毛细管区带电泳分离血清蛋白质

血清蛋白的毛细管电泳分析

血清蛋白的毛细管电泳分析
周小棉
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1998(16)4
【摘要】采用毛细管电泳技术建立了血清蛋白毛细管自由区带电泳分析方法，并与醋酸纤维薄膜电泳法相比较。

利用ｐＨ９．８、１００ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸缓冲液作电泳缓冲液，未涂渍毛细管２１ｃｍ×５０μｍ（ｉ．ｄ），检测波长２００ｎｍ，当电压为０．５ｋＶ／ｃｍ时，在５分钟内可将血清蛋白分为五条蛋白区带。

利用ｐＨ８．５、２５ｍｍｏｌ／ＬＳＤＳ、２０ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸缓冲液作样品稀释液，未涂渍毛细管４５ｃｍ×５０μｍ（ｉ．ｄ），在电压２２．５ｋＶ条件下，可将血清蛋白分离１０条区带。

该方法稳定、重复性好。

【总页数】3页(P203-205)
【作者】周小棉
【作者单位】南方医院检验科;南方医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
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鸿丽;赵永强;刘煜;梁艳
4.Microtech 648 ISO型电泳分析仪测定血清蛋白的性能验证研究及应用 [J], 苗玉发;马犇;潘东升;刘芳;汪巨峰;李波
5.不同环境丰富度设置下猪血清蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究 [J], 席赫岐;史秀丽
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人血清蛋白的毛细管等速电泳分析

３蛋白．）４转铁蛋白（ｒ，５蛋白Ⅱ Ｐ）．（．Ｐ．Ｆ）．颍，６免疫球蛋白Ａ及Ｇ（Ａ＋ｇ，ＩｇＩＧ）
７免疫球蛋白Ｇ瘢ｇ）．疫球蛋白ＧⅡ Ｉ）Ｇ及８免（Ｇ。各组分的绝ｇ对值与相对值如表
１，典型一例组分图如图１。
健康男、女３例血清蛋白组分测定结果２表１
现分述如下：
１．原料管处理，理想的原料管是熔融氧化硅，它的纯度很高，成本也较高。目前
我用市售石英对原的洗有的法［］我是将好的们采的为熔融管。料管清不同方３。们选管
子先用自来水冲洗内外表面上的尘埃，然后用１％的盐酸溶液浸泡，经过２－６００２小时，
［］ＪｏｒｎｌｈｍｓＳｍｐｓＳｒｓ５，１５１８）２．Ｂｕｓ，Ａａ．Ｃｅｉｙｏｉｅｅ，ｔａｉ９（９０．
［３］Ｓ．Ｇ．Ｈｊｌｒｏ，Ａｐｌａｉｎｔ３０ＬａｍａｓｎｓｐｉｔｃｏＮｏｅ，ＫＢ１７０，９７．［４］Ｐ．Ｄｅｍｏｔ，Ａｎｌｌｔｅａ．ＣｈｍｉＳｙｏｉＳｒｓ２９１８）ｅｓｔｍｐｓａｅｉ５５（９０．ｅ，
的。此合〔根泳谱型为河５据电结果，蛋白常分为１类型。〕将异１种本文５有异白例常蛋血
症患者等速电泳测定结果，与健康者相比，均有明显的改变，其特征与诊断的关系有待进一步探讨，但对判断异常蛋白血症的性质，肯定是有意义的。等速电泳的灵敏度比较高，在分离蛋白组分方面，能区分出一般电泳或等电聚焦电泳难以辩别的成分，并可通过分分离器 “ ＡＨＯＲＣ组ＴＣＦＡ ”将分离出的组分，依次印染在醋酸纤维薄膜带上加以分离，因而也具有分离的功能。但我们试用结果，认为分离泵逆向推进压力很难掌握，兼分离专用毛细管组装的微细流出孔极易阻塞，因而未能成

毛细管区带电泳法测定4种抗HIV-1活性的化合物与牛血清白蛋白的结合常数

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与传统的测定结合常数的电位法、平衡透析法、光度 @. 用于分子间相法、高效液相色谱法等［ * & % ］相比，互作用的研究具有以下优点：分析速度快，分离效率高，样品用量少（ 9%") 级），对受体的纯度要求不高，可在溶液中进行，可保持生物分子相互作用所需要的生理条件，更接近体内的结合行为，有多种模式
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血清蛋白电泳的临床应用

血清蛋白电泳的临床应用血清蛋白电泳的临床应用一、引言血清蛋白电泳是一种常用的实验室技术，通过分离血清中的蛋白质，使得不同种类和数量的蛋白质可以清晰可见，从而对其进行定性和定量分析。

本文将详细介绍血清蛋白电泳在临床应用中的相关内容。

二、血清蛋白电泳的原理和方法1、原理血清蛋白电泳基于不同蛋白质在电场中的迁移速度不同的原理。

根据蛋白质的电荷和分子量差异，通过电场作用下的电泳分离，形成不同的蛋白质带。

2、方法血清蛋白电泳主要包括两种方法：凝胶电泳和毛细管电泳。

凝胶电泳是最常用的方法，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳。

毛细管电泳则更适用于快速分离和分析。

三、血清蛋白电泳的临床意义1、蛋白质异常的筛查和诊断血清蛋白电泳可以帮助筛查和诊断多种蛋白质异常病症，如多发性骨髓瘤、免疫缺陷病等，通过分析蛋白质的某些特征带和比例变化，提供诊断和治疗的指导。

