《药用植物学与生药学》实验指导书绍兴文理学院元培学院

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《药用植物学与生药学》实验指导书绍兴文理学院元培学院
《药用植物学与生药学》
实验指导书
(供药学专业班用)
绍兴文理学院元培学院生命科学系
2021年2月
目录
实验一显微测量和显微描绘技术???????????????????1 实验二生药的水分、灰分、浸出物及杂质检查法????????????6 实验三植物细胞构造及后含物????????????????????8 实验四保护组织、分泌组织?????????????????????9 实
验五机械组织、输导组织?????????????????????10 实验六色谱法在中药鉴定中的
应用????????????????? 11 实验七黄连、黄芪、甘草、人参的鉴定????????????????12 实验八番泻叶、金银花和红花的鉴定?????????????????14 实
验九茯苓、半夏、贝母和天麻的鉴定????????????????15 实验十动物及矿物类中药????????????????????? 16 实验十一中成药的显微鉴定???????????????????? 16
附录
1.常用试剂配制法 ?????????????????????????17 2.常用商品酸碱浓度
表 ?????????????????????? 22 3.层离法常用显色剂????????????????????????23 4.绘图注意事项??????????????????????????24
I
一、实验注意事项:
1.根据教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授内容。

2.仔细阅读本次实验的内容,要求弄懂实验的原理与方法。

3.准备好各种自备的实验用品,如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。

二、实验过程中的几点要求:
1.遵守实验室规则,保持实验室安静。

2.实验认真,观察仔细,观察应当与思考结合起来,应当手、眼、脑三者并用。

3.由于实验时间有限,实验时应当善于安排自己的工作,注意力应当集中在主要问题上,不要用过多时间去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时间去解决。

4.在实验过程中,应当随时注意观察到的现象,测量或称量的数据,计算结果等写在报告纸上,养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。

5.实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。

6.实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。

7.纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。

三、实验完毕时的几点要求:
1.按照教师指定时间完成实验报告。

2.把实验用仪器、用品等收拾干净,放在指定位置。

发放给个人保管的可放抽屉或柜内。

3.临时借用物品应及时归还。

4.值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废弃物。

5.实验结束后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。

II
实验一显微测量和显微描绘技术
一、目的要求
1.掌握徒手制片、粉末制片、表面制片和解离制片方法。

2.掌握生物显微镜使用及
显微绘图技术。

3.掌握显微测微尺的校正和使用方法。

4.掌握描绘器的使用方法。

二、仪器、试剂
1.仪器生物显微镜、酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮,以上是每次实验必备品。

另需单面刀片或剃刀、烧杯、试管、目镜测微尺、载台测微尺、显微描绘器、绘图板、恒温水浴锅、量筒、
粉碎机。

2.试剂稀甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、间苯三酚试液、浓盐酸、10%铬酸、浓硝酸、10%硝酸、氯酸钾、5%~15%的氢氧化钾溶液。

三、实验材料制作徒手切片和表面制片,可选用新鲜药材;制作粉末片,选用干燥
药材的粉末,如:甘草、虎杖、麦冬、当归等。

四、实验内容 1.生物显微镜的使
用生物显微镜由光学部分和机械部分组成。

光学部分包括成像系统――目镜和物镜,照
明系统――聚光器、可变光栏和反射镜。

物镜将标本作第一次放大,目镜将第一次放大的
像作第二次放大,两者相乘即是观察到的放大倍数。

机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载
物台、粗细调节手轮及推动器或压夹。

使用生物显微镜时,利用反射镜将外来光线导入聚
光镜中,由聚光镜将光线会聚在标本上,用光栏调节光线强度。

观察时视野范围内应均匀
明亮,先用低倍镜观察,如需要放大,可将目的物调至视野中央,然后转换成高倍镜,仔
细观察。

(1)低倍镜的操作法:1)将显微镜放置离桌缘约10cm处,镜臂应靠近胸前。

2)对光。

上升聚光镜到载物台水平,打开光栏至最大限度,再将低倍镜转至镜筒的正下方,使对准
载物台上的透光孔(转动时,听到“得”一声,即已对正)然后用二手转动反光镜,同时从
接目镜向下看,直至镜中出现一明亮而均匀的视野为止。

3)装片。

将欲观察的标本片从
镜前方横置于载物台上,(注意盖玻片应向上)使标本对准透光孔的中央。

4)调节焦距。

从侧面注视接物镜与标本片之间的距离,向外旋转粗调节手轮,使镜筒慢慢下降,直至物
镜几乎与标本片相接触,但切勿触及标本片,以免造成镜头与标本片的损坏。

自目镜向下
观察,同时向内旋转粗调节手轮,使物镜慢慢上升,直至在视野中看到清楚的物象为止。

若标本不在视野中,则慢慢移动标本片,使之适中,看到物象后,用压片夹固定制片,再转动细调节手轮,并调节光线,直到看到最清楚的物象为止,注意在显微镜中看到的是
实物倒象。

