2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册 第3章 本章知识网络含答案

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章本章
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一、实验原理
1．提取DNA的原理
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，选用适当的物理或化学方法提取DNA，去除其他成分。

如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。

(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2 mol/L的NaCl溶液。

2．鉴定DNA的原理
在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。

二、实验步骤
三、操作提示
1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。

2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

四、关键点拨
1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。

2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。

3．提纯DNA时，选用体积分数为95%的冷酒精的原因：体积分数为95%的冷酒精提纯效果更佳。

4．实验中进行了2次静置或离心，目的是将DNA和杂质分子分开，第1次操作后，DNA存在于上清液中；第2次操作后DNA存在于析出的白色丝状物或离心管沉淀中。

例1如表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述，不正确的是()
选项试剂操作作用
A研磨液与生物材料混合提取溶解DNA
B 2 mol/L NaCl溶液与提取出的DNA混合溶解DNA
C冷却的酒精加入到离心后的上清液中溶解DNA
D二苯胺试剂加入到溶解有DNA的NaCl溶液中鉴定DNA
答案C
解析DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离，C错误。

例2(2023·河北邯郸高二期中)如图为DNA的粗提取与鉴定实验的部分操作流程。

下列相关叙述正确的是()
A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
B．图2过程中，用玻璃棒进行交叉搅拌会使DNA析出更快
C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2 mol/L的NaCl溶液中
D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂
答案D
解析将图1中的研磨液过滤后应保留上清液，A错误；图2过程中，用玻璃棒搅拌要轻轻搅拌且沿同一方向进行，以免加剧DNA分子的断裂，B错误；图2析出得到的白色丝状物主要成分是DNA，DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度变化而改变的，不是只能溶于2 mol/L的NaCl溶液中，C错误。

1．(2022·山东，13)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是()
A．过滤液沉淀过程在4 ℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C．在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D．粗提取的DNA中可能含有蛋白质
答案B
解析低温时DNA酶的活性较低，过滤液沉淀过程在4 ℃冰箱中进行是为了防止DNA降解，A正确；离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀，B错误；在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，C正确；细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，可能有蛋白质不溶于酒精，在95%的冷酒精中与DNA一块析出，故粗提取的DNA中可能含有蛋白质，D正确。

2．下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()
A．用蒸馏水使家兔的红细胞涨破，可获取富含DNA的滤液
B．DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2 mol/L的NaCl溶液
C．新鲜的洋葱和猪肝可作为实验材料提取DNA，而菠菜不能用于提取DNA
D．鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴
答案B
解析兔属于哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，不能用于DNA的粗提取，A
错误；DNA含量高，并且材料易得的生物都可以作为提取DNA的材料，所以菠菜也可以作为提取DNA的材料，C错误；鉴定DNA时，将丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂，进行沸水浴，冷却后溶液呈蓝色，D错误。

3．下列与“DNA的粗提取与鉴定”实验相关的说法，错误的是()
A．研磨液中应加入DNA酶的抑制剂，以防细胞破碎后DNA酶降解DNA
B．研磨时需要控制好时间，以防影响DNA的提取量
C．鉴定时加入二苯胺试剂后沸水浴即可观察到较为明显的显色反应
D．鉴定时溶液蓝色的深浅与DNA含量的多少有关
答案C
解析DNA主要存在于细胞核中，DNA酶能降解DNA，研磨液中应含有DNA酶抑制剂，DNA酶抑制剂能防止细胞破碎后DNA酶降解DNA，A正确；由于研磨时，细胞结构会破裂，DNA可能会被细胞中的DNA酶降解，从而使DNA含量减少，因此研磨时需要控制好时间，以防影响DNA的提取量，B正确；鉴定时加入二苯胺试剂混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，可观察到较为明显的显色反应，C错误；在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色，用二苯胺试剂鉴定DNA时，溶液蓝色深浅能反映DNA含量的多少，D正确。