2、蛋白质异常的分类与鉴别血清蛋白电泳可以帮助对不同的蛋白质异常进行分类与鉴别，如白蛋白异常、球蛋白异常等，从而进一步了解病情，并选择合适的治疗方法。

3、监测治疗效果在治疗过程中，血清蛋白电泳可以作为一个辅助指标，用于监测治疗效果。

通过跟踪蛋白质带的变动情况，可以评估治疗的有效性，并及时调整治疗方案。

四、附件本文档附带的文件为临床应用中常见的血清蛋白电泳样本分析报告示例，供参考使用。

五、法律名词及注释1、蛋白质异常：指血清中蛋白质的种类、数量或比例发生异常变化的情况。

2、多发性骨髓瘤：一种恶性肿瘤，主要累及骨髓，易导致蛋白质异常。

3、免疫缺陷病：一种免疫系统功能异常的疾病，常伴有血清蛋白异常。

六、全文结束。

毛细管电泳技术在检测分析中的应用

2011-12-31 毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用分析化学毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用摘要：毛细管电泳技术(CE)作为现今一种主要的分析技术，凭借其高效、灵敏、快速、设备简单、广泛适用性等特点，广泛应用于各个领域。

本文简要概述了CE技术的原理及特点，并简述了它在环境分析、食品分析、药物分析、生物大分子分析等各个领域的应用。

关键词：毛细管电泳；分析；应用1.毛细管电泳技术简介1.1 产生与发展毛细管电泳技术（Capillary Electrophoresis, CE）是一种在电泳技术的基础上发展的一种现代分离技术。

电泳技术作为一种分离技术已有近百年历史，1937 年A.Tiselius首先提出：传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热。

1967年，Hjerten最先提出了毛细管电泳的雏形，即在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳。

但他并没有完全克服传统电泳的弊端。

直至1981年Jorgenson和Lukacs提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 这时现代毛细管电泳技术真正产生。

1984 年Terabe将胶束引入毛细管电泳，开创了毛细管电泳的重要分支：胶束电动毛细管色谱（MEKC）。

1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。

同年，Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。

近年来，将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中，又发展了电色谱，扩大了电泳的应用范围。

毛细管电泳技术兼有高压电泳及高效液相色谱等优点，其突出特点是：（1）所需样品量少、仪器简单、操作简便。

（2）分析速度快，分离效率高，分辨率高，灵敏度高。

（3）操作模式多，开发分析方法容易。

（4）实验成本低，消耗少。

（5）应用范围极广。

自1988年出现了第一批毛细管电泳商品仪器，短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶，抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,得到了迅速的发展。

毛细管电色谱分离蛋白质及多肽

1. 引言：毛细管电色谱 (CEC) 是一种集高效毛细管电泳（ HPCE ）和高效液相色谱（ HPLC ）的分离机制于
一体的方法，它的溶质流动是通过一个电驱动原理，分离机制是不仅依靠溶质—固定相间的反应作用，还有电渗流的作用。在最普通的毛细管电色谱模式中，毛细管填充了化学改性的硅胶颗粒，固定相如同 HPLC 中一样。一个柱塞，置于溶质到达检测窗口之前的位置，以用于阻止固定相的流失和光信号的失真。塞子和固定相颗粒都可能导致气泡的产生，从而导致电渗流的中断，为了最大限度地减少气泡产生的可能性和排除堵塞，这在小直径的管子内是很困难的，因此发展了一种在毛细管内壁蚀刻的毛细管电色谱方法，这个过程同在气相色谱中为了增加毛细管柱内壁表面积而涂上一层聚合物的方法相似，在精确控制的温度和反应时间下使用了二氟化氢铵作蚀刻剂。较早的研究描述在 300-400 ℃时蚀刻毛细管 3-4 小时，这些条件明显地增加了表面积，从而充分地增大了蛋白质、多肽和四环素与十八烷基固定相间的分配因子（在溶质和蚀刻柱内壁上的有机部分之间）。
而仅仅表明在蚀刻过程中产生的长的
辐射状硅胶已被机械振动破坏。
一些在 C18 改性蚀刻柱上的CEC分
‘
图1
离蛋白质和四环素的基本数据已给
出，如同在 HPLC 上，使用二醇基固定相会比典型的烷基键合相具有更大的亲水性，比如 C18 或 C8 。图 1 显示了一些基本的蛋白质在 PH 为 4.41 的缓冲溶剂、二醇基柱条件下的分离特征，峰是对称的，表明了在蚀刻过和改性过的柱表面只有很少或没有溶质的吸收。类似于前面说过的 C18
图3 空管柱、二醇基柱和 C18 柱之间的不同可以通过观察在不同的实验条件下，火鸡和小鸡的溶菌酶的
分离来更好地说明，在 PH 值为 2.4 和 30KV 的电压条件下，空管柱和二醇基柱均不能分离这些溶质，然而在 C18 柱条件下（图 3A ），色谱图给出这两种溶质的基线分离，和另一种附加成分（可能是一种样品的杂质）可明显地观察到它位于第二个峰的肩部，通过提高 PH 到 3.0 、降低电压到 25KV ，裸柱和 C18 （图 3B ）给出两种溶菌酶的基本可识别的分离图谱和少量杂质的峰。然而。二醇基改性柱在这条件下，没有观察到任何变化。如果 PH 升到 4.41 ，那么空管柱和二醇基柱（图 3C ）大约给出了相同的这两种溶菌酶的分离图谱，在这种条件下，很明显，色谱图上，次要成分可能有些移动，以致它在两个主峰之间洗脱出。相比空管柱，在二醇基柱上，它更清楚地作为火鸡溶菌酶峰的一个峰肩。相同条件下， C18 改性柱上，两种溶菌酶未分离开，在 C18 柱上观察到的很宽的峰和峰拖尾表明了键合有机成分过强的吸附作用和残余硅烷醇的吸附作用。由于溶菌酶是很简单的蛋白质，它对可接触的 Si-OH 基团非常敏感，因此后一种可能性更大。

