标准曲线制备

第一种方法
1.仪器和材料
仪器: 722 型分光光度计( 上海) , 容量瓶( 25mL) , 吸量管( 5mL , 1mL) 。

材料: 2mo l/L NaOH , 4mol/L H Cl, 10%FeCl3 , 7%盐酸羟胺乙醇液; 0. 5 g / L乙酰水杨酸标准溶液; 阿司匹林样品溶液( 配制成20 片/L 水溶液) 。

2方法和结果
阿司匹林肠溶片的主要成分为乙酰水杨酸,分子中酯基在碱性溶液中可与羟胺反应生成羟肟酸;后者在酸性条件下与三氯化铁形成酒红色的羟肟酸铁,最大吸收波长为520nm,在一定浓度范围内,吸光度呈线性关系,可测出阿司匹林溶胶中乙酰水杨酸的含量。

乙酰水杨酸溶解度1g溶于100ml水中37度
1g溶于300ml水中25度下
2•1标准溶液系列和样品溶液的配制
0.5克每升乙酰水杨酸标准溶液；称取乙酰水杨酸0.005g溶于10ml蒸馏水中阿司匹林溶胶样品液；将果胶浸润于100ml 0.01gmL-1乙酰水杨酸液中静置一天烘干在37度下100ml水中震荡5分钟取样1ml稀释到25ml
分别取0.5g•L-1乙酰水杨酸标准溶液0.00mL(空白溶
液),0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL和阿司匹林溶胶样品溶液1.00mL置于
25mL容量瓶中,分别加入7%盐酸羟胺乙醇液1.00mL,2 mol•L-1NaOH 1.00mL,放置3分钟,再分别加入4 mol•L-1HCl和10%FeCl3各1.00mL,加水至刻度,摇匀得到空白液，20μl/ml，40μl/ml，60μl/ml,80μl/ml ,40μl/ml的标准溶液和样品液。

2•2标准曲线的绘制
标准溶液系列和样品溶液放置10分钟后,用空白溶液做对照,在520nm处测定吸光度。

以吸光度为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标作图,绘制出标准曲线表1。

第二种方法
三、仪器和试剂
1.仪器 UV-2550紫外-可见分光光度计、容量瓶10ml 、50ml。

2阿司匹林标准品1.008mg/ml、阿司匹林样品40mg/片、
乙酰水杨酸标准品配置称取5.04mg溶于5ml蒸馏水中。

阿司匹林样品配置称取40mg阿斯品林与2g果胶在10ml蒸馏水中溶解
四、实验步骤
1. 样品溶液、标准溶液的配置：
标准溶液的配置：取6个10ml容量瓶，标号1~6。

使用微量进样器精密吸取阿司匹林标准品0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml注入各个容量瓶，蒸馏水定容。

配置成约40μl/ml、60μl/ml、80μl/ml、100μl/ml、120μl/ml的标准溶液，备用。

样品溶液的配置：取溶胶阿司匹林研细，加入无水乙醇1~2ml分次研磨，使溶解。

利用滤膜过滤后转入50ml容量瓶中，充分振摇，蒸馏水定容（浓度：800μl/ml）。

取1ml定容后的样品溶液，转入10ml容量瓶，蒸馏水定容。

配置成约为80μl/ml的样品溶液。

2. 波长选择
使用紫外-可见分光光度计，先用蒸馏水进行基线校正。

用阿司匹林标准品3进行光谱测量。

将扫描波长范围定在200-400nm，分别找出两者的最大吸收峰。

阿司匹林标准品在处有最大吸收峰
3. 标准曲线的制备
基线校正后，利用波长测量。

以蒸馏水为空白，在nm记录阿司匹林标准品的吸光度，A。

以浓度C对 A作图，画出标准曲线。