分子生物学试卷参考答案A

分子生物学试卷参考答案A
一、名词解释（共10小题，每小题2分，共20分）
1．C值通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。

2. 转座子（Transposon,Tn）是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本
单位。

3. 操纵子（operon）：指的是一组功能上相关的基因，它是由启动区（promoter）、
操纵区（operator）和结构基因（structuralgene）三部分组成。

4. 顺式作用元件（cis-acting element）又称分子内作用元件，指存在于DNA
分子上的一些与基因转录调控有关的特殊顺序。

5．基因组成性表达（constitutive gene expression）是指在个体发育的任一
阶段都能在大多数细胞中持续进行的基因表达。

其基因表达产物通常是对生命过
程必需的或必不可少的，且较少受环境因素的影响。

这类基因通常被称为管家基
因（housekeeping gene）。

6．SD序列（Shine-dalgarno sequence）：是指原核生物mRNA5’-UTR的一段
富含嘌呤的区段（常为AGGAGG），它能与核糖体30S小亚基的16SrRNA配对，使
核糖体在mRNA上定位并起始翻译。

7．转录(transcription)：由依赖于DNA的RNA聚合酶催化，以DNA的一条链的
一定区段为模板，按照碱基配对原则，合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。

8．错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码子发生变化,由它
所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发
生改变的突变.
9. 增强子（enhancer）：是指一类能增强RNA转录起始效率的DNA序列，通过与特异性的蛋白质结合发挥效应。

10. 信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白
质的跨膜输送。

二、单项选择题（共20小题，每题1分，共20分）
1. B
2. C
3. B
4. C
5. A
6. A
7. D
8.C
9.D 10. C
11. B 12. A 13. D 14. D 15. B 16. C 17. D 18. A 19. B 20. D
三、判断题（打√或×，共10小题，每题1分，共10分）
1.一段长度100bp的DNA,具有4100种可能的序列组合形式。

√
2.大肠杆菌DNA聚合酶缺失3'→5'校正外切核酸酶活性时会降低DNA合成的速
率但不会影响它的可靠性。

×
3.核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。

×
4.紫外线对DNA的损伤主要是使磷酸二酯键断裂。

×
5.PolyA尾巴是DNA的转录产物。

×
6.核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA和tRNA,大亚基则催化肽键的形成。

√
7.高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的。

√
8.原核生物中起始氨基酰-tRNA是fMet-tRNA。

√
9.RNA也能以自身为模板合成一条互补的RNA链。

√
10.依赖DNA的RNA聚合酶由紧密结合的α2ββ’σ亚基组成，其中σ因子具有识别起始部位和催化RNA合成的功能。

×
四、简答题（共8小题，任选、限选6小题，每题5分，共30分）
1. 遗传密码的性质
(1)密码无标点：从起始密码始到终止密码止，需连续阅读，不可中断。

增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。

(2)密码不重叠：组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基酸，只使用一次，不重叠使用。

(3)密码的简并性：在密码子表中，除Met、Trp各对应一个密码外，其余氨基酸均有两个以上的密码，对保持生物遗传的稳定性具有重要意义。

(4)变偶假说：密码的专一性主要由头两位碱基决定，第三位碱基重要性不大，因此在与反密码子的相互作用中具有一定的灵活性。

(5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遗传密码，但近年来已发现某些个别例外现象，如某些哺乳动物线粒体中的UGA不是终止密码而是色氨酸密码子。

(6)起始密码子AUG，同时也代表Met，终止密码子UAA、UAG、UGA使用频率不同。

2. 真核生物mRNA转录后的加工成熟步骤主要包括?
(1)、5’ 端形成特殊的帽子结构
(2)、在3’ 端切断并加上一个poly(A)的尾巴.
(3)、内含子剪接
（4）、甲基化修饰作用
3.以乳糖操纵子为例说明什么是基因的表达与阻遏？
调节乳糖催化酶产生的操纵子就称为乳糖操纵子。

其调控机制简述如下：抑制作用：调节基因转录出mRNA，合成阻遏蛋白，因缺少乳糖，阻遏蛋白因其构象能够识别操纵基因并结合到操纵基因上，因此RNA聚合酶就不能与启动基因结合，结构基因也被抑制，结果结构基因不能转录出mRNA，不能翻译酶蛋白。

诱导作用：乳糖的存在情况下，乳糖代谢产生别乳糖（alloLactose），别乳糖能和调节基因产生的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白改变构象，不能在和操纵基因
结合，失去阻遏作用，结果RNA聚合酶便与启动基因结合，并使结构基因活化，转录出mRNA，翻译出酶蛋白。

