香烟烟雾提取物对MIN6细胞JNK及p38MAPK表达影响
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2 1 0 0 0 9, C h i n a ) A b s t r a c t : Ob j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t o f c i g a r e t t e s mo k e e x t r a c t ( C S E )o n e x p r e s s i o n s o f c — J u n N — t e r mi —
E f e c t o f c i g a r e t t e s mo k e e x t r a c t o n J NK, p 3 8 MAP K e x p r e s s i o n s i n MI N6
c e l l s
WA NG Qi u — s h i , C AO Y e , Y A N L i , e t a l( S c h o o l o fP u b l i c H e a l t h , S o u t h e a s t U n i v e r s i t y , N a n j i n g , J i a n g s u P r o v i n c e
中 图分 类 号 : R 1 8 1 . 2 4 文献 标 志码 : A 文章 编 号 : 1 0 0 1 — 0 5 8 0 ( 2 0 1 6 ) 1 2 — 1 6 8 9 — 0 4 D O I : 1 0 . 1 1 8 4 7 / z g g g w s 2 0 1 6 — 3 2 — 1 2 — 2 1
0 . 0 5 ) , 并呈一定 的剂量 一效应关系 。结论 C S E能够导致 MI N6细胞 形态异 常 、 抑 制其细胞 增殖活 力 , 其 机制可 能与 J NK和 p 3 8 MA P K信号通路 的激活相关 。 关键词 : 香 烟烟雾提取物 ( C S E ) ; 胰 岛细胞 ; 细胞活力 ; MA P K s
中国公共卫生 2 0 1 6年 1 2月第 3 2卷第 1 2期
C h i n J P u b l i c H e a l t h , De c 2 0 1 6 Vo 1 . 3 2 No . 1 2 ・1 6 8 9 ・实验研究 ・
香 烟 烟 雾提 取 物 对 MI N 6细 胞 J N K及 p 3 8 MA P K 表 达 影 响
汪秋 实 , 曹烨 , 闫丽 , 韩翱 瀚 , 覃 玉 , 吕淑 荣 , 向全永
摘 要: 目的 探讨体外香烟烟雾提取物 ( C S E) 对胰 岛 MI N 6细 胞形态及 活力 的影响 , 及对胞 内丝裂原 活化 蛋 白激酶 ( MA P K s ) 信号转导通路 E R K、 J NK、 p 3 8 MA P K表 达 的影响 。方 法 体 外培 养 MI N 6细胞至 生长对数 期 后, 设不 同浓度 C S E ( 2 0 、 5 0 、 1 0 0和 2 0 0 g / mL) 实验组 , 同时设对照组 , 4 8 h后 , 镜 下观察 MI N 6细胞 形态学改 变 , 并应用 C C K一8法检测 C S E对 MI N 6细胞 的增 殖 抑制 率 ; 同时 应用 蛋 白印迹 法 ( WB) 检 测 细胞 内 E R K、 J N K、 p 3 8 MA P K蛋 白及磷酸化程度。结果 与对 照组 比较 , 1 0 0和 2 0 0 x I g / mL剂量下的细胞形态 出现 明显异常 , 胞核 固 缩, 细胞呈 梭形样改 变 ; 与对 照组 比较 , MI N 6细胞 活 力 出现 下 降 , 2 0 、 5 0、 1 0 0 、 2 0 0 mL各组 细 胞 活力 分别 为 ( 9 7 . 3 2± 2 . 6 7 ) %、 ( 9 4 . 6 7± 5 . 3 3 ) %、 ( 8 7 . 7 1 ±1 2 . 3 ) %和( 7 4 . 2 3±2 5 . 8 ) %; 与对 照组相 比 , E R K、 J N K、 p 3 8 M AP K 蛋 白表达变化不大 , 但随着 C S E剂量 的增 加 , P~ J N K 和 P—p 3 8 MA P K磷酸化 程度 明显增加 ( 与对 照组相 比, P<
n a l k i n a s e( J N K)a n d p 3 8 m i t o g e n — a c t i v a t e d p r o t e i n k i n a s e( MA P K)i n MI N 6 c e l l s . Me t h o d s MI N 6 c e l l s i n l o g a r i h— t mi c g r o wt h p e i r o dwe r e c u l t u r e di n v i t r o a n dt h e nt r e a t e dw i h t d i f f e r e n t c o n c e n r t a i t o n s o f C S E( 2 0 , 5 0, 1 0 0 , 2 0 0 mL) a n d a v e h i c l e( c o n t r o 1 )g r o u p w a s a l s o e s t a b l i s h e d . A f t e r 4 8 h o u r s t r e a t me n t o f C S E, t h e c h a n g e i n m o r p h o l o g y o f t h e c e l l s w a s o b s e r v e d w i t h i n v e  ̄ e d m i c r o s c o p e a n d c h o l e c y s t o k i n i n( C C K - 8 )wa s u s e d t o a s s e s s C S E — me d i a t e d nt a i — p r o l i f -