4．(2023·福建福州高二期中)下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，正确的是()
A．取材时可选用鸡血、洋葱、香蕉等富含DNA的材料进行实验
B．将白色丝状物置于2 mol/L的NaCl溶液中，离心后弃去上清液
C．可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来
D．鉴定DNA时，将丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂，混匀后即呈蓝色答案A
解析DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度较大，将白色丝状物置于2 mol/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象，离心后应保留上清液，B错误；将洋葱置于清水中，由于细胞壁的支持保护作用，植物细胞不会吸水涨破，C错误；鉴定DNA时，将丝状物溶于2 mol/L的NaCl 溶液中，再加入二苯胺试剂，混匀后再在沸水中加热，冷却后会出现蓝色，D错误。

5．研究人员比较了不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高，获得的DNA越多)的影响，实验结果如图所示。

下列有关叙述错误的是()
A．提纯DNA时可加入75%酒精去除蛋白质等物质
B．新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，但提取DNA的量不是最多
C．用二苯胺试剂鉴定，蓝色最深的是冷冻3 d处理后提取的DNA
D．DNA不溶于酒精，在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的不同而不同
答案A
解析DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，所以DNA的粗提取和鉴定实验中，提纯DNA时，加入冷却的、体积分数为95%的酒精溶液是为了溶解蛋白质，形成含杂质较少的DNA丝状物，A错误；新鲜棉叶提取的DNA纯度最高，但提取率不高，因此新鲜棉叶提取DNA的量不是最多的，B正确；冷冻3 d处理提取的DNA量是最多的，因此用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是冷冻3 d处理后提取的DNA，C正确；DNA在不同NaCl溶液中的溶解度不同，D正确。

6．如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题：
(1)上述图示中，该实验的正确操作顺序是(用序号与箭头表示)。

(2)步骤④中使用2 mol/L NaCl溶液的目的是。

(3)步骤①的目的是，其依据的原理是。

(4)步骤①中所得到的丝状物为色，若要鉴定其主要成分为DNA，可滴加试剂，后，如果出现则证明该丝状物的主要成分为DNA。

(5)由于鸡血较难找到，某学生试图用猪血代替，结果没有成功，其原因最可能是。

答案(1)③→②→①→④→⑤(2)溶解DNA(3)析出并获得DNA DNA不溶于酒精(4)白二苯胺沸水浴冷却蓝色(5)猪是哺乳动物，哺乳动物血液中成熟的红细胞没有细胞核
解析(2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA能溶于2 mol/L的NaCl溶液。

(3)步骤①的目的是利用DNA不溶于酒精的性质，除去细胞中溶于酒精的物质并提取DNA。

(4)提取的DNA呈白色丝状物，鉴定DNA用二苯胺试剂，沸水浴加热5 min，冷却后溶液呈蓝色。

(5)猪是哺乳动物，哺乳动物血液中成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器，因此用猪血代替鸡血来进行该实验难以取得成功。

第1节重组DNA技术的基本工具
[学习目标]阐明重组DNA技术所需的三种基本工具及其作用。

一、基因工程的概念和工具酶
1．基因工程：指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。

2．基因工程的工具酶
(1)限制性内切核酸酶(限制酶)——“分子手术刀”
来源主要来自原核生物
种类数千种
作用识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开结果产生黏性末端或平末端
(2)DNA连接酶——“分子缝合针”
①作用：将两个DNA 片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

②种类
种类来源特点
E.coli DNA连接酶大肠杆菌只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的DNA片段
T4 DNA连接酶T4噬菌体既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对较低
判断正误
(1)基因工程可以实现遗传物质在不同物种间的转移，人们可以定向选育新品种()
(2)限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列()
(3)DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来()
(4)限制酶和解旋酶的作用部位相同()
答案(1)√(2)×(3)×(4)×
解析(2)大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

(3)DNA连接酶能将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(4)限制酶和解旋酶的作用部位不同，限制酶作用于磷酸二酯键，解旋酶作用于氢键。

任务一：基因工程的理论基础
1．基因工程操作导致的基因重组与有性生殖中的基因重组的主要区别是什么？
提示有性生殖中的基因重组是随机的，并且只能在同一物种间进行重组；基因工程可以实
现遗传物质在不同物种间进行重组，并且方向性强，可以定向地改变生物的性状。

2．为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？
提示(1)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。