应用毛细管区带电泳分离分析蛋白质及多肽

基及磺酸基的两性离子［］３。这些两性离子适用ｐ６Ｈ范围广且ＵＶ吸收低，１ｏＬ的两性离子即可有用ｍｌ／
效地减小溶菌酶的吸附。此外还有报道用两性离子
面，如两亲化合物涂层［，；１０或再加入交联剂实现涂９］２渍分子间的交联聚合，提高涂层的稳定性，如甲基纤维素［］聚乙烯亚胺（Ｅ）２聚谷氨酸甲酯［］２１ＰＩ［、２］２涂３层。（）２毛细管内壁硅烷化，通过双官能团交联剂，将涂渍物键合到毛细管内壁上，如聚丙烯酰胺［，、２４聚１］２乙烯毗咯烷酮［］丙基甘油醚基－１、６甘油［］乙二１、６醇［，，１２聚乙二醇（Ｅ）６］麦芽糖［］五氟苯８５］ＰＧ［，２２７２、５（Ｆ）８－乳清蛋白［］ＡＰ［］２ⅵ ２等涂层，９此外还有先在毛细管内壁键合上十八烷基硅烷，再涂一层Ｔｅｎ或ｗｅＢｉ系列的非离子表面活性剂［］ｒｊ３的方法。０
行了改进［４琀ＰＥ使用内径细小的毛细管仍然４３ＨＣ１］－
限制了ＵＶ检测的灵敏度。采用高灵敏度的荧光检测法，对于氨基酸、小肽的衍生化荧光分析法已取得了成功，但对蛋白质、多
提高了其稳定性，也扩大ｐＨ使用范围（Ｈ２ｐ－
１．。０５
对于等电点（Ｉ高的碱性蛋白质，Ｐ）利用可使内壁
常用的分离分析和制备手段，但它周期长，操作繁琐，难以定量和自动化。高效液相色谱法在分析蛋白质、多肽及核酸等生物大分子时，因样品组分扩散系数小，传质阻力加大而分离效率较低。高效毛细管电泳（ＰＥ，ＨＣ）是近十年特别是近三、四年来迅速发展起来的一项新型分离分析技术。它将电泳方法与色谱技术相结合［，１具有高效、］快速、分析所需样品量少、易自动化等优越性，在分析化学各领域都显示了其应用潜力，并且由于它的理论分离柱效与样品组分扩散系数成反比［，２使它尤］其适合于生物大分子的分析。目前应用高效毛细管电泳分离分析蛋白质、多肽及核酸等生物大分子的研究十分活跃。

毛细管电泳技术及应用

1981年，Jorgenson和Luckas，用75μm内径石英毛细管进行电泳分析，柱效高达40万/m，促进电泳技术发生了根本变革，迅速发展成为可与GC、HPLC相媲美的崭新的分离分析技术——毛细管电泳。
毛细管电泳（Capillary Electrophoresis, CE）
高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进： 1. 采用了25-100μm内径的毛细管； 2. 采用了高达数千伏的电压。 • 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了
4.应用范围极广
有机物、无机物、生物、中性分子；生物大分子等；分子生物学、医学、药学、化学、环境保护、材料等；
毛细管电泳理论基础
一、CE基本原理二、电渗现象与电渗流electroosmotic flow 三、影响电渗流的因素四、淌度mobility 五、CE中的参数与关系式六、影响分离效率的因素
ν电渗流 = μ E
电渗淌度取决于电泳介质及双电层的Zeta电势，即
μ = ε0εξ
ε0—真空介电常数；ε—介电常数；ξ—毛细管壁的Zeta电势。
ν电渗流 = ε0εξ E
实际电泳分析，可在实验测定相应参数后，按下式计算
ν电渗流 = Lef/teo
Lef —毛细管有效长度； teo—电渗流标记物（中性物质）的迁移时间。
Winj= (24D t )1/2 实际操作时进样塞长度小于或等于毛细管总长度的1%～2%。
3.焦耳热与温度梯度的影响
电泳过程产生的焦耳热可由下式计算：
Q
VI π r2L
Λm cb
E
2
m—电解质溶液的摩尔电导；I—工作电流：cm—电解质浓度；
散热过程中，在毛细管内形成温度梯度（中心温度高），破坏了塞流，导致区带展宽。

