激光粒度仪测定盐酸吗啡粒度分布的应用研究

·药物检验与分析·
激光粒度仪测定盐酸吗啡粒度分布的应用研究
徐　登１，２（１ 重庆市食品药品检验检测研究院，重庆４０１１２１；２ 国家药品监督管理局麻醉精神药品质量监测
重点实验室，重庆４０１１２１）
摘要：目的　建立激光粒度仪测定盐酸吗啡原料药粒度分布的方法。

方法　使用马尔文２０００激光粒度仪，以干法测定，分散气压为３ ０ｂａｒ，
振动进样速度为７
０％，进样时间为１０ｓ，折射率为１ ５２。

结果　３批样品粒度分布特征值Ｄ（０ １）在１ ３３０～１ ９１８μｍ范围，Ｄ（０ ５）在４ ４１８～５ １５４μｍ范围，Ｄ（０ ９）在１０ ６４１～１２ ８４７μｍ范围。

结论　本方法简便、快速、重现性好，适用于盐酸吗啡原料药的粒度测定。

关键词：盐酸吗啡；激光粒度仪；粒度及粒度分布
中图分类号：Ｒ９２７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６ ３７６５（２０２１） ０２ ００５３ ０３
作者简介：徐　登，男（１９９１－）。

毕业于重庆大学。

职称：工程师。

研究方向：药物质量控制。

基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目（２０１７ＺＸ０９１０１００１００６ ００２）
ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＬａｓｅｒＰａｒｔｉｃｌｅＡｎａｌｙｚｅｒｔｏＤｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅＰａｒｔｉｃｌｅＳｉｚｅＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＭｏｒｐｈｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ
ＸＵＤｅｎｇ１，２（１ ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０１１２１，Ｃｈｉｎａ；２ ＮＭＰＡＫｅｙＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＱｕａｌｉｔｙＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆＡｎａｅｓｔｈｅｔｉｃａｎｄＰｓｙｃｈｏｔｒｏｐｉｃＳｕｂｓｔａｎｃｅｓ
，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０１１２１，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｍｏｒ
ｐｈｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ＭＥＴＨＯＤＳ　ＴｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｌａｓｅｒｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎｕｓｉｎｇａＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００ｅｑｕｉｐｐｅｄｗｉｔｈａＳｃｉｒｏｃｃｏ２０００ｄｒｙｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｕｎｉｔ Ｔｈｅｔｅｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅａｉｒｐｒｅｓｓｕｒｅｗａｓ３ ０ｂａｒ；ｔｈｅｆｅｅｄｒａｔｅｗａｓ７０％；ｔｈｅｓａｍｐｌｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｔｉｍｅｗａｓ１０ｓ；ｔｈｅｒｅｆｒａｃｔｉｖｅｉｎｄｅｘｏｆｔｈｅｏｐｔｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗａｓ１ ５２ ＲＥＳＵＬＴＳ　ＴｈｅＤ（０ １）ｒａｎｇｅｏｆ３ｂａｔｃｈｅｓｏｆｍｏｒｐｈｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｗａｓ１ ３３０ １ ９１８μｍ，ｔｈｅＤ（０ ５）ｒａｎｇｅｗａｓ４ ４１８ ５ １５４μｍａｎｄｔｈｅＤ（０ ９）ｒａｎｇｅｗａｓ１０ ６４１ １２ ８４７μｍ ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｗｈｉｃｈｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｃｏｎｔｒｏｌｏｆａｃｔｉｖｅｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｏｆｍｏｒｐｈｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ＫＥＹＷＯＲＤＳ：ＭｏｒｐｈｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；ＬａｓｅｒＰａｒｔｉｃｌｅａｎａｌｙｚｅｒ；Ｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ
对于口服固体制剂，其原料药的颗粒特性可能会对制剂的性能产生显著影响，如溶解度、生物利用度、含量均匀度、稳
定性等〔１〕。

盐酸吗啡缓释片是一种强效镇痛药，主要用于帮
助癌症晚期患者缓解疼痛，提高病人生存质量，在临床上有着重要作用。

为了更好地控制盐酸吗啡缓释片的溶出行为及批次间的一致性，提高药品质量，测定盐酸吗啡原料药的粒度具有一定意义。

激光粒度仪是基于光散射原理从而测量颗粒的尺寸及其分布，由于其具有方便、快捷、准确、重现性好等特点，近年来被广泛应用于原料药、辅料的粒度测定
〔２，３〕。

根据《中国药
典》２０１５年版四部通则０９８２粒度和粒度分布测定法〔４〕
和
ＵＳＰ＜４２９＞〔５〕
的要求，本文建立了盐酸吗啡原料药的粒度和
粒度分布的测定方法，按照相关指导原则进行了方法学验证。

１　仪器与试药
Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００激光粒度仪、Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ２０００版分析软件（英国Ｍａｌｖｅｒｎ公司）；盐酸吗啡样品均为厂家提供。

