他克莫司缓释片的制备及体外释放度考察
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海峡药学 ２０１９年 第 ３１卷 第 １期
·药剂·
他克莫司缓释片的制备及体外释放度考察
陈餠彬，傅慧灵，江宁宇，王 娟，陈宇翔（福建省微生物研究所 福州 ３５０００７）
摘要：目的 他克莫司缓释片的研制并对其体外释放度进行评价。方法 聚乙二醇 ６０００、泊洛沙姆 １８８作为载体材料，制备他克莫司固体分 散体，羟丙甲纤维素 Ｋ４Ｍ作为缓释材料，并通过单因素考察法筛选出最优的处方。结果 体外释放度试验证明，他克莫司缓释片 １２ｈ的释放度 在 ８０％以上。结论 他克莫司缓释片工艺重现性好，体外释放度考察表明达到了预期的缓释效果。 关键词：他克莫司；缓释片；体外释放度；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ９４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６３７６５（２０１９）０１０３０４１０００６０３
ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｉｔｒｏＲｅｌｅａｓｅｏｆＴａｃｒｏｌｉｍｕｓＳｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅＴａｂｌｅｔｓ
ＣＨＥＮＷｅｉｂｉｎ，ＦＵＨｕｉｌｉｎ，ＪＩＡＮＧ Ｎｉｎｇｙｕ，ＷＡＮＧ Ｊｕａｎ，ＣＨＥＮＹｕｘｉａｎｇ（ＦｕｊｉａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｆｕｚｈｏｕ３５０００７，Ｃｈｉｎａ）
他克莫司（Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ，ＦＫ５０６）最早由日本藤泽药品工业 公司探索研究所于 １９８４年自日本筑波山土壤中分离的筑波 链霉菌 （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ）ＮＯ９９９３的 发 酵 液 中 提 取， 是含氮 ２３元环的大环内酯类强效免疫抑制剂〔１〕。目前，已广 泛应用于肝脏、胰腺、肾脏、心脏和肺等实体器官移植后的抗 排异治疗，其药理作用是有效抑制 Ｔ细胞激活，与内源性细胞 受体（ＦＫＢＰ１２）结合形成一个亲免素 ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎｓ复合物， 从而发挥作用 〔２〕。他克 莫 司 常 用 的 非 缓 释 剂 型 每 日 需 分 多 次服用，影响患者依从性和治疗效果。本研究以 ＨＰＭＣ为缓 释材料，参考国外药品说明书，对其处方组成及制备工艺进行 摸索，制备了日服 １次的他克莫司缓释片，并进行释放度的评 价。 １ 仪器与试药 １１ 仪器 安捷伦 １２６０高效液相色谱仪（Ｇ１３１１Ｃ四元泵， Ｇ１３１６Ａ柱温箱，Ｇ１３１４Ｆ检测器，ｌｃ１２６０色谱工作站）；ＸＡ１０５ 分析天平（梅 特 勒 · 托 勒 多 ）；ＣＭＡＧ ＨＳ４电 磁 搅 拌 加 热 仪 （ＩＫＡ）；真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；ＬＣＭＯ２Ｅ 单冲压片机（上海力超电机有限公司）；ＫＱ５００ＤＡ型数控超 声波清洗器（昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司 ）；ＲＣ８ＭＤ药 ｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ３１Ｎｏ１２０１９
７０℃加热搅拌至熔融，加入他克莫司原料药、酒石酸和丁羟甲 苯，连续搅拌混合 １ｈ；缓慢冷却，粉碎，过 ６０目筛，得他克莫 司固体分散体。取他克莫司固体分散体、ＨＰＭＣＫ４Ｍ、乳糖和 二甲硅油混匀后加入 ２ｍＬ５％的 ＨＰＭＣＥ１５水溶液制软材， ２６目挤压制粒，４０℃真空干燥 ４ｈ，加入硬脂酸镁混匀压片，每 片含主药 ２ｍｇ。 ２２ 测定方法 ２２１ 色 谱 条 件：色 谱 柱：ＩｎｅｒｔｓｕｓｔａｉｎＣ１８（４０×５５ｍｍ， ３μｍ）；流动相：乙腈叔丁基甲醚６ｍＭ 磷酸溶液 （３３５∶５０∶ ６００）；流速：１５ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：２０５ｎｍ；柱温 ６０℃；进样 量 １００μＬ。 ２２２ 溶液的制备：样品溶液：取他克莫司缓释片按释放度 测定法 （《中 国 药 典 》２０１５年 版 通 则 ０９３１），以 释 放 介 质 （０００５％的 ＨＰＣ和 ０５％的 ＳＤＳ水溶液，用 ６％磷酸溶液调 节至 ｐＨ４５）９００ｍＬ，转速 １００ｒ·ｍｉｎ－１，分别在 ０５、１、２、４、６、 ８、１２ｈ取样 １５ｍＬ，离 心，取 上 清 液 为 样 品 溶 液。标 准 品 溶 液：精密称取他克莫司标准品 １１ｍｇ，置棕色量瓶中，加 ５ｍＬ乙 腈使溶解，用溶出介质制成 ２２μｇ·ｍＬ－１的标准品溶液（室 温静置 ３ｈ后使用）。 ２２３ 专属性试验：按本品处方及制备工艺，称取除他克莫 司外的空白辅料，制备空白样品。用释放介质制成阴性溶液。 取标准品溶液、供试品溶液、和阴性溶液，照 ２２１项下色谱 条件，分别进样 １００μＬ，记录色谱图（见图 １）。结果表明，阴 性对照样品在主峰处无吸收，说明空白辅料对主药释放度测 定无干扰。
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅ ｔａｂｌｅｔｓＭＥＴＨＯＤＳ ＴｏｐｒｅｐａｒｅｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｏｌｉｄｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｗｉｔｈＰＥＧ６０００ａｎｄｐｏｌｏｘａｍｅｒ１８８ａｓｃａｒｒｉｅｒｍａｔｅｒｉａｌ， ＨＰＭＣＫ４Ｍ ａｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｍａｔｅｒｉａｌＴｏｓｅｌｅｃｔｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｂｙｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｒｅｌｅａｓｅｄｍｏｒｅｔｈａｎ８０％ ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｉｎ１２ｈｏｕｒｓＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｖｉｄｅｄａｎｏｐｔｉ ｍａｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｔａｂｌｅｔｓ ＫＥＹＷＯＲＤＳ：Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ；Ｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｔａｂｌｅｔｓ；Ｉｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅ；Ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
作者 简 介：陈 餠 彬，女 （１９８９６－）。 职 称：研 究 实 习 员。 Ｅｍａｉｌ： ９６３１０９７７６＠ｑｑｃｏｍ
仪（天津市天大天发科技有限公司）。 １２ 试药 他克莫司标准品（ＵＳＰ标准品，１４０８０１ＲＳ）；他克 莫司原料药（福建省科瑞药业有限公司）；羟丙基甲基纤维素 Ｋ４Ｍ（ＨＰＭＣＫ４Ｍ，上海昌为医药辅料技术有限公司）；一水乳 糖（Ｌａｃｔｏｓｅ，上海昌为），聚乙二醇 ６０００（ＰＥＧ６０００，南京威尔 化工）；泊洛沙姆 １８８（上海昌为）；ＤＬ酒石酸（成都华邑药用 辅料制造有限责任公司）；丁羟甲苯 （上海昌为）；二甲硅油 （成都华邑）；硬脂酸镁（上海昌为）；羟丙基甲基纤维素 Ｅ１５ （上海昌为）；羟丙基纤维素（ＨＰＣ，上海昌为）；十二烷基硫酸 钠（ＳＤＳ，西陇科学）。 ２ 方法和结果 ２１ 他克莫司缓释片的制备 ２１１ 处方筛选：他克莫司（ＣＡＳ号：１０４９８７１１３）属于 ＢＣＳ Ⅱ类药物，不溶 于 水，口 服 给 药 的 主 要 吸 收 部 位 在 空 肠 和 回 肠，口服生物利用度为 ４％ ～８９％，个体差异较大。故采用水 溶性载体材料制备能改善他克莫司溶出度的他克莫司固体分 散体，再将固体分散体与缓释材料、稀释剂及其他药剂辅料混 合均匀，用常规 的 粉 末 直 接 压 片 工 艺 制 备 他 克 莫 司 缓 释 片。 处方筛选主要是选择各种黏度的 ＨＰＭＣ及其用量。经前期 单因素试验，最终选用规格为 Ｋ４Ｍ的 ＨＰＭＣ作为缓释材料， 用量为处方量的 ３０％，以调节药物的体外释放。 ２１２ 处方工艺：称取处方量的 ＰＥＧ６０００、泊洛沙姆 １８８于