运用高效毛细管区带电泳法对人血清蛋白的分析

．
血清蛋白电泳一直是『了解血清蛋自质全貌，而临床进为疾病诊断提供依据的良好检测手段。目前常用的是醋纤薄膜电泳，该方法存在分辨率低，泳时问长，借助染但电需色及扫描才能得到结果等缺点 ” 。文根据Ｖｖｒｍｅ］本．ｉａｎ报ｒ
ｂｈｓｍｅｈｄＴｅｄｔｓｏｅｏｄｃｒｅｐｎｓｔｔｅｌｉｌｅｕｔ．ｅｒｎｉｕｆｒｗａ０ｙｔｉｔｏｈａａｈｗｄｇｏｏｒｓｏｄｏｏｈｒｃｎｃｓｌＴｈｕｎｎｂｆｓ１０ｍｍｏ／ｏａｅｉａｒｓｇｅｌＬｂｒｔ
关键词：细管区带电泳；清蛋白毛血
中图分类号：１Ｒ４文献标识码：文章编号：６１７１（０２０１３Ｑ５２４Ａ１７４４２０）２０７０ＳｐｒｔｏｆＨｕｍａｅｕｏｅｎｓｅａａｉｎｏｎＳｒｍＰｒｔｉ
ａｄｎｔｕｈｄｏｉｅ、ｏｔｇｓ１Ｖｔｅｅｔｎｗａｅｅｇｈｏ１ｍ．ｌｔｅｐｏｅｎｐａｓｃｕｄｂｏｎｌｓｎａｒｍｙｒｘｄｖｌａｅｗａｋｔｈｄｔｃｉｖ［ｎｔｆ２４ｎＡｌｈｒｔｉｅｋｏｌｅｇｔｉｅｓ５ｗｉｏｔａｍｉｕｅｅｍｅｈｄｈｄｅｃ［ｎｅｒｄｃｉｔ．ｉａｔｍａｅｉｈｐｒｏｍａｃａｉａｙ７ｔｌｃｒｐｏｅｉｈｎ１ｎｔｓＴｈｔｏａｘｅ１ｔｐｏｕｉｌｙＴｈｓｕｏｔｄｈｇｅｆｒｎｅｃｐｌｒｏ￣ｅｅｔｏｈｒｓｓ６ｅｒｂｉｌ．ｅｍｅｈｄｆｒｓｐｒｔｏｆ￣ｒｍｒｔｉｓｖｅｅｎｕｔｂｅｆｒｕｉｇｉｈｏｔｎｌｉａａｏａｏｉｔｏｏｅａａｉｎｏｅｕｐｏｅｎｉｗｓｂｉｇｓｉａｌｏｓｎｎｔｅｒｕｉｅｃｉｃｌｌｂｒｔｒｅｎｓＫｅｏｄ：ａｉａｙｚｎｌｃｒｐｏｅｉ｛ｅｕｌｐｏｅｎｙｗｒｓｃｐｌｒｏｅｅｅｔｏｈｒｓｓｓｒｒｒｉｓｌｌｒ

高效毛细管区带电泳法分离人血清蛋白质的研究

高效毛细管区带电泳法分离人血清蛋白质的研究
李克;袁倚盛;赵飞浪
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】2000(18)2
【摘要】研究了高效毛细管区带电泳分离人血清蛋白质的电泳行为及实验条件,建立了分离血清蛋白质的高效毛细管区带电泳法.血清样品经硼酸缓冲液(50
mmol/L,pH 8.80)稀释后,以0.1 mol/L硼酸缓冲液(pH 9.35,含4 g/L PEG8000) 为电泳介质,在50 μm i.d.×37 cm弹性石英毛细管柱(有效柱长为32 cm)中进行电泳分离,以200 nm紫外波长检测.方法简便、快速、重复性好,12 min内便可完成对血清中蛋白质的电泳分离.
【总页数】3页(P152-154)
【作者】李克;袁倚盛;赵飞浪
【作者单位】南京军区南京总医院,全军医学检验中心,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院,全军医学检验中心,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院,全军医学检验中心,江苏,南京,210002
【正文语种】中文
【中图分类】O658
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毛细管区带电泳法分离四种蛋白质的研究

