冠心病慢性心力衰竭患者血浆白介素-10和转化生长因子-β1的研究

冠心病慢性心力衰竭患者血浆白介素-10和转化生长因子-β1
的研究
王欢;胡元会;孟昊;贾秋蕾;褚瑜光
【摘要】目的评价血浆白介素-10(IL-10)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在冠心病慢性心力衰竭(CHF)过程中的变化和意义.方法选择2013年8月至2014年2月中国中医科学院广安门医院心内科住院患者125例,其中慢性心力衰竭患者93例,非心力衰竭患者32例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆IL-10和TGF-β1水平.结果冠心病CHF组血浆TGF-β1为(219.99±136.70)pg/ml,低于非心力衰竭组的(646.57±248.06)pg/ml,而血浆IL-10为(7.88±3.79)pg/ml,高于冠心病非心衰组的(3.10± 1.92)pg/ml,且两组比较差异均具有统计学意义.结论 IL-10和TGF-β1水平与心衰严重程度密切相关,可作为评价心衰严重程度的指标之一.
【期刊名称】《中国心血管病研究》
【年(卷),期】2015(013)002
【总页数】5页(P129-133)
【关键词】冠状动脉疾病;慢性心力衰竭;白介素-10;转化生长因子-β1
【作者】王欢;胡元会;孟昊;贾秋蕾;褚瑜光
【作者单位】100053 北京市,中国中医科学院广安门医院心内科;100053 北京市,中国中医科学院广安门医院心内科;北京中医药大学;北京中医药大学;100053 北京市,中国中医科学院广安门医院心内科
【正文语种】中文
【中图分类】R541.4
慢性心力衰竭（CHF）是各种心脏疾病发展至终末状态的一种综合征[1]。

神经-内分泌-细胞因子网络在CHF发展过程中起到了非常重要的作用。

研究[2]证实，在CHF发展过程中，高水平的促炎性细胞因子转化生长因子-β1（TGF-β1）和白介
素-6（IL-6）可降低心肌收缩力，促进心肌细胞凋亡。

而关于抗炎性细胞因子白介素-10（IL-10）和TGF-β1的研究较少。

本研究通过测定CHF患者血浆IL-10和TGF-β1水平，了解其在CHF发展过程中的变化情况。

1.1 研究对象选择2013年8月至2014年2月间中国中医科学院广安门医院心内科住院患者125例，其中慢性心力衰竭患者（CHF组）93例，男性 45 例，女性48 例，平均年龄（71．09±3．97）岁，NYHAⅡ级25例、Ⅲ级35例、Ⅳ级33例；非心力衰竭患者（非CHF组）32例，其中男性14例，女性18例，平均年
龄（67．90±4．43）岁，心功能 NYHA 均为Ⅰ级。

1.2 诊断标准冠心病诊断标准：参照1979年国际心脏病学会和协会及卫生组织临床命名标准化联合专题组颁布的《缺血性心脏病的命名及诊断标准》[3,4]，并结
合冠状动脉造影结果。

冠状动脉造影采用标准Judkins法，1支或以上冠状动脉直径狭窄≥50%判断为阳性[5]或既往有心梗病史。

慢性心力衰竭诊断采用Framingham心力衰竭诊断标准[6]，参考2009年美国心脏病学会（ACC）及美国心脏协会（AHA）关于《成人慢性收缩性心力衰竭治疗
指南》[7]，参考彩色多普勒超声心动图，左室射血分数（LVEF）＜50%[8]。

