抑癌基因PTEN在胃癌中的表达及其临床意义

抑癌基因PTEN在胃癌中的表达及其临床意义
(新疆医科大学第五附属医院放化疗科新疆乌鲁木齐830011)【摘要】目的：检测抑癌基因pten在胃癌组织中的表达及其临床意义，方法：采用免疫组织化学s-p法检测30例正常胃粘膜及80例胃癌组织中pten蛋白的表达。

结果： 30例正常胃粘膜pten蛋白阳性率为100%，胃癌组织pten蛋白阳性率42.5%（34/80），显著低于正常胃粘膜（p<0.01），pten表达水平与性别和年龄无关，pten表达水平与组织分化程度、tnm分期及淋巴结转移密切相关（p<0.05）。

结论：随着肿瘤恶性程度的增加， pten表达下调，检测pten对于诊断胃癌，判断其恶性程度及预后有一定价值。

【关键词】pten；胃癌；免疫组织化学【中图分类号】r735.2 【文献标识码】b【文章编号】1004-5511（2012）04-0166-01 胃癌是常见的恶性肿瘤之一，在我国胃癌死亡率占所有恶性肿瘤死亡的23%，居各类癌症死亡的第一位，肿瘤细胞生长的无限性和浸润转移是肿瘤的最重要特征，是胃癌治疗失败导致死亡的主要原因。

研究表明，胃癌是一种基因病，其发生、发展涉及到多种基因的异常改变。

迄今为止,对胃癌的病因及发病机理尚未完全阐明,对其治疗目前也仍局限于手术、化疗、放疗、生物免疫治疗、靶向治疗等,故对于如何能够早期发现胃癌、估计预后并及时有效治疗成为必要。

磷酸酶基因（pten）是迄今发现的第一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因，pten蛋白表达是推测进展期胃癌的分子标志物。

我们采取免疫组化
技术检测胃癌组织中pten蛋白的表达，以探讨pten基因在胃癌发生发展过程中的作用及其临床意义。

1 材料与方法1.1一般资料分析2008年～2010年在我院手术的80例胃癌患者的手术标本，男性52例，女性28例，年龄（30-78岁），平均年龄54岁。

另取30例正常胃粘膜组织作为对照。

取已经病理证实的存档蜡块,制成4μm连续切片,对每例切片进行免疫组化染色(sp法),并常规作he
染色。

1.2主要试剂和方法鼠抗人pten单克隆抗体，s-p试剂盒均购自北京中山生物公司，用pbs代替一抗作阴性对照，采用免疫组化s-p法，具体步骤按说明书进行。

1.3结果判断结果判断标准pten蛋白表达在细胞浆、胞浆有棕黄色颗粒沉着的为阳性细胞，随机选择10个具有代表性的高倍视野，计数1000个细胞，计算阳性细胞百分率，阳性细胞＜10%为表达阴性“-”；10%-50%为阳性“+”；＞50%为强阳性“++”。

1．4 临床分期采用1997年uicc胃癌临床分期标准。

1.5统计学处理采用ｘ2检验进行统计学处理。

2 结果胃癌和正常组织中pten表达见表1，80例胃癌组织pten的表达见表2。

表1
胃癌和正常组织中pten的表达
表2
pten表达与临床病理因素的关系pten在正常胃粘膜阳性表达率100%，胃癌组总阳性率为42.5%，两者显著性差别， pten表达水平与性别和年龄无关，淋巴结转移组pten表达显著低于无淋巴结
转移组（p<0.01），低分化胃癌组ten表达显著低于高中分化胃癌组（p<0.05），ⅲ、ⅳ期胃癌组pten表达显著低于ⅰ、ⅱ期胃癌组（p<0.01）。

3. 结论pten(即mmac1, mutated in multiple advanced cancers 1) 于1997年首次被报道之后即成为研究热点,是迄今发现的第一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因［1］，也是继p53基因后另一个较为广泛地与肿瘤发生关系密切的基因，是众多肿瘤预后的评价指标,研究其作用机制对肿瘤的诊断及其基因治疗具有重要意义。

pten基因定位于10 q 23.3，编码由403个氨基酸组成的蛋白［2］。

研究表明该蛋白具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的双重活性，可使第二信使pip3去磷酸化，阻断其下游akt激酶的活化，进而阻断相应的信号传导系统，从而抑制细胞的生长［3］。

磷酸化和去磷酸化是调节细胞活动的重要方式，许多癌基因的产物都是通过磷酸化而刺激细胞生长。

因此，pten可能与酪氨酸激酶竞争共同的底物，在肿瘤的发生、发展中起重要作用。

10q23loh常发生在肿瘤晚期，约70%的恶性胶质瘤和60%的晚期膀胱癌可出现loh，但它却很少出现在低度恶性的胶质瘤和早期膀胱癌中。

tenasin通过粘着斑连接肌动蛋白轴丝。

粘着斑是包括整合蛋白、粘着斑激酶、src 和生长因子受体的复合物。

整合蛋白参与细胞生长调节、瘤浸润、血管生成和转移，所以，推测pten也可能是通过参与调节该过程影响肿瘤转移。

pten是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因。

其基因序列分析表明，pten第5外显子是其重要的功能域，它编码的序列与酪
氨酸磷酸酶催化区的核心基因和双特异性的保守区高度同源，其编码的双特异性磷酸酶可使丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基去磷酸化［4］。

pten的磷酸酶活性是其抑制细胞生长的前提和条件［5］，该编码区基因的突变可能与肿瘤的发生密切相关。

有研究显示pten
在胃癌中均有不同程度的表达降低或缺失。

pten丢失，细胞失去这种调节作用，无疑会促进肿瘤的进行性生长，与人类恶性肿瘤的发生普遍相关［6］，pten具有调控细胞周期、促进细胞凋亡、抑制肿瘤转移等多种生物学功能。

随着分子生物学技术的飞速发展，临床上已有可能对肿瘤患者进行常规性的基因标志物检测，而基因标志物的检测对实现早期诊断、制定治疗方案及进行预后评估具有重要的价值。

对pten基因的深入研究将为恶性肿瘤的早期诊断、临床监测、基因靶向治疗、预后评估、新药研发和一级预防提供科学的理论依据［7］。

参考文献［1］li j, yen c, liaw d, et al. pten, a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain, breast, and prostate cancer ［j］.science,1997, 275(5308): 1943-1947.［2］steck pa， pershouse ma， jasser sa et al. identification of a candidate tumour suppressor gene， mmac1， at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers［j］. nat genet， 1997， 15(4): 356362.［3］furnari fb， huang hj， cavenee wk. the phosphoinositol phosphatase activity of pten mediates a serumsensitive g1
growth arrest in glioma cells ［j］.cancer res， 1998， 58(22): 5002 5008.［4］曾益新. 肿瘤学［m］. 北京:人民出版社, 1999.66-67.［5］besson a, robbins sm, yong vw. pten/mmac1 mutations in signal transduction and tumorigenesis［j］. eur j biochem, 1999, 263（6）:605-611.［6］kerr r a. a surprising function for the pten tumor suppressor ［j］.science,1998, 282(5391): 1027-1030.［7］董晓群，周钢桥，褚嘉祐等，pten基因与恶性肿瘤［j］国际肿瘤学杂志,2007，（01），1-4.。