毛细管电泳测定条件：细管柱温２ ℃ ；毛５检
等形成动态涂层，改善蛋白质与毛细管壁的吸附
状况。特别是ｐ的调节，成本低、效果明显，ｊＨ
测波长２０ｍ；压力进样（．ｓ）进样时间０ｎ０５ｉ，ｐ
管内表面进行修饰及调整分离用缓冲体系２种解决方案。通过键合反应对毛细管内表面静态修饰
的方法，表面涂层稳定，但修饰过程繁琐，技术要
求高。较为简便易行的方法是选择适当的酸碱缓冲体系，或添加表面活性剂、高分子材料、纳米材料
于水、定容，使成ｌ／ｍｇｍＬ，４Ｃ保存，一般不超ｏ过３个工作日。０１ｍｍｏ／酸缓冲液（ｌ２。．ｌＬ磷ｐｔ）０４－＝％硼酸一．％硼酸钠缓冲液（Ｈ＝．）．％Ｓ一０３ｐ９０。０１ＤＳ０％硼酸一．％硼酸钠缓冲液（Ｈ＝．）．４０３ｐ９０。
内壁和蛋白质组分都带正电或负电，减少静电吸附，
达到分离；当所选体系ｐ值与ｐ接近时，分离不ＨＩห้องสมุดไป่ตู้佳。实验中所选用的蛋白质样品等电点（Ｉｐ）值在
１实验部分
１１仪器与试剂．ＰＡＣＥＭＤＱ型毛细管电泳仪（ｅｋｎ／Ｂｃｍａ．Ｃｕｔｒ司，美国）ｏｌ公ｅ，紫外检测器，未涂层石英毛细管（ｅｋｎＣｕｔｒＢｃｍａ— ｏｌ公司，总长５ｃｅｌｍ，有效长

毛细管区带电泳技术及应用

毛细管区带电泳技术及应用毛细管区带电泳技术（Capillary Zone Electrophoresis，CZE）是一种高效的分离和分析技术，利用背景电解质在毛细管中形成的电动流动及外加电场的作用，将被检测的样品分离开来。

毛细管区带电泳技术具有高分离效率、灵敏度高、样品需量小、分析速度快、适用于各种离子、小分子有机化合物、大分子如蛋白质和核酸等的分析等优点。

下面将介绍毛细管区带电泳技术的基本原理及其应用。

1. 毛细管区带电泳技术基本原理：毛细管区带电泳技术是基于电泳分离原理的一种分析方法。

毛细管内的电测电流和电压作为工具信号直接测量电导率，由于电导率与离子浓度成正比，通过计算可知样品中离子的浓度。

其基本原理如下：- 外加电场：在毛细管两端施加直流电场，样品中的带电粒子会被拉动向阳极或阴极方向移动。

- 毛细管内电动流动：在毛细管内部，背景电解质（电导率较高的缓冲溶液）通过浓度梯度与电场作用下形成电动流动，背景电解质的流动速度较高，背景电解质流动会带动样品分子的运动。

- 电渡效应：毛细管内的带电粒子在电渡效应的作用下会不同程度地移动，不同的离子在电场下移动速率不同，从而实现离子和样品分子的分离。

2. 毛细管区带电泳技术的应用：毛细管区带电泳技术在分析化学、生物医学等领域得到广泛应用，下面列举几个常见的应用领域：- 离子分析：毛细管区带电泳技术可以用于离子的分离和测定。

它可以是无色离子，如金属离子、无机阴离子、有机阴离子等的分析，也可以是发色离子的分析。

- 小分子有机物分析：毛细管区带电泳技术可以用于分离和检测食品、药物、环境样品等中的小分子有机物。

例如，可以用于药物成分的分析、食品添加剂的检测等。

- 蛋白质分析：毛细管区带电泳技术在蛋白质分析方面得到广泛应用。

由于毛细管区带电泳技术分离效率高、分析速度快，对蛋白质样品需求量小，可以有效地分离和定量测定多肽、蛋白质混合物。

- 核酸分析：毛细管区带电泳技术可用于分离和分析DNA、RNA等核酸样品。

毛细管区带电泳分离血清脂蛋白

５５
２．３其他在３００～５００Ｖ／ｃｍ和１５～６０℃比较温度和场强的影响，随着场强和温度升高，分离效果略有改善；但同时焦耳热效应增加。选择２５ｋＶ恒压、２５℃恒温分离。２．４综合上述因素，选用含０．００１％Ｂｒｉｊ３５，ｐＨ１０ｏ的１５ｍｍｏｌ／Ｌ硼砂溶液作电泳缓冲液，２５℃恒温，２５ｋＶ分离。相对迁移时问日内ＣＶ０．３５％一０．６２％，日问ＣＶ０．８５％～２．１％。健康体检者典型电泳图谱如图２左上图。用南京军区南京总医院生化室超速离心制备的ＬＤＬ加人到ｍ清中峰１和２增高，加入ＨＤＬ使峰３增高，故前两者为ＬＤＬ，后者为ＨＤＬ。２．５２０名健康体检者血清分别进行琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳，结果见表１。经ｔ检验无显著差异。某高脂血症患者ＴＣ９，５５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＴＧ４，８１ｍｍｏｌ／Ｌ，毛细管电泳结果为８９．８％，Ｈｅｌｅｎａ电泳Ｂ脂蛋白占９３．８％，如图２右下图。
临床检验杂志 CHINESE JOURNAL OF CLINICAL LABORATORY SCIENCE 2006，24(1) 1次
参考文献(6条) 1.Lee K J.Heo G S Free solution capillary electrophoresis of proteins using untreated fused-silica capillaries 1991(1-2) 2.Cruzado I D.Cockrill S L.McNeal C J Characterization and quantitation of apolipoprotein B-100 by capillary electrophoresis 1998(01) 3.Liu M Y.McNeal C J.Macfarlane R D Charge density profiling of circulating human low-density lipoprotein particles by capillary zone electrophoresis 2004(17) 4.Cruzado I D.Hu A Z.Macfarlane R D Influence of dodecyl sulfate ions on the electrophoretic mobilities of lipoprotein particles measured by HPCE 1996(01) 5.Stocks ler N E Capillary electrophoresis to monitor the oxidative modification of low density lipoproteins 1998(06) 6.Weiller B H.Ceriotti L.Shibata T Analysis of lipoproteins by capillary zone electrophoresis in microfluidic devices:assay development and surface roughness measurements 2002(07)

