炮制与超微粉碎对水蛭药效影响的初步实验研究_吕文海

2.2 供试品对小鼠凝血时间的影响
取体重(28 ±3)g 的成年雄性小鼠 , 随机分为 5 组 。水蛭煎剂组以 0.4 mg·g -1剂量灌胃 。3 种散剂 组每天灌胃前临 时配成 13 mg·ml -1 的混悬液 , 以 0.2 mg·g -1的剂量灌胃(煎剂的 1/2 量)。用生理盐 水作对照 。每天 3 次 , 连续给药 3 d , 第 4 天给药 1 h 后 , 从小鼠眼内毗球后静脉丛取血 , 按毛细管法[ 2] ,
P
>0.051) <0.051) <0.011) <0.011)
2.4 供试品对小鼠体内抗栓作用的影响 抗栓实验方法学研究认为 , 在(37 ±1) ℃的生
理盐水中 , 测定小鼠尾出血时间 , 与鼠颈动脉旁路血 栓形成法具有很好的平行性 。 可作为一种简便易行 的抗血栓形成药物的体内初筛法用于实验[ 3] 。取体 重(20 ±2)g 的雄性小鼠随机分为 5 组 , 以给定剂量 灌胃 3 d , 第 4 天给药 1 h 后 , 将小鼠固定 , 距尾尖 3 mm 处剪断 , 垂直放入(37 ±1) ℃生理盐水中 , 使尾 端在液面下 3 cm , 记录出血时间 , 结果见表 5 。实验 表明 , 体内抗栓作用 , 也以超微散为优 , 但生 、制品之 间的差异不明显 。
[ 关键词] 水蛭 ;新法炮制 ;超微粉碎 ;增效 [ 中图分类号] R 283.1 [ 文献标识码] B [ 文章编号] 1001-5302(2001)04-0241-04
水蛭作为经典的破血逐瘀药 , 近代在中医临床 与中成药生产中得到了愈来愈广泛的应用 , 并成为 了一种世界性药物 。 经前期工作 , 初步证明水蛭的 主流药用品种 为蚂蟥(宽体金线 蛭 Whit mania pigra Whitman);切丝入药优于《 药典》规定的切段入 药 ;生用在活血化瘀等药效方面 , 优于传统烫制品 ; 按新法制成的制水蛭能在改善原药气味的同时 , 较 好的保存其内在成 分 , 且溶 出效果及 抗凝血 、抗血 栓 、降低血小板聚集率 、改善微循环 、降胆固醇等药 效学指标 , 均优于传统烫制水蛭 , 部分指标也优于生 水蛭 , 有保质增效的趋势[ 1] 。但水蛭在临床应用中 入汤剂味劣难服 , 易反胃败胃 。临床中亦有研末或 装胶囊吞服效优的经验 。
生水蛭超微散 :净水蛭丝经 BFM-6 型倍力微粉 机粉碎 。 出料温度 35 ～ 40 ℃。
制水 蛭超 微 散 :净 水 蛭 丝 酒 润 麸 制 炮 制 后 , BFM-6 型倍力微粉机粉碎 , 出料温度同上 。
3 种散剂均平铺一薄层 , 经紫外灯照射 45 min 后 , 密切保存备用 。 1.3 实验动物与仪器
3.33 4.70 4.93 5.38 5.27 4.71 5.40 5.79 5.50 4.23 3.86 0.72 0.00 0.78 3.15 10.59 20.19 1.13 1.02 6.19 3.05 0.11 0.00 0.00
注 :中位径 10.24 μm 最大粒径 72 μm
表 2 制水蛭超微粉粒度分布测试结果
粒径 /μm
区间频率 / %
0.00 ～ 1.00 1.00 ～ 2.00 2.00 ～ 3.00 3.00 ～ 4.00 4.00 ～ 5.00 5.00 ～ 6.00 6.00 ～ 7.00 7.00 ～ 8.00 8.00 ～ 9.00 9.00 ～ 10.00 10.00 ～ 11.00 11.00 ～ 12.00 12.00 ～ 13.00 13.00 ～ 14.00 14.00 ～ 15.00 15.00 ～ 20.00 20.00 ～ 30.00 30.00 ～ 40.00 40.00 ～ 50.00 50.00 ～ 60.00 60.00 ～ 70.00 70.00 ～ 72.00 72.00 ～ 73.00 73.00 ～ 74.00
表 1 生水蛭超微粉粒度分布测试结果
粒径
区间频率
/μm