２　测定方法的优化
２ １　干法、湿法的选择　由于盐酸吗啡在水中溶解，在乙醇中略溶，不适合用湿法，因此选择干法测定。

２ ２　计算结果模型的选择　对于Ｍａｓｔｅｒｓｉｚａｅｒ２０００分析软件，当样品粒度分布较窄时适用于单峰模型，而盐酸吗啡原料药的粒度分布较宽，采用单峰模型时存在失真，所以选择通用计算模型。

２ ３　分散气压的选择　一般来说，粒度较小的颗粒，其分散状态是决定测量结果的关键因素。

对于原料药而言，分散气压可能会对结果产生最大影响。

因此，首先考察分散气压。

固定振动进样速度７０％，进样时间１０ｓ，折射率１ ５２，取
ＳｔｒａｉｔＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ３３Ｎｏ ２２０２１
供试品约０ １ｇ，分别考察１ ０ｂａｒ、１ ５ｂａｒ、２ ０ｂａｒ、２ ５ｂａｒ、３ ０ｂａｒ、３ ５ｂａｒ、４ ０ｂａｒ不同分散气压对样品分散和测定结果的影响，连续测定６次，取平均值，以分散气压为横坐标，粒度为纵坐标作图（见图１
）。

结果表明，粒度分布特征值的测定结果随着分散压力的增大逐渐减小，这是因为分散气压的增大，使得样品聚集程度降低，因此测定结果变小；当分散气压为２ ５ｂａｒ到３ ５ｂａｒ之间时，测定结果变化较小，这是因为分散气压足够大后，样品几乎完全分散，分散状态稳定；当气压增大到４ ０ｂａｒ，测定结果又急剧减小，这可能是因为压力过大导致样品破碎。

综合考虑，分散气压选择３ ０ｂａｒ。

图１　分散气压对粒度测定结果的影响
２ ４　其他参数的选择　《中国药典》２０１５年版四部通则０９８２粒度和粒度分布测定法
〔４〕
规定，干法测定结果的遮光度通常
应在０
５％～５ ０％范围内；ＵＳＰ＜４２９＞〔５〕
要求粒度分布的中心值Ｄ（０ ５）的相对标准偏差（ＲＳＤ）应小于１０％，Ｄ（０ １）和Ｄ（０ ９）的ＲＳＤ不得过１５％，而当Ｄ（０ ５）小于１０μｍ时，粒度分布特征值的ＲＳＤ的最大允许值可放宽一倍。

根据以上要求，分析２ ３的测定数据发现，振动进样速度、进样时间、折射率和样品量等参数设置为常规值时（即２ ３的设定值），当分散气压足够大，测定结果的遮光度和ＲＳＤ均符合要求，因此不再多做考察。

即本研究测定盐酸吗啡粒度及粒度分布的方法参数为：取本品约０ １ｇ，在分散气压为３ ０ｂａｒ，振动进样速度为７０％，进样时间为１０ｓ，折射率为１ ５２的实验条件下测定。

３　检验方法的验证
３ １　耐用性实验　分别对振动进样速度、进样时间、折射率和样品量等参数进行耐用性考察。

按照２ ４确定的方法，只改变考察的参数，连续测定６次取平均值（见图２），以相关参数为横坐标，粒度为纵坐标作图。

结果表明振动进样速度在６０％～８０％范围内，进样时间在８～１２ｓ范围内，折射率在１ ４４～１ ６０范围内，样品量在０ ０８～０ １２ｇ范围内结果差异较小。

综合２ ３的结果表明，实验参数条件变化对结果影响较小，方法耐用性好。

３ ２　中间精密度　为了考察方法的中间精密度，由Ａ、Ｂ两位不同检验员在不同时间按照２ ４确定的方法对样品进行测定（见表１），结果表明，Ｄ（０ １）、Ｄ（０ ５）、Ｄ（０ ９）的ＲＳＤ值均小于１０％，遮光度亦均符合要求，说明本方法中间精密度良
好。

图２　耐用性实验
ａ 振动进样速度；ｂ 进样时间；ｃ 折射率；ｄ 样品量对测定结果的影响
表１　中间精密度实验结果实验者
测定次数
粒度（μ
ｍ）Ｄ（０ １）Ｄ（０ ５）Ｄ（０ ９）遮光度
（％）Ａ
１１ １９５４ １２５９ ４６１１ ８４２１ ２５６４ ２９６１０ ２４２１ ５７３１ ２５３４ ３２０１０ １６８１ ７４４１ ２６７４ ３４３１０ ８２８１ ５１５１ ２０８４ ２４２９ ８７８１ ８７６１ ３３０４ ５６１１１ １１５１ ７１平均１ ２５２４ ３１４１０ ２８２１ ７１ＲＳＤ（％）
３ ８３３ ３３５ ９１－－Ｂ
１１ ３７３４ ６４２１１ ６４８１ ６０２１ ２３３４ １８６９ ５２３２ ０４３１ ４２４４ ８０７１１ ８５９１ ３２４１ ２６７４ ３３３１０ ０７４１ ２９５１ ４９９４ ７８８１１ ７３４１ ３９６１ ２９９４ ５５５１０ ９９８１ ７３平均１ ３４９４ ５５２１０ ９７３１ ５６ＲＳＤ（％）７ ５１５ ４８８ ８７－－１２份平均值１ ３００４ ４３３１０ ６２７１ ６３１２份ＲＳＤ（％）
７ ０１
５ １９
８ ０３
－－
４　样品测定
取本品约０ １ｇ，在分散气压３ ０ｂａｒ，振动进样速度７０％，进样时间１０ｓ，折射率１ ５２的实验条件下，对３批样品进行测定，每批样品平行测定３次，取平均值，粒度分布曲线图（见图３
），测定结果（见表２）。

