GST-His-Heparinase Ⅰ双标签融合蛋白的原核表达与纯化
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
GST-His-Heparinase Ⅰ双标签融合蛋白的原核表达与纯化刘卫超;程咏梅;邓超;丁建文;宋志新;陈敬华
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2014(44)5
【摘要】以pET15b-Hep Ⅰ为模板,通过PCR技术扩增出上游含有6×His标签的Hep Ⅰ基因序列,克隆至表达载体pGEX-4T-1.测序鉴定后,将重组表达质粒pGEX-His-Hep Ⅰ转入E.coli BL21(DE3)感受态细菌,经IPTG诱导表达.表达产物可溶部分用GSTrap FF和HisTrap HP柱两步亲和纯化,所得产物经SDS-PAGE检测,在66 kDa和43kDa处显示特异条带,分别与GST-His-HepⅠ和His-Hep Ⅰ融合蛋白预期分子量相符;最终His-Hep Ⅰ融合蛋白的比酶活为86.45 IU/mg,纯度高达99％,与仅一步亲和纯化得到的GST-His-Hep Ⅰ融合蛋白相比,进一步提高了纯化后重组肝素酶的纯度.本研究为制备高纯度的Hep Ⅰ提供了一种方法,对制备高安全性的LMWH和解析Hep Ⅰ晶体结构具有重要意义.
【总页数】7页(P51-57)
【作者】刘卫超;程咏梅;邓超;丁建文;宋志新;陈敬华
【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学无锡医学院,江苏无锡214122;常山生化药业(江苏)有限公司,江苏常州213149;常山生化药业(江苏)有限公司,江苏常州213149;江南大学药学院,江苏无锡214122
【正文语种】中文
【相关文献】
1.His标记STAT4(565-748氨基酸)肽段融合蛋白原核表达及纯化 [J], 贺美;徐艳;姚芳玲;邹纯;于颍;黎明
2.水稻脱落酸受体PYL2与mNeonGreen融合蛋白的原核表达及纯化 [J], 吴云华;吴亚婷;李勇
3.GST-SRY融合蛋白原核表达和纯化 [J], 张小玉;段君君;王江;贾霄;汪小波;何颖红;;;;;;;
4.GST-SRY融合蛋白原核表达和纯化 [J], 张小玉;段君君;王江;贾霄;汪小波;何颖红
5.胱天蛋白酶募集域蛋白9-麦芽糖结合蛋白融合蛋白的原核表达及纯化 [J], 邓东灵;孔庆涛;胡青原;刘海波;魏天彪;黄善青;陈浩;桑红
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买