用基因免疫方法制备小鼠抗人OAT1多克隆抗体

用基因免疫方法制备小鼠抗人OAT1多克隆抗体
许国双;刘安
【期刊名称】《医学临床研究》
【年(卷),期】2007(024)005
【摘要】[目的]用基因免疫方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白1(hOAT1)多克隆抗体.[方法]提取人肾组织总RNA,用RT-PCR方法扩增hOAT1基因中免疫源性较强的细胞内亲水序列片段,克隆到载体pBQAP-TT中,鉴定正确后用基因枪与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-FIT3L同时免疫小鼠,12周后ELISA方法测定血清抗体滴度,鉴定抗体的特异性和定位表达.[结果]扩增出207 bp的hOAT1细胞内亲水序列片段,构建的基因免疫载体经酶切及序列分析鉴定正确.Western blot结果显示小鼠抗hOAT1多克隆抗体识别人肾皮质膜蛋白55 kD的hOAT1.免疫组化结果提示hOAT1定位表达在人近端肾小管上皮细胞基底侧细胞膜.[结论]用基因免疫的方法可以成功制备高滴度和特异性抗hOAT1多克隆抗体.
【总页数】3页(P705-707)
【作者】许国双;刘安
【作者单位】第四军医大学西京医院,陕西,西安,710032;西安市儿童医院,陕西,西安,710003
【正文语种】中文
【中图分类】R394.2
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