·药剂·
他克莫司缓释片的制备及体外释放度考察
陈餠彬，傅慧灵，江宁宇，王 娟，陈宇翔（福建省微生物研究所 福州 ３５０００７）
摘要：目的 他克莫司缓释片的研制并对其体外释放度进行评价。方法 聚乙二醇 ６０００、泊洛沙姆 １８８作为载体材料，制备他克莫司固体分 散体，羟丙甲纤维素 Ｋ４Ｍ作为缓释材料，并通过单因素考察法筛选出最优的处方。结果 体外释放度试验证明，他克莫司缓释片 １２ｈ的释放度 在 ８０％以上。结论 他克莫司缓释片工艺重现性好，体外释放度考察表明达到了预期的缓释效果。 关键词：他克莫司；缓释片；体外释放度；高效液相色谱法
中图分类号：Ｒ９４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６３７６５（２０１９）０１０３０４１０００６０３
ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｉｔｒｏＲｅｌｅａｓｅｏｆＴａｃｒｏｌｉｍｕｓＳｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅＴａｂｌｅｔｓ
ＣＨＥＮＷｅｉｂｉｎ，ＦＵＨｕｉｌｉｎ，ＪＩＡＮＧ Ｎｉｎｇｙｕ，ＷＡＮＧ Ｊｕａｎ，ＣＨＥＮＹｕｘｉａｎｇ（ＦｕｊｉａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ， Ｆｕｚｈｏｕ３５０００７，Ｃｈｉｎａ）
他克莫司（Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ，ＦＫ５０６）最早由日本藤泽药品工业 公司探索研究所于 １９８４年自日本筑波山土壤中分离的筑波 链霉菌 （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ）ＮＯ９９９３的 发 酵 液 中 提 取， 是含氮 ２３元环的大环内酯类强效免疫抑制剂〔１〕。目前，已广 泛应用于肝脏、胰腺、肾脏、心脏和肺等实体器官移植后的抗 排异治疗，其药理作用是有效抑制 Ｔ细胞激活，与内源性细胞 受体（ＦＫＢＰ１２）结合形成一个亲免素 ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎｓ复合物， 从而发挥作用 〔２〕。他克 莫 司 常 用 的 非 缓 释 剂 型 每 日 需 分 多 次服用，影响患者依从性和治疗效果。本研究以 ＨＰＭＣ为缓 释材料，参考国外药品说明书，对其处方组成及制备工艺进行 摸索，制备了日服 １次的他克莫司缓释片，并进行释放度的评 价。 １ 仪器与试药 １１ 仪器 安捷伦 １２６０高效液相色谱仪（Ｇ１３１１Ｃ四元泵， Ｇ１３１６Ａ柱温箱，Ｇ１３１４Ｆ检测器，ｌｃ１２６０色谱工作站）；ＸＡ１０５ 分析天平（梅 特 勒 · 托 勒 多 ）；ＣＭＡＧ ＨＳ４电 磁 搅 拌 加 热 仪 （ＩＫＡ）；真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；ＬＣＭＯ２Ｅ 单冲压片机（上海力超电机有限公司）；ＫＱ５００ＤＡ型数控超 声波清洗器（昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司 ）；ＲＣ８ＭＤ药 ｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ３１Ｎｏ１２０１９
７０℃加热搅拌至熔融，加入他克莫司原料药、酒石酸和丁羟甲 苯，连续搅拌混合 １ｈ；缓慢冷却，粉碎，过 ６０目筛，得他克莫 司固体分散体。取他克莫司固体分散体、ＨＰＭＣＫ４Ｍ、乳糖和 二甲硅油混匀后加入 ２ｍＬ５％的 ＨＰＭＣＥ１５水溶液制软材， ２６目挤压制粒，４０℃真空干燥 ４ｈ，加入硬脂酸镁混匀压片，每 片含主药 ２ｍｇ。 ２２ 测定方法 ２２１ 色 谱 条 件：色 谱 柱：ＩｎｅｒｔｓｕｓｔａｉｎＣ１８（４０×５５ｍｍ， ３μｍ）；流动相：乙腈叔丁基甲醚６ｍＭ 磷酸溶液 （３３５∶５０∶ ６００）；流速：１５ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：２０５ｎｍ；柱温 ６０℃；进样 量 １００μＬ。 ２２２ 溶液的制备：样品溶液：取他克莫司缓释片按释放度 测定法 （《中 国 药 典 》２０１５年 版 通 则 ０９３１），以 释 放 介 质 （０００５％的 ＨＰＣ和 ０５％的 ＳＤＳ水溶液，用 ６％磷酸溶液调 节至 ｐＨ４５）９００ｍＬ，转速 １００ｒ·ｍｉｎ－１，分别在 ０５、１、２、４、６、 ８、１２ｈ取样 １５ｍＬ，离 心，取 上 清 液 为 样 品 溶 液。标 准 品 溶 液：精密称取他克莫司标准品 １１ｍｇ，置棕色量瓶中，加 ５ｍＬ乙 腈使溶解，用溶出介质制成 ２２μｇ·ｍＬ－１的标准品溶液（室 温静置 ３ｈ后使用）。 ２２３ 专属性试验：按本品处方及制备工艺，称取除他克莫 司外的空白辅料，制备空白样品。用释放介质制成阴性溶液。 取标准品溶液、供试品溶液、和阴性溶液，照 ２２１项下色谱 条件，分别进样 １００μＬ，记录色谱图（见图 １）。结果表明，阴 性对照样品在主峰处无吸收，说明空白辅料对主药释放度测 定无干扰。
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅ ｔａｂｌｅｔｓＭＥＴＨＯＤＳ ＴｏｐｒｅｐａｒｅｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｏｌｉｄｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｗｉｔｈＰＥＧ６０００ａｎｄｐｏｌｏｘａｍｅｒ１８８ａｓｃａｒｒｉｅｒｍａｔｅｒｉａｌ， ＨＰＭＣＫ４Ｍ ａｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｍａｔｅｒｉａｌＴｏｓｅｌｅｃｔｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｂｙｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｒｅｌｅａｓｅｄｍｏｒｅｔｈａｎ８０％ ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｉｎ１２ｈｏｕｒｓＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｖｉｄｅｄａｎｏｐｔｉ ｍａｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔａｃｒｏｌｉｍｕｓｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｔａｂｌｅｔｓ ＫＥＹＷＯＲＤＳ：Ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ；Ｓｕｓｔａｉｎｅｄｒｅｌｅａｓｅｔａｂｌｅｔｓ；Ｉｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅ；Ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
作者 简 介：陈 餠 彬，女 （１９８９６－）。 职 称：研 究 实 习 员。 Ｅｍａｉｌ： ９６３１０９７７６＠ｑｑｃｏｍ
仪（天津市天大天发科技有限公司）。 １２ 试药 他克莫司标准品（ＵＳＰ标准品，１４０８０１ＲＳ）；他克 莫司原料药（福建省科瑞药业有限公司）；羟丙基甲基纤维素 Ｋ４Ｍ（ＨＰＭＣＫ４Ｍ，上海昌为医药辅料技术有限公司）；一水乳 糖（Ｌａｃｔｏｓｅ，上海昌为），聚乙二醇 ６０００（ＰＥＧ６０００，南京威尔 化工）；泊洛沙姆 １８８（上海昌为）；ＤＬ酒石酸（成都华邑药用 辅料制造有限责任公司）；丁羟甲苯 （上海昌为）；二甲硅油 （成都华邑）；硬脂酸镁（上海昌为）；羟丙基甲基纤维素 Ｅ１５ （上海昌为）；羟丙基纤维素（ＨＰＣ，上海昌为）；十二烷基硫酸 钠（ＳＤＳ，西陇科学）。 ２ 方法和结果 ２１ 他克莫司缓释片的制备 ２１１ 处方筛选：他克莫司（ＣＡＳ号：１０４９８７１１３）属于 ＢＣＳ Ⅱ类药物，不溶 于 水，口 服 给 药 的 主 要 吸 收 部 位 在 空 肠 和 回 肠，口服生物利用度为 ４％ ～８９％，个体差异较大。故采用水 溶性载体材料制备能改善他克莫司溶出度的他克莫司固体分 散体，再将固体分散体与缓释材料、稀释剂及其他药剂辅料混 合均匀，用常规 的 粉 末 直 接 压 片 工 艺 制 备 他 克 莫 司 缓 释 片。 处方筛选主要是选择各种黏度的 ＨＰＭＣ及其用量。经前期 单因素试验，最终选用规格为 Ｋ４Ｍ的 ＨＰＭＣ作为缓释材料， 用量为处方量的 ３０％，以调节药物的体外释放。 ２１２ 处方工艺：称取处方量的 ＰＥＧ６０００、泊洛沙姆 １８８于