中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究

中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作
用的研究
（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
【摘要】目的探讨不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。

方法观察不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。

结果不同剂量半枝莲与对照组比较，具有显著性差异（P0.05）；半枝莲与顺铂（DDP）合用组与单用DDP 组比较，有显著性差异（P0.05）。

结论半枝莲能有效地抑制H22肿瘤生长，并能显著加强化疗药DDP的抑瘤效果。

【关键词】半枝莲H22 抑瘤
中药半枝莲(Herba Scutellariae Barbatae)为唇形科(Labiatae)植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don的干燥全草。

半枝莲性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，是中医处方和成药中的常用中药，具有清热解毒、化淤利尿的功效［1］。

近代药理学研究表明半枝莲抗肿瘤、抗病原、抑菌、解热、保肝等活性。

半枝莲作为一种常用的抗肿瘤中药，在临床上应用多年，对肝癌、肺癌、胃癌、直肠癌、鼻咽癌等均
有一定的疗效。

本实验观察了不同剂量半枝莲提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响，以及生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标，来探讨半枝莲的抗肿瘤作用机制，以期为半枝莲抗肿瘤新药的开发和研制提供依据。

1 材料与仪器
1.1 药材半枝莲Herba Scutellariae Barbatae购自济南市建联中药店，并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定为唇形科(Labiatae)植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don的干燥全草。

1.2 动物及瘤株昆明种小鼠，雄性，体重（20±2）g，由山东大学实验动物中心提供。

H22肝癌小鼠购自山东省医学科学院药物研究所。

1.3 仪器与试剂超净工作台（北京半导体设备厂）；FA2004型电子天平（上海天平仪器厂）；蒸气消毒器（山东新华医疗器械厂）；注射用顺铂（DDP，批号20041113，规格20 mg/支）(齐鲁制药有限公司)。

2 方法与结果［2，3］
2.1 半枝莲水提取物的制备称取半枝莲200 g，加相当于药材量的5～7倍的水浸泡1～2 h，煮沸30 min，过滤，药渣加3～5倍药材量的水继续煎煮，煮沸30 min，过滤，合并滤液，于水浴上浓缩成每毫升相当于原生药材1 g的浓度，即得半枝莲水提取物。

2.2 H22肝癌肿瘤细胞悬液的制备取传代后14 d的H22肝癌
小鼠，脱颈椎处死，固定于鼠板上，依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮肤，置于超净工作台中，无菌条件下，剥取肿瘤，选择生长良好无坏死及液化的肿瘤组织，剔除纤维包膜，在无菌表面皿中剪碎，置组织研磨器中，加入少量4℃生理盐水轻轻研磨，制成肿瘤细胞悬液，调整细胞浓度为1×107/ml。

2.3 昆明种小鼠移植H22肉瘤模型的制作取体重20 g左右的昆明种小鼠，每鼠0.2 ml接种于右前肢腋窝皮下（肿瘤细胞数约为2×106个），24 h后称重，随机分成6组，分组情况为：对照组，顺铂组，半枝莲大、中、小3个剂量组，顺铂+半枝莲中剂量组。

以上共分两大组，其中一组观察存活期以计算平均生存率,另一组计算瘤体重及其他相关指标。

2.4 给药与记录观察指标各组给药情况如下：对照组：移植肿瘤后，每日灌服0.4 ml生理盐水；DDP组：按2.0 mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2 ml/只/次，共两次；半枝莲小剂量组：每天按10 g/kg 体重灌服1次，连续10 d；半枝莲中剂量组：每天按20 g/kg体重灌服1次，连续10 d；半枝莲大剂量组：每天按40 g/kg体重灌服1次，连续10 d；DDP+半枝莲中剂量组：除每天按20 g/kg体重灌服半枝莲中剂量1次，连续10 d外；按2.0 mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2 ml/只/次，共两次。

给药10 d后停止给药，停药次日处死小鼠，称取小鼠体重，解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺，分别称重，出现提早死亡的动物则提
前解剖称重纪录。

计算抑瘤率、生命延长率、肝/体比、脾/体比、肺/体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标。

抑瘤率＝（C－T）/C×100％。

T为实验组平均瘤重，C为对照组平均瘤重。

结果见表1～4。

表1 不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠抑瘤率的影响（略）
与荷瘤对照组比较，△△P＜0.01；与DDP组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10
3 讨论
本实验通过建立H22荷瘤小鼠动物模型，观察了抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标，对半枝莲的体内抗肿瘤药理作用进行了研究，实验结果表明，半枝莲确实具有良好体内抗肿瘤作用，大、中、小剂量组的抑瘤率分别为38.01%，36.26%，31.58%，与对照组比较，具有显著性差异（P0.05）。

半枝莲大剂量组对H22荷瘤小鼠虽然有明显的抗肿瘤作用，但也有一定的毒副作用，表现在小鼠给药后数量减少和体重减轻；而半枝莲中、小剂量组则有明显的抗肿瘤作用和毒副作用小的优势，小鼠给药后生存时间增长和体重增加，明显延长荷瘤小鼠的生存时间。

DDP+半枝莲中剂量组与DDP组比较，具有显著性差异（P0.05），说明半枝莲可以增强DDP的抑瘤作用；而半枝莲
大、中、小剂量组与DDP组比较，具有显著性差异（P0.05），提示半枝莲虽然具有一定的抑瘤作用，但是和DDP比较，还是有一定的差距。

表2 不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠生存时间的影响（略）
与荷瘤对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与DDP组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10
表3 不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠体重的影响（略）
与荷瘤对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与DDP组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10
表4 不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数的影响（略）
与荷瘤对照组比较，△P0.05,△△P0.01；与DDP组比较，*P0.05，**P0.01；n=10
免疫指标方面，不同剂量的半枝莲影响顺序是：半枝莲中剂量组半枝莲小剂量组半枝莲大剂量组，可见中小剂量可以更有效地提高荷瘤小鼠的机体免疫力，对机体免疫系统有明显调节作用，可显著提高荷瘤小鼠免疫抑制状态。

半枝莲不同剂量组肝体比和肺体比差别也比较大，肝体比和肺体比最大的半枝莲大剂量组，对机体重要器官的损伤接近DDP组，与DDP组比较，无显著性差异（P0.05），而中、小剂量组与DDP组比较，具有显著性差异（P0.05），可以有效降低肿瘤对机体重要器官的损伤。

半枝莲与DDP合用组与DDP
组比较，肝体比、肺体比、胸腺指数和脾指数均具有显著性差异（P0.05），表明半枝莲可以显著改善DDP对免疫器官的抑制和损伤，提高机体的免疫力，同时降低DDP对肝和肺的损伤，减轻肝肿大和肺水肿的趋势。

关于半枝莲抗肿瘤的作用机制，还有待今后的实验进一步研究探讨。

【参考文献】
［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：77.
［2］齐晓娟，张锐. 雷公藤对荷肝癌(H22)小鼠的抑瘤作用的实验研究［J］.中医药信息，2005，22(3)：61.
［3］王丹，艾华. 鳖甲煎丸化裁对肝癌H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究［J］.中华中医药学刊，2007，25(3)：582.。