花青素提取教学教材
天然花青素的提取
花青素的提取一.课题目的、意义及研究现状1．课题的目的从瓜果蔬菜之中提取天然花青素，满足人们对新型保健品的需求，提高生活水平，丰富选择性，抗氧化、防突变，预防一些心脑血管疾病、保护肝脏等。
花青素(Anthocyanidin)，又称花色素，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝，属类黄酮化合物。
也是植物花瓣中的主要呈色物质，水果、蔬菜、花卉等五彩缤纷的颜色大部分与之有关。
花青素的相对分子质量：287.246 分子式：61115O H C花青素分子式2.研究意义花青素同其他天然色素一样无毒无副作用，安全性能高，着色色调自然，更接近天然物质的颜色，且具有保健功能。
自然界有超过300种不同的花青素，他们来源广泛，存在于许多瓜果蔬菜之中，功效神奇。
花青素是一种强有力的抗氧化剂，能够保护人体免受自由基的有害物质的损伤，花青素还能够增强血管弹性，改善循环系统和增进皮肤的光滑度，抑制炎症和过敏，改善关节的柔韧性。
花青素为人体带来多种益处。
从根本上讲，花青素是一种强有力的抗氧化剂，它能够保护人体免受一种叫做自由基的有害物质的损伤。
另外也可用于化妆品，如红色花青素做口红。
这些商品用色素(除葡萄皮色素外)共同特征是对光、热、氧稳定性好，对微生物稳定，一般溶于水和乙醇，不溶于植物油。
具体来说，花青素有如下几种作用：⑴．有助于预防多种与自由基有关的疾病，包括癌症、心脏病、过早衰老和关节炎；⑵．通过防止应激反应和吸烟引起的血小板凝集来减少心脏病和中风的发生； ⑶．增强免疫系统能力来抵御致癌物质；⑷．降低感冒的次数和缩短持续时间；⑸．具有抗突变的功能从而减少致癌因子的形成；⑹．具有抗炎功效，因而可以预防包括关节炎和肿胀在内的炎症； ⑺．缓解花粉病和其它过敏症；⑻．增强动脉、静脉和毛细血管弹性；⑼．保护动脉血管内壁；⑽．保持血细胞正常的柔韧性从而帮助血红细胞通过细小的毛细血管，因此增强了全身的血液循环、为身体各个部分的器官和系统带来直接的益处，并增强细胞活力；⑾．松弛血管从而促进血流和防上高血压（降血压功效）；⑿．防止肾脏释放出的血管紧张素转化酶所造成的血压升高；⒀．作为保护脑细胞的一道屏障，防止淀粉样β蛋白的形成、谷氨酸盐的毒性和自由基的攻击，从而预防阿尔茨海默氏病；⒁．通过对弹性蛋白酶和胶原蛋白酶的抑制使皮肤变得光滑而富有弹性，从内部和外部同时防止由于过度日晒所导致的皮肤损伤等等；⒂. 花青素可以促进视网膜细胞中的视紫质再生，预防近视，增进视力。
葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化
生研1002班姚远学号：2010001225葡萄籽中原花青素(OPC)的提取与纯化一、原花青素简介原花青素是一种水溶性色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。
花青素(Anthocyanins)是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一。
花青素为植物二级代谢产物，在生理上扮演重要的角色。
花瓣和果实的颜色可吸引动物进行授粉和种子传播。
常见于花、果实的组织中及茎叶的表皮细胞与下表皮层。
花青素属于酚类化合物中的类黄酮类(Flavonoids)。
基本结构包含二个苯环，并由3碳的单位连结(C6-C3-C6)。
花青素经由苯基丙酸路径和类黄酮生合成途径生成，由许多酵素调控催化。
以天竺葵色素(Pelargonidin)、矢车菊素(Cyanidin)、花翠素(Delphinidin)、芍药花苷配基(Peonidin)、矮牵牛苷配基(Petunidin)及锦葵色素(Malvidin)六种非配醣体(Aglycone)为主。
花青素因所带羟基数(-OH)、甲基化(Methylation)、醣基化(Glycosylation)数目、醣种类和连接位置等因素而呈现不同颜色。
[9]颜色的表现因生化环境条件的改变，如受花青素浓度、共色作用、液胞中pH値的影响(Clifford)。