/ %
0.00 ～ 1.00 1.00 ～ 2.00 2.00 ～ 3.00 3.00 ～ 4.00 4.00 ～ 5.00 5.00 ～ 6.00 6.00 ～ 7.00 7 .00 ～ 8.00 8.00 ～ 9.00 9.00～ 10.00 10.00～ 11.00 11.00～ 12.00 12.00～ 13.00 13.00～ 14.00 14.00～ 15.00 15.00～ 20.00 20.00～ 30.00 30 .00～ 40.00 40.00～ 50.00 50.00～ 60.00 60.00～ 70.00 70.00～ 72.00 72.00～ 73.00 73.00～ 74.00
2.59 4.19 6.51 5.22 12.06 6.20 7.03 6.26 6.85 2.84 3.51 0.64 0.00 0.72 2.77 4.09 4.75 1.99 3.38 2.16 1.92 4.61 6.17 3.57
注 :中位径 7 .97 μm 最大粒径 24.81 μm
P
<0.051) >0.051) >0.051) <0.011)
2.3 供试品对小鼠出血时间的影响 取体重(28 ±3)g 的成年雄性小鼠 , 随机分为 5
组 。 以上法相同剂量给小鼠灌胃 3 d , 每天 2 次 , 第 4 天给药 1 h 后 , 用剪尾法[ 2] 测定各组小鼠剪尾 5 m m 的出血时间 , 结果见表 4 。 实验表明 , 生水蛭水煎液 与对照组相比 , 虽有作用增强的趋势但无显著性差
累积频率
/ %
3.30 8.00 12.93 18.32 23.59 28.30 33.70 39.49 44.99 49.22 53.08 53.80 53.80 54.58 57.73 68.31 88.50 89.63 90.65 96.84 99.89 100.00 100.00 100.00
近几年由于超微粉碎技术的发展 , 可达到使动 、 植物细胞 90 %以上破壁的细度 。 由于粒度的减小 , 也有利于改善药物的气味及服用口感 。鉴于水蛭经 炮制和超微粉碎后有无药效与应用方面的优势 , 未 见报道 , 笔者对此作了初步的实验研究 。 1 实验材料 1.1 供试药材
水蛭购自山东省立医院 , 经李定格 、李峰老师鉴 定为 蚂 蟥 (宽 体 金 线 蛭 Whit mania pigra Whitman)。
供试品对小鼠出血时间的影响组别剂量凝血时间mgg1min生理盐水1004795258生水蛭水煎剂10041028319005生水蛭普通散12021432708005生水蛭超微散12021542509001制水蛭超微散10021645455001示与ns组比较24供试品对小鼠体内抗栓作用的影响抗栓实验方法学研究认为在371的生理盐水中测定小鼠尾出血时间与鼠颈动脉旁路血栓形成法具有很好的平行性
(1.山东中医药大学 , 山东 济南 350014 ;2.中国药材公司 , 北京 100062 ; 3.山东省委医院 , 山东 济南 250001)
[ 摘要] 目的 :比较水蛭煎剂 、普通散剂的药效以及新 法炮制与超 微粉碎对 其药效的影 响 。 方法 :用 BT-1500 型离 心沉降式粒度分布仪测定了生 、制水蛭超微 散的粒 度 。 通过小 鼠抗凝 血 、抗血栓 作用 , 比较了 水蛭丝 水煎剂 、 1/ 2 煎剂剂量的普通散 、超微散 、制水蛭超微散 的药效 。 并对其安全 性进行了考 察 。 结果 :供试品 药效由 强到弱 为 制水 蛭超微散 、生水蛭超微散 、生水蛭散 、生水蛭 水煎剂 、对照 组 。 结论 :水蛭 经超微 粉碎 , 尤其是 新法炮 制后超 微 粉碎 , 可明显改善气味 、口感 , 提高药效 。
表 4 供试品对小鼠出血时间 的影响
组别
n
生理盐水
10
生水蛭水煎剂
10
生水蛭普通散
12
生水蛭超微散
12
制水蛭超微散
10
注 :1)示与 NS 组比较
剂量
/m g·g -1
