第二十一章非发酵菌及检验ppt课件

绿脓杆菌 产碱杆菌
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5. MAC上的生长情况
一般都生长良好，如假单胞菌属、不 动杆菌属、产碱杆菌属，而莫拉杆菌属等 不生长。
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假单胞菌属
❖假单胞菌属（Pseudomonas）是非发酵菌
中的一大属，是假单胞菌科的代表菌属。
❖本属菌为需氧、有端鞭毛、无芽孢、无荚 膜、氧化酶阳性的革兰阴性杆菌。大多数 为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌， 常见的有铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞 菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌等。
❖生化反应：氧化酶 - ，MIU - - - ，硝酸盐 还原试验 - 。
❖耐药性：对全部氨基青霉素、一代二代头 孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药。
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鲍曼不动杆菌在BAP上的生长现象
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莫拉菌属
❖莫拉菌属（Moraxella）为条件致病菌，能 引起眼结膜炎、肺炎、脑膜炎等。
4. 明胶液化试验：+
5. 硝酸盐还原产气（N2）试验：+
6. 精氨酸双水解酶：+
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生物学性状
铜绿假单胞菌
抗原构造
1. 菌体抗原（O）：包括外膜蛋白、脂多 糖两种成分。
2. 鞭毛抗原（H）
抵抗力
对外界的抵抗力比其他无芽胞菌强；对 多种抗生素不敏感。
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致病性
铜绿假单胞菌
致病物质
❖本属菌对理化因素的耐受性较强，对多种 抗生素耐药。
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铜绿假单胞菌
❖铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）是假单胞
菌属的代表菌种，为条件致病菌，是医院 感染的主要病原菌。可经多种感染途径、 污染导致多种感染，且对多种抗生素天然 耐药，因此有很重要的临床意义。
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生物学性状
形态与结构
分离培养
BAP、SS、MAC
鉴定
初步鉴定（菌落、菌体特征，色素、氧化酶、 KIA），最后鉴定（系统生化、血清学）
药敏试验
分离培养
粪便
胸腹水 离心 脑脊液 沉淀 尿液 分泌物
（SS、MAC） 1.菌落特征
可 初 2.形态染色
疑 菌
步 鉴
3.氧化酶
落 定 4. KIA
符 合
报 告 检 出
分离培养
5. 绿脓菌素
❖生化反应特殊：氧化酶 - ；赖氨酸脱羧酶 +； 氧化分解麦芽糖；水解七叶苷。
❖耐药性：含有-内酰氨酶，对亚胺培南天然 耐药，临床治疗首选磺胺类（TMP/SMZ）； 喹诺酮类：环丙沙星或替卡西林/克拉维酸。
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不动杆菌属
❖不动杆菌属（Acinetobater）为一群不发酵 糖类、氧化酶 - 、无动力的革兰阴性杆菌。
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非发酵菌主要生化特性
1. 氧化酶试验：最重要的试验。除不动 杆菌属，均为阳性。
2. 培养温度：常规标本先培养于35~37℃， 再培养于30℃或室温（18~22℃ ）。
3. 动力：以2中培养物悬滴法、压滴法为 准，或鞭毛染色法，半固体穿刺则不 明显。
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4. 葡萄糖氧化/发酵试验：用H-L培养基（改 良的O-F培养基）鉴别发酵菌与非发酵菌。
1. G- 杆菌，细长或 球杆状； 2. 单端有1~3根鞭毛， 无芽孢，无荚膜，有 周身菌毛。
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铜绿假单胞菌
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生物学性状
铜绿假单胞菌
