ２５６６０３ 作 者 简 介 ：刘 梦 瑶 ，女 ，硕 士 研 究 生 。Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｍｙｍｉｒａｃｌｅＩ９９２＠ ｌ２６
吴 淑 华 ，女 ，教 授 ，硕 士 生 导 师 ，通 讯 作 者 。 Ｅ—ｍａｉ
· １２４ ·
临床 与 实验病理 学杂 志 Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２０１８ Ｆｅｂ：３４（２）
网 络 出版 时 间 ：２０１８—２—８ ９：１０ 网络 出版 地 址 ：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔ０９０９．００２．ｈｔｍ ｌ ．
结直 肠 癌是 消 化 系 统 常见 的恶 性 肿 瘤 之 一 。 近年 来 ，结 直肠 癌 的治疗 包括 手 术或 内镜 切 除 ，其 次 是化 疗 、放疗 和靶 向治疗 等治 疗措 施 ，而其 引起 的不 良反应 在一 定程 度 上 影 响 了 治疗 效 果 ，因此 人 们 探索新的治疗方法 ，尤其是近年来 的免疫治疗在许 多 肿瘤 的 综 合 治 疗 中取 得 良好 的疗 效 和 突破 性 进 展 Ｊ。然 而 ，有 研 究 发 现 ，由于 结 直 肠 癌 中肿 瘤 细 胞存 在 免疫 逃逸 现 象 故 而 对 免 疫 治 疗 并 不 敏感 。 影 响肿 瘤免 疫 功能 的 因素 较 为 复 杂 ，新 近 研 究 发 现 细 胞 自噬 活 性 改 变 可 影 响 免 疫 细 胞 的功 能 。本 实 验拟 采用 免疫 组 化 ＥｎＶｉｓｉｏｎ法 、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法 检 测 结直 肠癌 组 织 中 自噬 相 关 蛋 白 ＬＣ３和 肿 瘤 表 面 抗 原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｄ４ 的 表 达 以 及 ＣＤ４ 、 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免 疫 细 胞 的浸 润情 况 ，并 结 合 临 床 病
· 论 著
结 直 肠 癌 中 ＬＣ３与 ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ６８＋免 疫 细 胞 浸 润 的相 关 性 及 其 临 床 意 义
刘 梦瑶 ，吴 淑华 ，温 菲 菲 ，张香 芝 ，许 晓 阳 ，刘远 航
摘要 ：目的 观察 自噬标 志物 ＬＣ３与 肿 瘤表 面抗 原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｄ４在结 直 肠 癌及 癌 旁 正常黏 膜 组织 中 的表达 以 及 ＣＯ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫细胞 的浸润情 况 ，分析 ＬＣ３与 ＮＹ—ＥＳＯ－２、ＭＡＧＥ一１３４以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫 细胞浸 润 的棚炎 性 ，探讨结 直肠癌细胞 自噬对免疫 细胞 的影响及其 临床 意义 。方法 应用免疫组化 ＥｎＶｉｓｉｏｎ法 、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检 测 １２８例结 直肠癌及癌旁正 常黏膜组织 中 ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—ＩＭ 的表达 以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫 细胞浸｝ｌ：Ｉ＝Ｉ情况 ，探 讨各因子之 问的相关性并结合 临床病理特征进行分 析。结果 （１）ＬＣ３在结 直肠癌 组织 中 的表 达高 于癌旁 正常黏膜 组织 ，Ｎ Ｙ－ＥＳＯ一２侄 结直肠癌 中低表达 ，ＭＡＧＥ—Ｄ４在结直肠癌 中高表 达 ，两者 在癌 旁正常黏膜组织 中几乎不 表达（Ｐ＜０．０５）；ＣＤ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 免疫细胞在结直肠癌 中的浸润量均高 于癌 旁正常黏膜组 （Ｐ＜０．０５）；（２）结直肠 癌 巾 ＬＣ３与肿瘤 表面抗原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡ（ Ｅ— Ｄ４的表达 以及 ＣＩＭ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量均呈正相关 （Ｐ＜０．０５）；（３）ＮＹ—ＥＳＯ一２的表达 与 ＣＩ）４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量均呈正 相关 ，ＭＡＧＥ—Ｄ４的表达 与 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸润量 均呈 正相关 （Ｐ＜０．０５）；（４）ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ—Ｉ）４ 的表达及 ＣＤ４ 、ＣＤ８ 免疫 细胞 的浸润量 均 与淋 巴结转 移呈 负相 关 （Ｐ＜０．０５）；ＬＣ３、ＮＹ—ＥＳＯ ２、ＭＡＧＥ—Ｄ４的表达 及 ＣＤ４ 、 ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 细胞 的浸 润量与 ＴＮＭ分期呈 负相 关（Ｐ＜０．０５）；ＬＣ３的表达与结直肠癌 的分化程度呈 上Ｅ相关 ；ＣＤ８ 细胞 的浸涧 量与组织学分级呈正相关 （Ｐ＜０．０５）。结论 结直肠癌 中 自噬标志物 ＬＣ３的表 达与肿瘤 表面抗原 ＮＹ—ＥＳＯ一２、ＭＡＧＥ一１）４的灰 达 、免疫细胞 ＣＤ４ 、ＣＤ８ 、ＣＤ６８ 的浸润量具 有相 关性 ，自噬活性改变可能影响结直肠 癌的细胞免疫 关键 词 ：结 直肠 肿瘤 ；自噬 ；肿瘤表 面抗 原 ；免疫细胞 中 图 分 类 号 ：Ｒ ７３５．３ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１００１—７３９９（２０１８）０２—０１２４—０８ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１８．０２．００２