高效毛细管区带电泳色谱的原理和应用

色谱论文高效毛细管区带电泳色谱的原理和应用高效毛细管区带电泳色谱原理、方法和应用（化学化工学院 08级化学专业潘超张循）摘要：高效毛细管电泳( High Performance Capillary Electrophoresis缩写为H P C E ) , 是20 世纪末发展的一种高效、快速的分离技术，是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物，是继高效液相色谱（HPLC）之后又一重大进展。

已在国际学术界引起强烈的反响和关注。

高效毛细管区带电泳是最基本、操作最简单、应用最广泛的一种毛细管电泳的分离模式, 通常看作其它模式的母体。

本文主要介绍它的原理和一些应用。

关键词：毛细管电泳毛细管区带电泳电渗流电渗现象引言在毛细管中进行区带电泳，一方面可减少焦耳热效应导致的区带加宽, 另方又可借用高效液相色谱的检测技术实现在线检测, 免除染色、脱色和扫描或照相。

1979年Mikkers 等[1]在内径为0.2mm长为20cm的毛细管中做区带电泳, 达到3.6万理论板。

1981年, Jorgenson和Lukacs做了理论上的初步考察, 认为在毛细管长度足够时, 电泳的分离效率与长度无关而与电压成正比：N=mV/2D。

其中N为理论板数, m为离子的迁移率, V为电压, D为离子的扩散系数。

为了提高电压而又不使电流太大, 同时也为了减小焦耳热效产生的径向温度梯度, 他们使用内径为0.075mm的毛细管。

在管长1米,电压3万伏时, 控制进样量尽量小, 达到约40万理论板的效率（用荧光胺衍生的肽）[2.3]是毛细管区带电泳的一次突破。

毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大减小了温度效应，使电场电压可以很高。

电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变小，柱长增加，高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱，理论塔板数高达几十万块/米，特殊柱子可以达到数百万。

为今后毛细管区带电泳的快速发展奠定了基础。

1、高效毛细管区带电泳色谱的原理1.1装置的结构高效毛细管电泳指以高压电场为驱动力, 以毛细管为分离通道, 依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离技术[ 4]。

毛细管区带电泳测定两种生物碱与牛血清白蛋白的结合常数研究_霍鹏

技术，用于分子间相互作用的研究具有以物碱的结构图
，对受体的纯度要求不高，量少（可在溶液中进行，可保持生物分子相互作用所需要的生理条ｍｏｌ级）ｎ
１６］但蛋白质大分子易被毛件，更接近体内的结合行为，有多种模式可供选择，适用于各种亲和体系等［．
ＴＭ；；超纯水系统（司）美国Ｍ德国ＳｔｈｅｓｉｓＡ１０ｉｌｌｉｏｒｅ公司）２１５Ｓ电子天平（ａｒｔｏｒｉｕｓ公司）ＳｎＭＥ．ｐｙ
；；美国Ｓ牛血清白蛋白（盐酸麻黄碱、磷酸可待因（购自中国药品生物制品检定所）ＳＡ，ｉｍａ公司）Ｂｇ其它试剂均为分析纯．１．２样品溶液的配制，精密称磷酸可待因溶液的配制取盐酸麻黄碱、磷酸可待因对照品各约１２．１盐酸麻黄碱、０ｍ１．ｇ／定，分别置于１用缓冲溶液溶解并定容，配成１．经０．０ｍＬ容量瓶中，００ｍｍＬ的对照品储备液，４５μ ｍｇ滤膜过滤，密封于４ ℃ 下冰箱中保存，实验时用缓冲溶液稀释至所需浓度．／然后２．２牛血清白蛋白溶液的配制称取适量的ＢＳＡ用电泳缓冲溶液配制成０．５ｍｍｏｌＬ溶液，１．、、、、、、／，的滤依次稀释到０．工作溶液经膜过００５０．０１００．０１５０．０２００．０２５０．０３００．０３５ｍｍｏｌＬ４５μ ｍ０．滤，密封于４ ℃ 下冰箱中保存备用．／（）为电泳缓冲溶液，未涂层弹性石英毛细管（２．３电泳条件以２５ｍｍｏｌＬＴｒｉｓ－ＨＣｌＨ＝７．４０５１．７ｐ）），，，，（柱检为分分离通道压力进样离电压温测波长ｍ×６０ｃｍ４４７５ｋＰａ×６ｓｅｃ０ｋＶ７℃ １４３．２３２ μ ／缓冲溶液与样品均用０．并超声脱气．毛细管每天使用前，分别用０．ｎｍ．４５μ ｍ滤膜过滤，１ｍｏｌＬ超纯水和缓冲溶液各冲洗１ＮａＯＨ、０ｍｉｎ．

