荧光定量pcr仪原理

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荧光定量pcr仪原理
荧光定量PCR仪是一种用于测量PCR反应过程中荧光信号的仪器。

其原理基于PCR反应中的DNA扩增过程以及荧光染料的发射和检测。

PCR是一种通过使用DNA聚合酶酶和特定引物,在适当的温度下连续进行反复的DNA复制过程。

PCR反应通常包含三个基本步骤:变性(解旋DNA双链),退火(引物结合到模板DNA上),和延伸(DNA聚合酶沿引物扩增目标序列)。

此过程会导致目标DNA序列数量的指数性增加。

荧光定量PCR仪中,DNA的扩增过程通常伴随着一种荧光染料的加入。

这种荧光染料会在扩增过程中与新合成的DNA结合,产生荧光信号。

荧光定量PCR仪通过在PCR反应过程中记录荧光信号的强度来测量PCR反应的进程。

仪器中的光学系统会周期性地激发荧光信号,并通过检测器检测信号的强度。

荧光定量PCR仪可以记录每一个PCR循环的荧光信号,然后使用计算机软件分析这些信号的特征,例如峰值高度或面积。

通过与已知浓度的标准样品进行比较,可以利用荧光信号的强度来定量PCR反应中的目标DNA的初始浓度。

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