橙色和黄色是胡萝卜素的作用。
1910年在胡萝卜中发现了β-胡萝卜素，以后共发现另外2种胡萝卜素异构体，分别是：α、β、γ三种异构体。
1958年β-胡萝卜素获得专利，目前主要从海洋中提取，也可人工合成。
[1]食品中几种重要花青素的结构自然界有超过300种不同的花青素。
他们来源于不同种水果和蔬菜如紫甘薯、越橘、酸果蔓、蓝莓、葡萄、接骨木红、黑加仑、紫胡罗卜和红甘蓝、颜色从红到蓝。
这些花青素主要包含飞燕草素（Delchindin）、矢车菊素（Cyanidin）、牵牛花色素（Petunidin）、芍药花色素（Peonidin）。
花青素颜色随PH值发生变化，从当PH值为3时的覆盆子红到当PH值为5时的深蓝莓红。
花青素提取方法
*花青素的提取:花青素的提取是目前花青素研究发展的热点问题，也是花青素生产、投入使用的关键性环节。
近年来，在传统提取方法的基础之上，一些凭借新技术或经过改良后的提取方法也开始崭露头角。
1有机溶剂萃取法这是目前国内外最广泛使用的提取方法。
多数选择甲醇、乙酮、丙酮等混合溶剂对材料进行溶解过滤，通过调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。
国内吴信子等用盐酸一甲醇溶液提取，然后用纸层析法(中号)和柱层析法(聚乙酰胺)进行花色苷的分离。
目前，有机溶剂萃取法已成功地应用于诸如葡萄籽、石榴皮、蓝莓等绝大多数含花青素物质的提取分离。
有机溶剂萃取法的关键是选择有效溶剂，要求既要对被提取的有效成分有较大溶解度，又要避免大量杂质的溶解。
该方法原理简单，对设备要求较低，不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。
2水溶液提取法有机溶剂萃取的花青素多有毒性残留且生产过程环境污染大，有鉴于此，水溶液提取应运而生。
该方法一般将植物材料在常压或高压下用热水浸泡，然后用非极性大孔树脂吸附；或直接使用脱氧热水提取，再采用超滤或反渗透，浓缩得到粗提物。
它是Duncan和Gilmour(1998)发明的提取花青素的方法，此方法设备要求简单，但产品纯度低。
3超临界流体萃取法超临界流体萃取是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。
这种方法产品提取率高，但设备成本过高。
孙传经采用超临界CO：萃取法从银杏叶、黑加仑籽及葡萄籽中提取花青素工艺进行了研究。
该工艺中CO 和改性剂可循环使用，对环境无污染。
4微波提取法该法于1986年被Ganzlert E9]等人首先用于分离各种类型化合物。
国内李风英探讨了微波技术对葡萄籽中原花青素提取量和分子结构的影响。
为微波在葡萄籽中有效成分浸提方面的研究奠定了基础。
微波提取法是利用在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到具有较小介电常数、微波吸收能力相对较差的萃取溶剂中。
黑米中花青素的提取
黑米中花青素的粗提取摘要：本课题以黑米为原料，采用水提法和酸化乙醇提取法对黑米中的花青素进行粗提取。
采用单因素试验考察了料液比、提取时间、提取温度、pH值及提取液浓度对花青素提取量的影响。
在此基础上，通过正交试验考察花青素的最佳提取工艺。
关键词：黑米；花青素前言化学合成的食用色素具有色泽鲜艳、稳定性好、成本低廉、制备简单等优点，在食品工业中得到广泛应用。
随着人们回归自然的意识日益增强，促使人类重新认识到天然色素作为食品添加剂具有不可代替的价值。
天然色素直接取自于自然界中的动植物和微生物，因而用于食品、化妆品及至药品更为安全可靠。
我国食品行业对合成色素与天然色素都有使用［１］。
但现代医学研究表明：合成色素作为食品着色剂可造成人体伤害。
因此，许多发达国家禁止在食品中使用合成色素，天然色素来源于自然，具有安全性，有的还有一定的营养和药理作用［２］。
开发天然色素取代人工合成色素作为食品着色剂是必然的发展趋势。
黑米是特种稻米，营养丰富，具有一定的保健作用，被认为是滋补佳品，有“开胃益中，健脾暖肝，明目活血，滑涩补精”等作用，历来深受东亚地区人民的喜爱。