心功能分级参照1994年纽约心脏病学会（NYHA）分级标准[9]。

冠心病慢性心力衰竭患者纳入标准：①符合冠心病和慢性心力衰竭诊断标准；②年龄50～75岁；③自愿参加试验并签署知情同意书。

完全符合上述三项条件选择纳入本研究。

冠心病非心力衰竭患者纳入标准：①符合冠心病诊断标准，心功能Ⅰ级；
②年龄50～75岁；③自愿参加试验并签署知情同意书。

完全符合上述三项条件选
择纳入本研究。

排除标准：⑴临床相关资料不完整；⑵瓣膜性心脏病患者（风湿性心脏病、老年退行性心脏瓣膜病、肺心病）；⑶严重心律失常患者（频发室性早搏、Ⅱ度Ⅱ型房室传导阻滞、Ⅲ度房室传导阻滞）；⑷近3个月内发生过不稳定型心绞痛或急性心肌梗死的患者；⑸恶性肿瘤患者；⑹自身免疫性疾病患者；⑺严重肝、肾功能不全者；⑻合并重度高血压患者［收缩压≥160 mm Hg（1 mm Hg=0．133 kPa）和（或）舒张压≥100 mm Hg]；⑼糖尿病及内分泌疾病患者；⑽急性、慢性感染或发热患者；⑾近3个月服用过影响免疫反应的中、西药物患者；⑿精神疾病或行为不能自负者；⒀妊娠或哺乳期者；⒁不愿参加试验的患者。

凡符合上述项目中任意一项者即予以排除。

剔除标准：①无法判断疗效或资料不全影响疗效判断者；②中途自动退出者。

凡符合上述两项中的任意一项即予以排除。

1.3 研究方法患者于入院禁食12 h后，第2天清晨采集静脉血2 ml，置于EDTA 试管内，室温静置30 min后，以3000 r/min离心10 min，分离后的血浆置于-80℃超低温冰箱冷冻保存待检。

血浆IL-10水平检测：严格按照试剂操作说明书检测，以标准品浓度由低到高自左至右作为横坐标X轴，450 nm下读取的各检测孔OD值作为纵坐标Y轴，绘制出标准曲线图（图1）；分别计算出各标准品孔及待测样本孔的OD值。

血浆TGF-β1水平检测：严格按照试剂操作说明书检测，以标准品浓度由低到高自左至右作为横坐标X轴，450 nm下读取的各检测孔OD值作为纵坐标Y轴，绘制出标准曲线图（图2）；分别计算出各标准品孔及待测样本孔的OD值。

1.4 统计学方法数据统计采用盲法，由第3方人员统计。

所有试验数据录入计算机，采用SPSS 20．0统计软件进行统计。

计量资料以±s表示，若数据满足正态性检验和满足方差齐性检验，使用t检验或单因素的方差分析。

计数资料以百分比
（%）表示，比较使用卡方检验；相关性分析使用Spearmen相关性检验。

P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 一般资料本研究共纳入患者125例，CHF组患者93例，非CHF组患者32例。

经检验，两组在年龄、性别比例，NYHA心功能分级组间年龄、性别比例方
面比较未见统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

见表1、2。

2.2 两组患者血浆IL-10和TGF-β1水平比较经独立样本t检验，CHF组与非CHF组血浆IL-10水平分别为（7.88±
3.79）pg/ml和（3.10±1.92）pg/ml，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；TGF-β1 水平CHF 组为
（219.99±136.70）pg/ml，非 CHF 组为（646.57±248.06）pg/ml，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。

CHF组血浆IL-10高于非CHF组，而血浆TGF-β1低于冠心病非CHF组。

2.3 NYHA不同心功能分级患者血浆IL-10水平比较经多因素方差分析（ANOVA），F=2.619，P＜0.05，可以认为血浆IL-10水平在NYHA心功能分
级组间不全相同。

根据均值的比较，四组血浆IL-10水平由高到低依次为
NYHAⅣ、NYHAⅢ、NYHAⅡ、NYHAⅠ。

见表3。

由NYHA心功能分级与血浆IL-10水平的相关性检验得Spearman r=0.189，P＞0.05，尚不能提示血浆IL-10水平随NYHA分级增高而升高。

2.4 NYHA不同心功能分级患者血浆TGF-β1水平比较经多因素方差分析（ANOVA），F=1
3.823，P=0.000，可以认为血浆TGF-β1水平在NYHA心功
能分级组间不全相同。

根据均数的比较，四组血浆TGF-β1水平由高到低依次为NYHAⅠ、NYHAⅡ、NYHAⅢ、NYHAⅣ。

见表4。

由NYHA心功能分级与血浆TGF-β1水平的相关性检验得 Spearman r=-0.195，P>0.05，尚不能提示血浆TGF-β1水平随NYHA分级增高而降低。