培养
1. 专性需氧；
2. 生长温度范围20~42℃，最适35℃，42℃ 生长，4℃不生长；
铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌 恶臭假单胞菌
42℃生长 + -
4℃生长 鞭毛 明胶液化 - 端单鞭毛 + + 端多鞭毛 + - 端多鞭毛 -
黏附素，多糖荚膜，内毒素，外毒 素，绿脓素，弹性蛋白酶，磷脂酶C。
所致疾病
医院内继发感染，如烧伤创面感染、 败血症等。
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微生物学检验液、痰液、尿液、 分泌物、胸腹水、粪便等）
直接镜检
新鲜标本（胸腹水、脑脊液、脓汁等），分离培养 可疑菌落可涂片镜检。
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生物学性状
铜绿假单胞菌
培养
3. 营养要求不高，临床上常用BAP、MAC、SS、 EMB分离培养，可形成不同形态的菌落特 征：
▪ 普通琼脂平板：菌落灰绿色，大小不一，扁平光滑
湿润，边缘不齐融合状，可有M型、R型。
▪ BAP：扁平、湿润的大菌落，色素明显呈灰绿或蓝
绿色，可见透明溶血环。
▪ 选择培养基（MAC、SS）：细小，无光泽半透
（BA、MAC） 色素-
+
室温培养2天
报告检出
血液（增菌） 体液
1.H-L：O型 2.枸橼酸盐利用试验:+
- 均为 +
1.硝酸盐还原产气试验 2.明胶液化试验 3.42℃生长试验
若有一项 -
生化编码鉴定法
1 2 DNA 4 1 2 4 1 2 4
O-F
精
试验项目
发 酵
氧 化 酶
枸 橼 酸 盐
麦 芽 糖
❖形态染色：为G-球杆菌，无动力。幼龄培 育物为细杆状，老龄培养物多为球状，以 此与奈瑟菌区别。
❖生化反应：氧化酶 +，触酶+，吲哚- 。 ❖药敏结果：对青霉素类、头孢类、四环素
类、喹诺酮类、氨基糖甙类均敏感。
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奥斯陆莫拉菌在血琼脂平板上的菌落特征（18-24h）
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资料仅供参考，实际情况实际分析
✓ 何谓非发酵菌，其特性有哪些？
✓ 绿脓杆菌的培养特性？
✓ 临床标本检验绿脓杆菌的程序、内容、
结果判断？
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氨 酸 双 水
甘 露 醇
木 糖
硝 酸 盐 还
酶
乙 酰 胺
管
解
原
结果 O + + — + — + + — —
总值 1
6
5
4
鉴定值：1654
鉴定结果：铜绿假单胞菌
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嗜麦芽窄食假单胞菌
❖嗜麦芽窄食假单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）为条件致病菌，常引起抵抗力 低下患者的各种感染，在假单胞菌的感染 中检出率仅次于铜绿假单胞菌。
▪ 原理：发酵菌发酵葡萄糖产生大量的酸，而非发酵菌
只能以氧化形式利用且产酸很少。H-L、O-F培养基的 蛋白质:葡萄糖分别为0.2:1、2:1，非发酵菌在H-L中产 生的酸多而不被产碱中和，指示剂显色更明显。
▪ 方法与结果
闭管
开管
例如
F
产酸变黄
产酸变黄
肠道杆菌
O 不产酸变黄 产酸变黄 产碱型 不产酸变黄 不产酸变黄
第二十一章 非发酵菌及检验
主讲：陈晓
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概述
❖非发酵菌（nonfeimenters）是一大群不
发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖， 氧化酶阳性（除不动杆菌属）的革兰阴 性无芽孢需氧杆菌。
❖非发酵菌菌属较多，与医学有关的主要 有假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌 属、莫拉杆菌属、黄杆菌属。
❖多数为条件致病菌，是引起医院感染的 重要菌，对抗生素的耐药率高。
明，中心棕绿色。
▪ 肉汤：表面形成菌膜，有色素。
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生物学性状
铜绿假单胞菌
培养
4. 色素
▪ 绿脓素：蓝绿色，溶于水、氯仿；
▪ 绿色荧光素：只溶于水，需在 360nm的紫外光下可见。
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生物学性状
铜绿假单胞菌
生化反应
1. 氧化酶试验：+
2. H-L培养基：O型
3. 枸橼酸盐利用试验：+