(2)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。

3．为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？
提示(1)基因是控制生物性状的独立遗传单位。

(2)遗传信息的传递都遵循中心法则。

(3)生物界共用一套遗传密码。

任务二：限制性内切核酸酶(限制酶)
1．请结合限制酶的作用特点，回答以下问题：
(1)限制酶能切开RNA分子的磷酸二酯键吗？
提示不能。

(2)请结合图示，推断限制酶切割一次可断开几个磷酸二酯键？产生多少游离的磷酸基团？产生几个黏性末端？消耗几分子水？
提示断开2个磷酸二酯键；产生2个游离的磷酸基团；产生2个黏性末端；消耗2分子水。

2．推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么？
提示限制酶是原核生物的一种防御工具，用来切割侵入细胞的外源DNA，以保证自身安全。

3．为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子？
提示含某种限制酶的细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列，或者甲基化酶将甲基转移到了限制酶所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。

4．有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶SpeⅠ进行切割，B片段分别用限制酶Hin dⅢ、XbaⅠ、Eco RⅤ和XhoⅠ进行切割。

各限制酶的识别序列和切割位点如图。

(1)请写出限制酶Spe Ⅰ、Hin d Ⅲ、Xba Ⅰ和Xho Ⅰ切割形成的黏性末端。

提示 Spe Ⅰ： Hin d Ⅲ：
Xba Ⅰ： Xho Ⅰ：
(2)同种限制酶切割产生的黏性末端是否相同？不同限制酶切割产生的黏性末端是否一定不同？ 提示 同种限制酶产生的黏性末端相同；不同的限制酶切割可能会形成相同的黏性末端。

(3)哪种限制酶切割B 片段产生的DNA 片段能与限制酶Spe Ⅰ切割A 片段产生的DNA 片段相连接？为什么？连接完成后，该重组DNA 分子的新连接处能否再被所用的限制酶识别？为什么？ 提示 限制酶Xba Ⅰ；因为Xba Ⅰ与Spe Ⅰ切割产生了相同的黏性末端。

不能再被所用的限制酶识别；因为所用的两种限制酶均不能识别该重组DNA 分子的新连接处的脱氧核苷酸序列。

与DNA 相关的几种酶的比较 项目
DNA 连接酶 限制酶 DNA 聚合酶 解旋酶 作用部位
磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 氢键 作用对象 DNA 片段 DNA 单个的脱氧核苷酸
DNA 作用结果 将两个DNA 片段连接
成完整的DNA 分子 切割DNA 分子 将单个的脱氧核苷酸连接到DNA 单链末端 将双链DNA 分
子局部解旋为
单链
拓展延伸
1．回文序列
限制酶特异性识别和切割的部位具有回文序列，即在切割部位，一条链正向读的碱基顺序，与另一条链反向读的顺序完全一致。

例如：Eco R Ⅰ限制酶识别的DNA 序列为=======GAATTC
CTTAAG ，为回
文序列。

2．同尾酶
识别DNA 分子中不同核苷酸序列，但能切割产生相同黏性末端的限制酶被称为同尾酶。

同尾酶构建载体时，切割位点的选择范围扩大。

例如，我们选择了用某种限制酶切割载体，如果目的基因的核苷酸序列中恰好有该限制酶的识别序列，那么用该限制酶切割含有目的基因的DNA 片段时，目的基因就很可能被切断；这时可以考虑用合适的同尾酶(目的基因的核苷酸序列中不能有它的识别序列)来获取目的基因。

1．以下是几种不同限制酶切割DNA 分子后形成的部分片段。

下列叙述正确的是( )
A ．以上DNA 片段是由4种限制酶切割后产生的
B ．②片段是在识别序列为GAA TT CTTAA
的限制酶作用下形成的 C ．①和④两个片段在DNA 聚合酶的作用下可形成重组DNA 分子
D ．限制酶和DNA 连接酶作用的部位都是磷酸二酯键
答案 D
解析 图中①④是同一种限制酶切割形成的，因此以上DNA 片段是由3种限制酶切割后产生的，A 错误；②片段是在识别序列为的限制酶作用下形成的，B 错误；①④连接形成重组DNA 分子需要的是DNA 连接酶，C 错误。