如果观察过程中发现清晰的图像逐渐模糊,说明调节手轮失灵,应进行检修。

(2)高倍镜的操作法:应先在低倍镜下选择物像,移至视野中心,换转高倍镜,应能看到
欲观察之物象,用细调节手轮使之图象清晰。

更换高倍镜时如出现镜头触及载玻片现象,
则要检查标本切片是否放反,或高低倍镜是否配套。

高倍镜头观察物象时,只能用细调节
手轮调节焦距。

(3)使用显微镜注意点:1)取拿显微镜时,必须一手握住镜臂,一手托住镜座,轻取
轻放,防止因撞击使镜头内各组透镜脱胶而影响观察的清晰度。

2)每次观察标本片时,
必须先用低倍镜观察,看清物象后,再换高倍镜。

3)要注意保持显微镜的干燥和清洁,
使用前后,均需将显微镜擦干净,注意镜头要用擦镜纸或绸巾单向擦拂,切勿用手、手帕
或纸片等去擦,观察临时制片时,要防止水分或药液外溢以致沾污镜头及其他部分。

2.显微制片法
1
(1)徒手制片法:系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片,可在显微镜下观察组织
构造、细胞特征的制片法,新鲜材料应除净泥砂,干燥材料需浸软后切片。

本方法简便快速,能保持植物体原有结构的真像、色彩和内含物,适合于临时制片观察或显微化学实验,其缺点是切片较厚且厚薄不均一,不适合长期保存。

1)取材、固定与切片:选择已软化的中药材适当部位,切割成长2~3cm的小段,用
拇指及食指和中指夹住材料,下端用无名指托住,另手持刀片,自左向右移动手腕,牵曳
切片,动作要轻而快,力求切片薄而完整,操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。


于叶片或柔软的材料,需用稍坚固而易切的胡萝卜、马铃薯或实心大通草等将材料夹住进
行切片。

徒手切片器切片:将适当长度的材料夹入切片器上口外,旋转螺丝将材料固定紧,材料略露出圆盘平面,然后将切片刀或剃刀平放在圆盘上,自左向右平拉切片,同时转动
切片器下端的升降调节轮,使材料上升,以利切片。

2)装片:将切好的薄片,用毛笔小心地移入盛有清水的培养皿中浸泡,取载玻片滴加
甘油或试液,用镊子或毛笔将切片移于其上,再滴一滴甘油于片上,加上盖玻片,即可作
临时制片观察;也可将薄片滴加水合氯醛液加热透化,再滴加稀甘油,加上盖玻片后进行
观察。

加盖玻片时,应尽量避免产生气泡。

(2)粉末制片法:将药材研粉,过筛(50-80目)后制片。

此法是鉴定中药材最常用的方法之一,简便快速,主要鉴别细胞的形态特征。

特别坚硬的药材可用锉刀将其锉成粉末。

取粉末少许,置于洁净的载玻片上,滴加1~2滴蒸馏水或甘油醋酸试液,加上盖玻片,
置显微镜下,可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素颗粒等。

如要观察细
胞的形态特征,则应采用滴加水合氯醛加热透化后装片,以除去细胞中的淀粉、油脂等,
增加细胞壁的折光率,从而使细胞的形态更加清晰。

为防止水合氯醛结晶析出,水合氯醛
透化后应滴加甘油,盖上盖玻片,擦净溢出液即可观察。

(3)表面制片法:多用于对叶片、果实或草本植物茎表皮组织的观察,可观察到表
皮细胞形态、气孔类型、毛茸特征和着生情况等。

通常用眼科镊子夹住叶片或果实等的表面,轻轻撕取其表皮层置于载玻片上的水、甘油或水合氯醛试液内,注意其上表面朝上方,加盖盖玻片,置显微镜下进行观察。

(4)解离制片法:系利用化学试剂使植物体的细胞与细胞间的中层物质溶解,细胞
相互分离的方法。

适用于研究细胞的立体形态结构,尤其适宜观察导管、管胞、石细胞和
纤维等增厚壁的状况。

欲解离的材料,需先切割成2mm的薄片。

根据选用解离的试剂不同分: 1)氢氧化钾解离法:适用于柔软的植物材料。

将切割好的材料置于坩埚中,加5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻棒挤压能离散为止。

如离析的材料稍硬,可用6%~10%
氢氧化钾液加热使之离析,尚可更换一次试液。

待材料能被轻压离散时,倾去碱液,用水
洗至中性,即可取所需部位加稀甘油制片观察。

用氢氧化钾溶液能逐渐除去细胞中的淀粉、蛋白质、油脂及色素,其作用较水合氯醛强,并能使细胞膨胀,若作用时间较长,能使纤
维性组织解离,并可引起薄壁组织的破坏和变形。

所以加热处理时间不宜太长。

2)硝酸-铬酸离析法:适用于木质化组织,如木材、根、茎、树皮等材料,将材料放
入坩埚或试管中,加10%硝酸与10%铬酸的等量混合液,其量为材料的20倍,放置浸渍
的时间,视材料的性质而异,一般为1~2日或更长的时间。

也可以采用加温的办法来缩
短浸渍时间,以材料用玻棒轻压,可以离散为度,然后用水洗至中性,即可制片观察。

硝酸和铬酸均为强氧化剂,解离速度较快,如解离柔软较嫩的材料,应注意掌握时间,经硝酸、铬酸解离的材料,草酸钙、碳酸钙结晶及淀粉粒、脂肪油等均已消失。

3)氯酸钾法:本法适用于坚硬的材料,如木类及某些果实、种子坚硬的果皮、种皮等,将材料置坩埚或小烧杯中,加50%硝酸试液约5ml及氯酸钾粉少量,缓缓加热至沸,当气泡渐少时,再及时加入少量的氯酸钾,以维持气泡稳定产生(约15~20分钟),至材料能

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