0.4 0.4 0.2 0.2 0.2
出血时间 / min
7.95 ±2.58 10.28 ±3.19 14.32 ±7.08 15.42 ±5.09 16.45 ±4.55
表 3 供试品对小鼠凝血 时间的影响
组别
剂量 n / mg·g -1生理盐水 Nhomakorabea10
0.4
生水蛭水煎剂
13
0.4
生水蛭普通散
14
0.2
生水蛭超微散
13
0.2
制水蛭超微散
13
0.2
注 :1)示该组与上一组比较
凝血时间 / min
2.96 ±1.43 4.95 ±2.32 6.23 ±2.73 6.33 ±2.60 9.38 ±2.19
[ 收稿日期] 2000-11-11
1.2 供试品制备 水蛭丝 :原药材挑去杂质 , 擦净 , 盖湿纱布略润 后切 2 ～ 3 mm 细丝 。 在切制过程中发现 , 部分药材 中间填充有白色结晶性粉末 , 口尝无咸 、涩味 , 初步 印象为石膏 , 切丝晾干后过筛可大部脱落 。 经紫外 灯照射 45 min 后密闭备用 。
累积频率
/ %
2.59 6.77 13.28 18.50 30.56 36.75 43.79 50.05 56.89 59.73 63.24 63.88 63.88 64.60 67.37 71.46 76.21 78.20 81.58 83.74 85.66 90.27 96.43 100.00
第 26 卷第 4 期 2001 年 4 月
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中药杂志
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Medica
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异 , 而普通散剂组呈显著性差异 , 两种超微散均为极 显著性差异 , 制超微散更优 。
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μm 。 生 、制水蛭超微散的粒度经 BT-1500 型离心沉 降式粒度分布仪测定 , 结果见表 1 、表 2 。 实验表明 , 生 、制水蛭经 BFM-6 型倍力微粉机粉 碎 , 可使其中 位径分别达到 10 .24 μm 和 7 .97 μm ;最大粒径分别 为 72 μm 和 24 .81 μm ;50 %的粒度 在 10 μm 和 8 μm 以下 , 90 %的粒度在 50 μm 和 23 μm 以下 , 确能 达到超微的效果 , 而且经新法炮制后更利于粉碎 , 其 粒度明显小于生水蛭 。
测定各组小鼠的凝血时间 , 经 t 检验统计分析 , 结果 见表 3 。 实验表明 , 水蛭煎剂与水蛭散剂均有确切
的抗凝活性 。1/ 2 剂 量的散剂 , 其抗凝效 果优于汤
· 242 ·
剂 。 超微散的抗凝活性有优于普通散的趋势 , 制水 蛭超微散又明显优于生水蛭超微散 。 提示水蛭用新 法炮制和超微粉碎后有利于增强其抗凝活性 。
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炮制与超微粉碎对水蛭药效 影响的初步实验研究
吕文海1 , 邱福军2 , 王作明3
昆明种小 鼠(山东 中 医药 大 学动 物 房提 供); BFM-6 型倍力微粉机 ;BT-1500 型离心沉降式粒度 分布仪 。 2 实验方法与结果 2.1 水蛭超微散粒度的测定
按《药典》规定 , 水蛭普通散的粒度为(150 ±6) · 241 ·
第 26 卷第 4 期 2001 年 4 月
生水蛭水煎液 :净水蛭丝 2.6 g , 加 10 倍量水浸 泡 30 min , 微沸 30 min , 过滤 , 药渣加 8 倍量水 , 微沸 30 min , 过滤 , 合并滤液 , 定容 100 ml , 浓度为 26 mg· ml-1 。
生水蛭普通散 :净水蛭丝经粉碎研磨过 100 目 筛。