2．DNA 连接酶是基因工程的必需工具。

下列有关DNA 连接酶的叙述，错误的是( )
A ．DNA 连接酶可以将任意的两个DNA 片段连接成一个重组DNA 分子
B ．DNA 连接酶发挥作用时不需要识别特定的脱氧核苷酸序列
C ．DNA 连接酶可以催化两个脱氧核苷酸之间磷酸二酯键的形成
D ．有些DNA 连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端
答案 A
解析 DNA 连接酶可以连接平末端或互补配对的黏性末端，而非任意的两个DNA 片段，A 错误。

二、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
1．种类：质粒、噬菌体、动植物病毒等。

2．常用载体——质粒
(1)本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。

(2)质粒作为载体所具备的条件及原因
条件原因
稳定存在并能自我复制或整合到受体DNA上能使目的基因稳定存在且数量可扩增有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组DNA分子的筛选
无毒害作用对受体细胞无毒害作用，避免受体细胞受到损伤
(3)作用
①作为运输工具，将外源基因导入细胞。

②质粒携带外源DNA片段在细胞内大量复制或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。

判断正误
(1)作为载体的质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因()
(2)质粒是环状双链DNA分子，是基因工程常用的载体()
(3)载体(如质粒)和细胞膜中的载体蛋白的成分相同()
(4)DNA重组技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体()
答案(1)×(2)√(3)×(4)×
解析(1)作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因。

(3)载体(如质粒)的成分是DNA，细胞膜中的载体的成分是蛋白质。

(4)DNA重组技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶，载体不属于工具酶。

任务三：载体需具备的条件和载体的选择
1．载体要与外源DNA片段连接，需要具备什么条件？
提示具有一个或多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入其中。

2．要使携带的外源DNA片段在受体细胞中稳定存在，载体需要具备什么条件？
提示能在受体细胞中自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制，这样它携带的外源DNA片段才能在受体细胞中复制，不至于丢失。

3．我们用肉眼看不到载体是否进入受体细胞，为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？
提示具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选。

4．根据标记基因的作用，有同学认为在含有某种抗生素的培养基中筛选存活的受体细胞不一定是导入目的基因的受体细胞，这种说法是否合理？并说明理由。

提示合理；因为仅导入载体的和导入目的基因的受体细胞均能在该培养基中存活。

5．若用家蚕作为某基因表达载体的受体细胞，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用噬菌体作为载体，其原因是什么？
提示噬菌体的宿主细胞是细菌，而不是家蚕。

标记基因的筛选原理
载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。

将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。

在含有该抗生素的培养基上，能够生存的是被导入了载体的受体细胞。

如图所示：
3．(2023·贵州安顺高二联考)质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。

下列有关叙述正确的是()
A．质粒是只存在于细菌细胞质中能自我复制的小型环状双链DNA分子
B．在所有的质粒上总能找到一个或多个限制酶切割位点
C．携带目的基因的重组质粒只有整合到受体细胞的染色体DNA上才会随后者的复制而复制D．质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组DNA的筛选
答案D
解析质粒不只分布于原核生物中，在真核生物如酵母菌细胞内也有分布，A错误；并不是所有的质粒上都能找到限制酶的切割位点而成为适合运载目的基因的工具，B错误；重组质粒进入受体细胞后，可以在细胞内自我复制，或整合到受体染色体DNA上后复制，C错误。

4.某细菌质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转入成功。

外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，如图所示是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)示意图。

请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是()
插入点细菌在含氨苄青霉素的培养基上的生长状况细菌在含四环素的培养基上的生长状况
①能生长能生长
②能生长不能生长
③不能生长能生长
A.①是c；②是b；③是a
B．①是a和b；②是a；③是b
C．①是a和b；②是b；③是a
D．①是c；②是a；③是b
答案A
题组一基因工程的概念和工具酶
1．玉米的PEPC酶固定CO2的能力较水稻的强60倍。

我国科学家正致力于将玉米的PEPC 基因导入水稻中，以提高水稻产量。

下列有关该应用技术的叙述，不正确的是()
A．该技术是在DNA水平上进行设计和施工的
B．该技术的操作环境是生物体内
C．该技术的原理是基因重组
D．该技术的优点是定向产生人类需要的生物类型
答案B
解析由题意可知，该技术为基因工程，是在生物体外进行的操作。