4.真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别
答：1）原核生物mRNA：①半衰期短，易被降解；降解、翻译、转录同步进行；
②通常是多顺反子结构；一般距离5‘较远的编码框翻译效率较差，但是起始密码上游的S-D序列可提高翻译效率。

；③mRNA不需要加工即可被翻译；
2）真核生物mRNA：①半衰期长，不易被降解，受到一些因子的调控作用如3’poly(A)和5‘帽子；②通常是单顺反子结构；③需要加工：加帽/加尾/甲基化/剪接/编辑等，翻译和转录不同步。

5.简要说出至少5种RNA及其功能？
转运RNA tRNA 转运氨基酸
核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成
信使RNA mRNA 蛋白质合成模板
不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体
小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接
小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用
核酶Ribozyme RNA 有酶活性的RNA
6. 原核生物与真核生物启动子的主要差别？
原核生物 TTGACA --- TATAAT------起始位点
-35 -10
真核生物增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点
-110 -70 -25
7．简述一个完整的southern blotting 实验的主要步骤有哪些？
Southern杂交过程的步骤包括:(1)检测总DNA提取 (2)DNA的限制性酶切 (3)凝胶电泳分离酶切片断 (4)凝胶中的DNA变性 (5)印迹 (6)杂交探针的制备(7)杂交 (8)杂交信号的检出
8．以大肠杆菌为例，简述蛋白质生物合成过程。

(1)氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成，由氨酰-tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰-tRNA。

(2)肽链合成的起始：由起始因子参与，mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物，整个过程需GTP水解提供能量。

(3)肽链的延长：起始复合物形成后肽链即开始延长。

首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位，然后，由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽或空载tRNA仍留在P位．最后核糖体沿mRNA5’→3’方向移动一个键，tRNA
f
密码子距离，A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位，全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts，能量由GTP提供。

(4)肽链合成终止，当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时，终止因子RF-1、RF-2识别终止密码，并使肽酰转移酶活性转为水解作用，将P位肽酰-tRNA 水解，释放肽链，合成终止。

五、综合题（共2小题，每题10分，共20分）
1.假如有一mRNA，其碱基顺序如下：……AACCAGGUNNNNNAUGUUU……UUUUAR
注：N=U、C、A、G中任何一种碱基。

R=A或G；Y=U或C
……省略的是碱基，其数目是3的倍数。

试问：1、其DNA模板的碱基顺序如何？2、翻译从何处开始？何处结束？3、N端氨基酸是什么？(10分)
答：1.其DNA模板的碱基顺序:
5’YTAAA……AAACATNNNNNACCTGGTT……3’
2.翻译从AUG处起始，到UAR处终止。

3.N端氨基酸为M et.
2.PCR技术的原理是什么？其反应体系有哪些主要成分？引物设计时应注意哪些原则？
(1). 高温变性（Denaturation）：待扩增的DNA模板加热变性成单链；
(2) 低温退火（Annealing）：降低温度，使单链靶序列与寡核苷酸引物退;
(3) 适（中）温延伸（Extension）：在适当条件下，利用DNA聚合酶使引物延伸，产生新的双链。

上述变性、退火、延伸步骤的重复循环，导致特异的靶序列的指数扩增。

PCR 产物是介于引物的5’端之间的双链DNA片段。

引物设计应注意: (1)引物长度约16~30bp,并且一对引物间的G+C含量相似(2)引物中G+C含量应占到45%~60%,以确保退火温度(3)引物3’端应与目的序列完全配对, 引物3’端之间不能互补(4)四种碱基应随机分布,(5) 5’端碱基可不与模板配对
《难得的是有份清闲时光，难得的是有种知途迷返，知之为知之，不知为不知，知你冷暖，懂你悲欢，把你放在了心头上的人。

难得的是面对片深山广林、教你为人，怎样处事，面对人生;淡泊世事，践行伯乐，明镜心扉。

心似无物化有物，道似无情渡有情，佛似无边胜有边，儒似学而不思厌也，山高不止于流水，流水不止于小桥，除非去哪里在看看，除非去哪里在历历，除非去哪里在观光!一路走马观花，沐浴星星的乐园，想哪，念那。

白若溪在月牙泉唱着：每当太阳落下西边的阳，也有美丽的月牙泉，它是天的镜子，也是沙漠的眼。

就在那片天的很远很远，从那年我月牙泉。