实验十四物理和化学因素对微生物的影响

实验报告
请比较不同化学药剂对表皮葡萄球菌的致死能力，并 将结果填入下表。
表1 不同化学药物对表皮葡萄球菌的致死能力
药剂
抑菌圈直径(mm)
2.5% 碘酒
0.05% 龙胆紫
0.5% 84 消毒液
0.25% 新洁尔灭
1、倒平板
1、倒平板
将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
2、接种
实验十三 物理化学因素对微生物的
影响
目的要求
? 了解不同物理因素对微生物生 长的影响及其实验方法。
? 了解常用化学药剂对微生物的 作用原理及其实验方法；
基本原理
? 温度是影响微生物生长与存活的重要因素之一。当微生物处 于最适生长温度时，其生长速度最快；不适宜的温度可以导 致细菌形态和代谢的改变或使微生物的蛋白质凝固变性而导 致菌体死亡。
每毫升菌液中总活菌数 ? 同一稀释浓度 3次重复的菌落平均数 ? 稀释倍数 ? 5
实验步骤
1、倒平板 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
2、接种 用无菌移液管取0.2ml 表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂 布棒涂布均匀。
3、加黑纸 打开皿盖，用无菌黑纸遮住部分平板。
4、紫外线照射 置紫外线灯下照射 30分钟（打开皿盖），灯与培养皿距离约 30～40cm 。照射完毕，盖上皿盖。
? 根据微生物对氧的要求不同可将微生物分为专性好氧菌、兼 性厌氧菌、微好氧菌、耐氧菌和专性厌氧菌五种类型。
? 紫外线对微生物生长的影响随照射剂量、时间和照射距离的 变化而不同，剂量大、时间长、距离短时易杀死微生物；剂 量小、时间短、距离长时就会有少量个体残存下来，某些个 体会发生变异。
O2对微生物的影响
化学药剂对微生物的影响
实验器材
? 活材料：表皮葡萄球菌悬液； ? 化学药剂：①2.5%碘酒， ②0.05%龙胆紫，
③0.5% 84消毒液，④0.25%新洁尔灭； ? 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基；
? 器材：无菌培养皿，无菌黑纸，紫外灯，
滤纸片，移液器，镊子，记号笔，酒精灯，火 柴，涂布棒，恒温培养箱
置紫外线灯下照射 30分钟（打开 用无菌镊子将圆形滤纸片分别浸入各种
皿 盖 ） ， 灯 与 培 养 皿 距 离 约 药液中，取出，除去多余药液后，以无
30～40cm 。照射完毕，盖上皿
菌操作将纸片对号放入培养皿的小区内。
盖。
5、培养
5、培养
置37 ℃恒温箱中培养24 小时。
置37℃温箱中培养24小时。
1好氧菌；2 厌氧菌；3 兼性厌氧/耐氧菌；4 微好氧菌
2、紫外线对微生物的影响
基本原理
? 常用化学消毒剂主要有重金属及其盐类、酚、 醇、醛等有机化合物以及碘、表面活性剂、有 机染料等。它们的杀菌或抑菌机制主要是使菌 体蛋白质变性，或者与酶的-SH结合而使酶失 去活性。
本实验是观察常用的化学消毒剂在一定浓 度下对微生物的抑菌或杀菌作用，从而了解它 们的抑菌或杀菌性能。
3、标记 将上述已接种的培养皿用记号笔在皿底划成 4等份，每一等份 内标明一种药物的名称。
4、加化学药剂 用无菌镊子将圆形滤纸片分别浸入各种药液中，取出，除去多 余药液后，以无菌操作将纸片对号放入培养皿的小区内。
5、培养 置37℃恒温箱中培养24小时。
6、观察 记录微生物生长情况并取出测定抑菌圈大小，比较几种化学 药剂的杀菌力强弱。
2、接种
用无菌移液管取0.2ml 表皮葡萄
用无菌移液管取0.2ml 表皮葡萄球菌菌
球菌菌液于平板上，并用涂布棒
液于平板上，并用涂布棒涂布均匀。
涂布均匀。
ห้องสมุดไป่ตู้
3、标记
3、加黑纸
将上述已接种的培养皿用记号笔在皿底
打开皿盖，用无菌黑纸遮住部分
划成4等份，每一等份内标明一种药物
平板。
的名称。
4、紫外线照射
4、加化学药剂
5、培养 置37℃温箱中培养24小时。
6、观察 观察并记录培养基平板上的表皮葡萄球菌生长情况。
每毫升菌液中总活菌数 ? 同一稀释浓度 3次重复的菌落平均数 ? 稀释倍数 ? 5
实验步骤
1、倒平板 将牛肉膏蛋白胨培养基制成平板。
2、接种 用无菌移液管取0.2ml 表皮葡萄球菌菌液于平板上，并用涂布 棒涂布均匀。
6、观察
6、观察
记录微生物生长情况并取出测定抑菌圈
观察并记录培养基平板上的四连
大小，比较几种化学药剂的杀菌力强弱。
球菌生长情况。