蓝白斑法筛选 海南师范大学

蓝白斑法筛选
取分离纯化后的菌株斜面，分别接种到限磷和过磷的葡萄糖-MOPS 培养基平板中,28℃培养36h-48h，观测蓝白斑的生长情况。

同时在两种培养基上都产
生蓝斑的菌落初步定为聚磷菌。

苏丹黑染色法
将在限磷和过磷葡萄糖-MOPS 培养基上都产生蓝斑的菌株,接种到驯化培养
基上,厌氧培养16h。

取干净载玻片上一个,滴一滴无菌水,挑取细菌涂于水滴,固
定,用3%的苏丹黑乙醇染IOmin,用水冲去染液后再用滤纸将残水吸干。

用二甲苯
冲洗涂片至无色素洗脱,再用质量浓度为0.5%的番红水溶液复染1 至2min,用水
冲洗，吸干,备油镜镜检。

蓝白斑法筛选
将经过分离出的单菌株，接种在过磷葡萄糖-MOPS 培养基平板和限磷葡萄糖-MOPS 培养基平板上，在28℃下培养36-48h，注意观察蓝白斑的生长状况，最后在过磷和限磷培养基上都有蓝斑产生的菌株，可以初步定为有聚磷能力的菌株。

PHB染色法
经过蓝白斑法的筛选，将筛选出的菌株，接种到驯化培养基上，28℃厌氧培养16h。

接着，取洁净的载玻片，在载玻片上滴一滴无菌水，挑取一株菌落涂布在无菌水上，风干固定，用配置好的苏丹黑染液染色10min，用清水缓慢冲去染液后，用二甲苯洗脱涂片直至无色素被冲洗下来，最后用番红水溶液复染3min，清水缓慢冲洗，风干，油镜镜检。