表２　样品粒度分布测定结果　（ｎ＝３）
样品批号平均粒度／μ
ｍＤ（０ １）Ｄ（０ ５）Ｄ（０ ９）遮光度（％）
２０１８０５０１１ ３３０４ ４１８１０ ６４１１ ７１２０１８０５０２１ ９１８５ １５４１２ ８４７１ ２７２０１８０５０３
１ ３５９
４ ５７９
１１ ６４８
１ １８
海峡药学　２
０２１年　第３３卷第２期
图３　３批样品的粒度分布曲线图
５　讨论
《中国药典》２０１５年版收载的颗粒粒度及粒度分布测定
方法有显微镜法、筛分法和光散射法〔４〕。

马尔文激光粒度测
量法作为光散射法的代表，具有简便、快速、准确、重现性好等优点，是粒度及粒度分布分析测试的重要手段之一。

虽然其不如显微镜法、筛分法等直观，但是马尔文激光粒度测量法具有测量范围宽，不易受人为因素（制样、计数方式等）影响等优势。

此外，马尔文激光粒度分析仪是基于米氏散射理论，米氏理论可以正确地预计在不同角度下、不同波长光线对已知
大小颗粒的散射光强〔６〕。

有研究者对马尔文激光粒度分析
仪的测量结果与显微镜法进行了比较，结果表明，两种测量方法得到的结果没有显著差异
〔３，７〕。

近年来，随着仿制药一致性评价工作如火如荼地进行，业内人士对原料药、药用辅料的功能性指标越来越重视〔８ １０〕。

本文从粒度与粒度分布的角度，建立了适宜的测定方法，能够对盐酸吗啡的粒度这一功能性指标进行控制，对相关制剂的生产具有一定指导作用。

参考文献
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粒度分布测定法〔Ｓ〕 北京：中国医药科技出版社，２０１５，１３２ １３４ 〔５〕ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＰｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌＣｏｎｖｅｎｔｉｏｎ ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＰｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ
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龙鶪叶药材ＵＰＬＣ指纹图谱及主成分分析研究
索彩仙，孙冬梅，吴文平，邱韵静，曹斯琼，李国卫（广东一方制药有限公司，广东佛山５２８２４４）
摘要：目的　建立龙鶪叶药材ＵＰＬＣ指纹图谱的分析方法，为该药材的质量控制与资源开发提供参考。

方法　采用ＵＰＬＣ方法，以ＡｇｉｌｅｎｔＳＢ
Ｃ１８
柱（１５０ｍｍ×２ １ｍｍ，１ ８μｍ）为色谱柱，以甲醇（Ａ） ０ ４％磷酸（Ｂ）为流动相，流速０ ３０ｍＬ·ｍｉｎ－１
，柱温３０℃，检测波长为３４９ｎｍ，采用ＳＰＳＳ软件对数据进行分析。

结果　建立了龙鶪叶药材的ＵＰＬＣ指纹图谱，检出共有峰８个，指认了２个共有峰，通过主成分分析得知不同产地的样品质量存在差异性。

结论　建立的ＵＰＬＣ指纹图谱较全面地反映了龙鶪叶药材的化学成分，分析方法准确可靠、重复性好，采用主成分分析对龙鶪叶药材质量作出综合评价，为有效地控制龙鶪叶药材的质量提供了新的评价方法和参考依据。

关键词：龙鶪叶；ＵＰＬＣ指纹图谱；山柰酚 ３ Ｏ 龙胆二糖苷；主成分分析
中图分类号：Ｒ９２７　文献标识码：Ａ　文章编号：１００６ ３７６５（２０２１） ０２ ００５５ ０５
作者简介：索彩仙，女（１９９４－）。

主要从事中药配方颗粒质量标准研究。

通讯作者：李国卫，男（１９８９－）。

主要从事中药配方颗粒质量标准研究。

基金项目：广东省“特支人才计划”科技创业领军人才项目（广东省科技厅（２０１７ＴＹ０４Ｒ１９７），广东省中药配方颗粒工程实验室建设项目（广东省发改委（粤发改会创新函〔２０１８〕３１４９号）
ＳｔｕｄｙｏｎＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＳａｕｒｏｐｉｆｏｌｉｕｍｂｙＵＰＬＣａｎｄＰｒｉｎｃｉｐａｌＣｏｍｐｏｎｅｎｔＡｎａｌｙｓｉｓ
ＳｔｒａｉｔＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ３３Ｎｏ ２２０２１。