毛细管电泳分离蛋白质的研究进展

毛细管电泳分离蛋白质的研究进展作者：宫红梅来源：《硅谷》2014年第07期摘要综述了无胶筛分毛细管电泳在和蛋白质的分离分析中的应用实例，对这种方法的前景展望及发展趋势进行讨论。

关键词高效毛细管电泳；无胶筛分；蛋白质；电渗流中图分类号：O629.73 文献标识码：A 文章编号：1671-7597（2014）07-0160-01近年来，蛋白质组学的研究进展迅速，其中研究热点集中于蛋白质的分离检测与结构鉴定上。

目前有关蛋白质的研究手段和方法较多，各有优缺点。

毛细管电泳技术具有高效、快速、样品用量极少等特点，适合生物大分子的分析检测。

但毛细管电泳分离蛋白质时，首先要解决的问题是蛋白质样品对管壁的吸附。

无胶筛分毛细管电泳是在缓冲溶液中添加线性高分子而不进行交联反应，溶液中高分子之间相互交缠形成网孔，从而对蛋白质等生物大分子按其大小进行筛分分离，无胶筛分的机制还不明确，存在几种理论模型：交缠溶液理论和高分子亚浓溶液线团收缩理论，Ogston、爬行和偏爬行模型和碰撞模型[1]。

高分子溶液加入到缓冲液中，使电渗流得到抑制，同时也抑制了蛋白质的吸附，与凝胶电泳相比，它的制备工艺相对简单，寿命较长，操作简便，容易清洗等优点。

传统的SDS-凝胶电泳分离蛋白质的分辨率低，操作繁琐耗时，且所用药品有毒性，毛细管凝胶电泳可以克服上述缺点，但制备工艺复杂，凝胶寿命短，填充过程中容易产生气泡，影响分离。

无胶筛分电泳具有更多的优点，容易填充和冲出，高分子聚合物在管中形成动态筛分网络，能很好的保持操作重现性，而且可以抑制电渗流，减少吸附。

而且可以选择筛分介质的种类，浓度，分子量，以适合分离不同的蛋白质混合物。

1 无胶筛分毛细管电泳的应用目前，无胶筛分体系已较多应用于低聚核苷酸、DNA限制性片段、聚合酶链反应产物的分离研究领域中。

郭栩等人根据实验结果得出结论，在无胶筛分体系中，尽管影响分离的主要因素在于筛分体系本身，但柱壁的处理对DNA片段的分离结果也不可忽视[3]。

毛细管区带电泳技术测定人血清蛋白

毛细管区带电泳技术测定人血清蛋白
张宁;唐轶;郝冬梅;郑玲;邱广斌
【期刊名称】《沈阳部队医药》
【年(卷),期】1999(0)1
【摘要】为了探讨影响毛细管区带电泳测定人血清蛋白的因素,应用 P/ACE 5000型毛细管电泳仪观察了运行缓冲液pH值、乳酸钙、硫酸镁和EDTA浓度对血清蛋白测定的影响。

结果表明,正常人血清蛋白分为6个峰,多一条补体
C<sub>3</sub>峰;孕妇多一个未知的α<sub>0</sub>峰。

将正常人、孕妇,多发性骨髓瘤等患者的毛细管电泳与传统的醋酸纤维膜电泳相比较,前者具有高分辨率、在线数据处理和自动化特点。

对不正常的血清蛋白诊断,毛细管区带电泳是一个可靠的分析新技术。

【总页数】3页(P25-27)
【作者】张宁;唐轶;郝冬梅;郑玲;邱广斌
【作者单位】第202医院全军优生优育中心;第202医院全军优生优育中心110003;110003
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.运用高效毛细管区带电泳法对人血清蛋白的分析 [J], 顾志冬;马蔚芸;杨伟宗
2.高效毛细管区带电泳法分离人血清蛋白质的研究 [J], 李克;袁倚盛;赵飞浪
3.应用毛细管区带电泳法测定人血清蛋白 [J], 张宁;唐轶;郝冬梅
4.高效毛细管区带电泳技术测定奥丹西隆注射液的含量 [J], 李红;施维;杨迎迎
5.高效毛细管区带电泳技术测定泛酸钙的含量 [J], 张强;吴烈钧
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毛细管电泳法快速分析血清蛋白

毛细管电泳法快速分析血清蛋白
郭文茹
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1998(16)4
【摘要】用国产未涂层熔融石英毛细管进行血清蛋白电泳的方法。

