甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)快速繁殖株不同代次全基因序列比较

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)快速繁殖株不同代次全基因序列
比较
胡凝珠;胡云章;施海晶;瞿素;邵聪文;刘国栋
【期刊名称】《中国生物化学与分子生物学报》
【年(卷),期】2001(17)5
【摘要】为探索甲型肝炎减毒活疫苗 (H2株 )细胞适应的分子机制 ,将甲型肝炎减毒活疫苗毒株(HAVH2K7)在人胚肺二倍体细胞KMB17上快速连续系列传代增强适应 ,繁殖周期由原来的 2 8d缩短为 14d ,连续传代后抗原滴度和感染性滴度不断增加 ,传至 2 2代抗原滴度达1∶10 2 4 ,感染性滴度lgCCID50 (每ml)为 7 83 .分别将第 6代和第 2 2代病毒用AC PCR法和PCR法扩增 .扩增片段分别与pGEM T载体连接得到重组质粒 ,测定cDNA插入片段的序列 .对 2个不同代次全基因序列及氨基酸序列比较分析表明 ,HAVH2K7适应至第 6代时 ,整个基因组有 6个核苷酸变异 ,全部位于编码区内 ,变异率为 0 0 7% ,导致 3个氨基酸变化 ,分别位于VP2 (A S) ;2C(N H) ;3A(R C) .适应至第 2 2代时 ,整个基因组出现 18个核苷酸突变 ,变异率为 0 2 4 % ,13个是该代次产生的 ,变异最大区域5′端非编码区(5′UTR)有 5个核苷酸变异 .编码区突变导致 7个氨基酸变化 ,其中 4个氨基酸变化是该代次在 6代基础上特有的变异 (2C ,Q P ;3A ,A S ;3C ,T A ;3D ,V G) .2C区是编码区变异最多区域 ,共有 4个核苷酸突变 ,在 6代变异基础上出现 3个新突变 ,导致 1个氨基酸变异 .说明5′UTR的2C区变异对病毒的翻译效率、感染性滴度提高具有重要作用 .
【总页数】6页(P541-546)
【关键词】甲型肝炎病毒;减毒活疫苗H2株;细胞适应;全基因序列分析;快速繁殖;代次
【作者】胡凝珠;胡云章;施海晶;瞿素;邵聪文;刘国栋
【作者单位】中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R512.61;R373.21
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