研究证实，黑米所表现出来生理保健作用主要不是来自黑米中的膳食纤维、维生素和矿物质等营养素，而是与黑米皮中富含的花色苷色素有关［３］。
花色苷是自然界广泛分布的一种植物多酚，在大部分植物花瓣和果实种皮当中都不同程度的存在。
黑米成熟过程中，会在种皮内积聚大量花色苷色素，从而使其糙米呈现出棕红色、紫红色、紫黑色乃至黑色等颜色。
近年来的研究发现，花色苷类物质除了赋予植物丰富的色彩外，还具有抗氧化、抗炎、降血脂以及抑制肿瘤生成等生理功能，同时花色苷作为一种较为安全的天然色素，在食品工业也显示出了广阔的应用前景［４］，因而研究和开发利用黑米色素有良好的发展前景。
花青素分子中因存在高度分子共轭体系，易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂中，因此通常以含有少量盐酸或甲酸的乙醇为溶剂提取花青素。
花青素的提取方法
花青素的提取方法
花青素是一种天然的植物色素，可以通过以下几种方法进行提取：
1. 酸性提取法：将植物材料（如花瓣、果皮等）加入酸性溶液中，在较低的pH值下进行浸泡和加热。
酸性条件可以帮助破
坏细胞壁，释放并溶解花青素。
接着使用沉淀、过滤等技术将花青素分离出来。
2. 酮提取法：将植物材料与酮类溶剂（如乙酮、己酮等）进行冷浸提取。
这种方法对保护花青素结构和色素稳定性非常有效，并且能够提取出较高纯度的花青素。
3. 水提取法：将植物材料与水进行浸泡和煮沸，使用水溶性色素分离和提取技术将花青素从水中分离出来。
这种方法适用于那些对热稳定性较好的花青素。
4. 超临界流体提取法：将植物材料与超临界流体（如二氧化碳）进行萃取，利用超临界流体的温度和压力的调节，来提取和分离花青素。
这种方法对花青素的提取效果较好，但设备和操作要求较高。
以上是一些常见的花青素提取方法，具体的提取方法可以根据实际情况和需求进行选择和调整。
花青素的提取方法
花青素的提取方法花青素是一种天然的色素化合物，广泛存在于植物中，尤其是花朵、水果和蔬菜中。
它们不仅赋予植物丰富的色彩，还具有很高的营养和药用价值。
因此，提取花青素成为了科研和工业生产中的一个重要课题。
花青素的提取方法主要有以下几种：1. 酸碱法提取：通过酸碱处理，改变花青素的溶解性，使其从植物细胞中释放出来。
首先，将鲜花或植物材料加入酸性溶液中，使花青素变为阳离子形式溶解；然后，通过碱性溶液中和，使花青素重新转变为中性或阴离子形式，从而沉淀出来。
最后，通过离心、洗涤、干燥等步骤得到花青素提取物。
2. 溶剂提取法：利用溶剂的溶解性来提取花青素。
首先，将鲜花或植物材料切碎，并与适当的溶剂（如乙醇、甲醇等）混合，使花青素溶解于溶剂中。
然后，通过过滤或离心等方法，将溶液中的植物残渣分离出来。
最后，通过浓缩、蒸发等步骤，得到花青素提取物。
3. 超声波提取法：利用超声波的机械振动作用，破坏植物细胞壁，促进花青素的释放和溶解。
首先，将鲜花或植物材料与适量的溶剂混合，使花青素溶解于溶剂中。
然后，将混合物置于超声波提取仪中，通过超声波的作用，加速花青素的释放和溶解。
最后，通过离心、过滤等步骤，将提取液中的植物残渣分离出来，得到花青素提取物。
4. 膜分离法：利用膜的选择性透过性，将花青素从植物材料中分离出来。
首先，将鲜花或植物材料浸泡在适量的溶剂中，使花青素溶解于溶剂中。
然后，将溶液与具有特定孔径大小的膜接触，使花青素通过膜的透过性进入另一侧，而其他组分则被阻滞。
最后，通过蒸发、浓缩等步骤，得到花青素提取物。
除了以上几种方法，还有一些新兴的提取技术也被应用于花青素的提取，如微波辅助提取、超临界流体提取等。
这些方法在提高提取效率、缩短提取时间、降低成本等方面具有优势。
花青素的提取是一个复杂而关键的过程，在科研和工业生产中具有重要的意义。
不同的提取方法有着各自的特点和适用范围，选择合适的方法可以提高花青素的提取效率和纯度。
原花青素提取
原花青素提取
原花青素是一种天然的色素，存在于一些水果、蔬菜和植物中，如蓝莓、紫薯、紫甘蓝、红心莲雾等。
原花青素具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性，对人体的健康和预防疾病具有重要的作用。