采用毛细管区
带电泳法，电场电压３０ｋＶ，毛细管工作温度２０℃，压力进样３ｓ，毛细管规格为５０μｍＩＤ×４７ｃｍ或５０μｍＩＤ×５７ｃｍ，紫外检测波长为２００ｎｍ。

结果表明，当用重蒸水将血清样品１０倍稀释时，用硼酸－氢氧化钠缓冲液（ｐＨ９．６）可将血清蛋白分为白蛋白（Ａｌｂ）、α１球蛋白、α２球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白五个组份，加大缓冲液离子强度可分离出更多组份。

该方法简便、快速，避免了人为误差，人机对话。

【总页数】3页(P206-208)
【作者】郭文茹
【作者单位】天津市第一中心医院检验科;天津市第一中心医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.112
【相关文献】
1.全自动毛细管电泳法和琼脂糖凝胶法检测一例多发性骨髓瘤患者血清蛋白结果变化 [J], 黄泽玉;陈燕
2.快速老化模型小鼠血清蛋白质组学分析比较 [J], 蒋宁;周文霞;张永祥;张学敏;王
杰;刘炳玉
3.毛细管电泳法高压快速分离分析菠菜中的水溶性维生素 [J], 胡晓琴;尤慧艳
4.全自动快速电泳分析系统检测100例健康人血清蛋白组分参考值 [J], 吴瑜霞;黄志锋
5.毛细管电泳法检测血清蛋白电泳的性能评估 [J], 安崇文;李海霞;焦莉莉
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电泳法分离血清蛋白质

电泳法分离血清蛋白质掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。

实验原理:1.电泳：是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。

在一定pH条件下，不同的蛋白质由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此，可使它们分离2.影响电泳迁移率的因素：内在因素：蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象3.血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0～7.3之间，在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷，在电场中向正极泳动。

血清中各种蛋白质的等电点不同，所以带电荷量也不同。

此外各种蛋白质的分子大小各有差异，因此在同一电场中泳动的速度不同。

分子小而带电荷多者，泳动较快；反之，则较慢。

4.醋酸纤维素溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。

该膜具有均一的泡沫状的结构，厚度约为120 μm，有很强的通透性，对分子移动阻力很小。

该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点。

现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。

5. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带，从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，经染色可计算出各蛋白质的百分含量。

实验器材:1. 电泳仪：为电泳提供直流电源。

2. 电泳槽：为电泳提供场所。

3. 血清加样器：可用盖玻片或微量加样器。

4. 醋酸纤维素薄膜：2cm×8cm5. 其它：培养皿（直径9-10cm）、滤纸、镊子等。

实验材料和试剂:材料：牛血清试剂：1、巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6)2、0.5% 氨基黑10B染色液3、漂洗液实验操作:1. 电泳槽的准备电泳槽有两个互相隔离的槽，各自装有缓冲液，接不同的电极，红色为正极，黑色为负极。

毛细管等速电泳法分离血清脂蛋白

毛细管等速电泳法分离血清脂蛋白王跃国;王惠民;王忠慧;杨曙梅;张芹;周锦红;黄一红【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2006(24)4【摘要】目的建立毛细管等速电泳(CITP)分析血清脂蛋白的方法.方法用盐酸和丙氨酸组成的不连续缓冲体系分离荧光标记的脂蛋白颗粒;各亚组分的相对峰面积(RPA)结合血清总胆固醇反映各脂蛋白胆固醇的含量.结果本法可在6 min内将血清脂蛋白分出9条带,其中1～4为HDL,5为CM,6为VLDL/LDL,7～9为LDL.各组分的RPA批内CV为3.17%～13.55%,批间CV为4.55%～15.33%;血红蛋白＜20 g/L、胆红素＜342 μmol/L、清蛋白＜70 g/L对结果无影响;HDL-C、LDL-C 与均相法相关(r分别为0.87和0.84,P＜0.001).结论 CITP可快速、灵敏分离定量血清脂蛋白及其胆固醇含量,可用于临床分析脂质代谢异常.【总页数】3页(P244-246)【作者】王跃国;王惠民;王忠慧;杨曙梅;张芹;周锦红;黄一红【作者单位】南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001;南通大学附属医院检验医学中心,江苏南通,226001【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.利用毛细管等速电泳法分离测定轻稀土元素 [J], 苏睿;陈新生2.毛细管等速电泳法分析肾病综合征患者的脂质代谢 [J], 王跃国;王惠民;张芹;杨曙梅;王忠慧3.柱前衍生-酸诱导瞬时等速堆积柱上富集毛细管电泳法测定巯基化合物 [J], 黄征;张红医4.强电渗流-瞬间等速毛细管电泳法在线富集测定痕量还原性及氧化性谷胱甘肽 [J], 燕娜;朱在方;周雷;董亚蕾;陈兴国5.强电渗流-瞬间等速毛细管电泳法在线富集测定痕量还原性及氧化性谷胱甘肽 [J], 燕娜;朱在方;周雷;董亚蕾;陈兴国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。