IL-10是一种由160个氨基酸残基组成的蛋白质，是一种重要的负性调节细胞因子。

它可以抑制前炎症细胞因子如TNF、IL-6、IL-1等的产生，单核细胞及T细胞的活化，并能抑制巨噬、单核细胞产生NO[10]。

在CHF的进程中，IL-10因能下调多种心肌破坏性细胞因子而对心肌有保护作用[11]。

Stumpf等[12]研究发现，心力衰竭患者血清IL-10水平明显低于健康对照组，且与心力衰竭程度呈负相关。

同时，有学者[13,14]探讨IL-10与CHF关系时发现，CHF患者血清IL-10水平显著高于对照组，且随着心功能受损程度的加重而明显升高。

而邓元江等[15]应用液相芯片技术研究CHF患者血清细胞因子的变化，结果显示CHF患者与正常对照组相比，TNF-α和IL-6明显增加，而IL-10水平无明显变化，从而认为炎性细胞因子与抗炎性细胞因子的紊乱参与了CHF的发生和发展。

TGF-β是一种多功能细胞因子，调节细胞的增殖和分化，刺激多种细胞因子、炎症介质等活性物质的合成和分泌，参与胞外基质构成及降解，具有抑制和促进双重作用。

在哺乳动物中TGF-β1所占比例最高（>90%）、功能最多、活性最强、分布最广泛，已成为临床和实验研究的热点[16]。

苗梦露等[17]用可定性的免疫荧光染色法和可定量的Western blot法测定心衰大鼠心肌细胞内TGF-β1的表达，研究结果分别显示模型组大鼠心肌细胞TGF-β1表达高于假手术组。

于欣等[18]探索慢性心力衰竭与细胞因子变化的关系，将49例CHF患者与 30例健康者血清 TNF-α、IL-6、CRP和TGF-β1浓度比较，结果显示CHF患者TGF-β1水平明显低于健康对照组，与LVEF呈正相关，认为细胞因子浓度的变化可以作为评估CHF患者的参考指标。

上述研究显示，在慢性心衰过程中IL-10和TGF-β1水平研究尚不一致。

而本研究结果显示，冠心病慢性心力衰竭患者与非心力衰竭患者比较，CHF血浆IL-10水平明显高于非心力衰竭患者，且随心功能受损程度的增加而升高；而血浆TGF-β1水平明显低于非心力衰竭患者。

血浆IL-10水平的升高，提示抗炎性细胞因子的增
加对慢性心力衰竭患者心肌的保护作用增强，以抵消炎性细胞因子对心肌的损害，其在心衰的发展过程中起重要作用。

而TGF-β的生物学多效性决定了其细胞调节
功能的多面性[19]：炎症初期TGF-β具有免疫刺激作用，可募集炎症细胞和促进
前炎症因子生成，而在炎症消散期其免疫抑制活性表现更为突出，抑制T淋巴细
胞和B淋巴细胞的增殖与活化，抑制细胞因子的生成，诱导细胞因子拮抗剂的表
达及抑制免疫球蛋白的分泌等。

由于TGF-β1的双向作用，故在不同研究中，可能由于所选择人群的基础病变不同、病程不同等诸多原因的影响，从而造成研究结果的不一致。

在本研究中，CHF患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞低于非CHF患者，且随着NYHA心功能分级的增加，表明慢性心力衰竭患者体内存在免疫激活状态。

但在本研究中，血浆IL-10水平较对照组出现升高趋势，而TGF-β1则有下降趋势。

IL-10和TGF-β1同样都是免疫抑制因子，有抑制炎症反应的作用，两者水平却呈现相反现象，在CHF时TGF-β1水平降低，可能与TGF-β1分泌不足胜过TGF-β
的升高所致，同时由于其浓度降低，心肌保护作用减弱，相应地使炎性反应因子的心肌损伤作用增强，从而促进了CHF的发展。

在这个失衡中过度的炎症反应导致
炎性细胞因子的过度产生，这些上调炎性细胞因子通过多种机制抑制心肌收缩，调节心肌重构，包括引起心肌肥大、纤维化和凋亡，同时能引起内皮损害，导致外周血管损害[20]。

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