2．科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白。

下列关于这一先进技术的理论依据，不正确的是()
A．所有生物共用一套遗传密码
B．基因能控制蛋白质的合成
C．兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成，都遵循相同的碱基互补配对原则
D．兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先
答案D
解析题干表述的是目的基因导入受体细胞并得以表达的过程，目的基因在不同生物细胞中能够表达出相同的蛋白质，说明控制其合成的mRNA上的密码子是共用的，相同的密码子决定相同的氨基酸，A正确；基因通过转录获得mRNA，进而控制蛋白质的合成，B正确；基因通常是有遗传效应的DNA片段，只要是双链DNA都遵循碱基互补配对原则，其组成原料都是四种脱氧核苷酸，C正确；生物之间是否有共同的原始祖先与转基因技术之间没有必然关系，D错误。

3．据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是()
A．限制性内切核酸酶可以切断a处
B．DNA聚合酶可以连接a处
C．解旋酶可以使b处解开
D．DNA连接酶可以连接c处
答案D
解析限制酶可以切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，即a处，A正确；DNA聚合酶可以连接脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，即a处，B正确；解旋酶可以使氢键断裂，即b处，C正确；DNA连接酶可以连接DNA片段形成磷酸二酯键，即a处，D错误。

4．限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是()
A．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键
B．限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸
C．E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端
D．限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA
答案B
解析DNA连接酶连接的是两个DNA片段，A错误；限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，不能切割，B正确；E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，C错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，D错误。

5．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的脱氧核苷酸序列。

如图所示为四种限制酶Bam H Ⅰ、Eco R Ⅰ、Hin d Ⅲ以及BglⅡ的识别序列，箭头表示每一种限制酶的特定切割位点，切割出来的DNA片段末端可以互补黏合的是(限制酶)，其正确的末端互补序列应该为()
A．Bam H Ⅰ和Eco R Ⅰ；末端互补序列为AATT—
B．Bam H Ⅰ和Hin d Ⅲ；末端互补序列为GATC—
C．Eco R Ⅰ和Hin d Ⅲ；末端互补序列为AATT—
D．Bam H Ⅰ和BglⅡ；末端互补序列为GATC—
答案D
6．(2023·江苏南京高二期中)下列关于如图所示黏性末端的说法，错误的是()
A．DNA连接酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
B．甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的
C．切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
D．甲、乙黏性末端可形成重组DNA分子
答案C
解析切割甲的限制酶的识别序列是－GAATTC－，切割乙的限制酶的识别序列是－CAATTG－，所以甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的，B正确；甲、乙片段形成的重组DNA分子的序列是－CAA TTC－，而切割甲的限制酶的识别序列是－GAA TTC－，所以该限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，C错误。

题组二“分子运输车”——载体
7．质粒是基因工程中常用的载体。

下列有关质粒的说法，正确的是()
A．质粒上的基因表达不遵循中心法则，所以可用作外源DNA分子的载体
B．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件
C．质粒上的抗生素合成基因可作为标记基因
D．作为外源DNA分子的载体，质粒需具有限制酶能够切割的位点
答案D
解析质粒上的基因表达遵循中心法则，A错误；标记基因是用于重组质粒的筛选和鉴定，与目的基因的表达无关，B错误；质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因，用于重组质粒的筛选和鉴定，C错误。

8．(2023·河北秦皇岛高二期末)下列有关基因工程中载体的说法，正确的是()
A．基因工程中使用的载体只有质粒
B．质粒是细胞质中能够自我复制的环状DNA分子
C．噬菌体可以作为动物基因工程的载体
D．天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞
答案B
解析基因工程中常用的载体是质粒，此外还有噬菌体、动植物病毒等，A错误；噬菌体是专门寄生在细菌体内的病毒，不可以作为动物基因工程的载体，C错误；天然质粒往往不能直接作为载体，要根据不同的目的和需求进行人工改造，D错误。

9．如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点(箭头表示相关酶的切割位点)。

如图是酶切后产生的几种末端。

下列有关说法正确的是()。