原花青素的提取方法主要有以下几种：
1. 溶剂提取法：使用适当的溶剂（例如乙醇、甲醇、丙酮等）将植物材料中的原花青素溶解出来，然后进行过滤、浓缩、沉淀等步骤，最后得到纯化的原花青素。
2. 水溶性聚合物提取法：将适量的植物材料浸泡在水溶性聚合物（如聚乙烯吡咯烷酮）溶液中，利用聚合物与原花青素之间的亲和性，将原花青素吸附到聚合物上，然后经过水洗、离心等步骤，最后从聚合物中脱附得到原花青素。
3. 超声波提取法：利用超声波的震荡作用，加速溶剂与原花青素之间的质量转移，使得原花青素更容易被溶解和提取出来。
该方法操作简单、高效，可以快速得到较高纯度的原花青素。
值得注意的是，不同的提取方法可能适用于不同的植物材料和实验要求，选择合适的提取方法可以提高提取效率和纯度。
同时，提取过程中还应注意对材料的保护，避免影响原花青素的质量和活性。
花青素的提取方法与相关技术
本技术公开的属于口服饮料技术领域，具体为一种花青素的提取方法，该花青素的提取方法包括花瓣打碎、萃取、过滤、防腐处理和包装，重瓣红玫瑰花中富含花青素，但是一直没有人去开发利用它，本技术可以提取重瓣红玫瑰花中富含的花青素，并利用花青素来生产口服饮料，从而通过重瓣红玫瑰花的高花青素含量来满足口服饮料行业对花青素的高需求，本技术可以将重瓣红玫瑰花中的花青素充分的提取出来，从而避免了重瓣红玫瑰花的浪费，通过在花青素半成品中添加少量的柠檬酸，可以避免花青素成品在存储中被氧气氧化，而对青素半成品进行巴氏杀菌，可以降低花青素中细菌的含量，从而有效的延长花青素的保质期。
技术要求1.一种花青素的提取方法，其特征在于：该花青素的提取方法如下：步骤一：花瓣打碎，先使用流动水对重瓣红玫瑰花进行清洗，然后将清洗后的重瓣红玫瑰花放入打碎机中进行打碎；步骤二：萃取，向打碎机中添加蔗糖，然后使用打碎机继续对重瓣红玫瑰花进行打碎，当蔗糖完全溶解后得到混合溶液；步骤三：过滤，对混合溶液进行过滤，过滤可以得到固体和溶液，得到的溶液即为花青素半成品；步骤四：防腐处理，先在花青素半成品中添加柠檬酸，然后再对花青素半成品进行巴氏杀菌，得到花青素成品；步骤五：包装，将花青素成品装入包装桶中，并将其放入仓库。
2.根据权利要求1所述的一种花青素的提取方法，其特征在于：所述重瓣红玫瑰花为刚采摘下来的新鲜重瓣红玫瑰花花瓣。
3.根据权利要求1所述的一种花青素的提取方法，其特征在于：重瓣红玫瑰花放入打碎机中后，打碎机的转速的1000～2000r/min，10分钟后添加蔗糖。
4.根据权利要求1所述的一种花青素的提取方法，其特征在于：所述蔗糖与重瓣红玫瑰花的重量之比为1∶0.8～1.2。
5.根据权利要求1所述的一种花青素的提取方法，其特征在于：萃取时，打碎机内部的温度保持在40℃～50℃。
6.根据权利要求1所述的一种花青素的提取方法，其特征在于：当蔗糖完全溶解后，打碎机继续对混合溶液继续打碎，20～40分钟后关闭打碎机并对混合溶液进行过滤。
溶剂萃取法提取花青素工艺流程
溶剂萃取法提取花青素工艺流程1.首先将鲜花或植物材料放入提取器中。
First, put fresh flowers or plant materials into the extractor.2.加入适量的有机溶剂。
Add an appropriate amount of organic solvent.3.然后以适当的温度和时间进行浸泡。
Then soak at an appropriate temperature and time.4.使用搅拌器搅拌混合物，以增加提取效率。
Stir the mixture with a stirrer to increase extraction efficiency.5.过滤提取液以去除固体颗粒。
Filter the extract to remove solid particles.6.蒸发溶剂，使溶剂蒸发，留下花青素。
Evaporate the solvent, leaving behind the anthocyanin.7.对残留物进行干燥处理。
Dry the residue.8.最后得到纯净的花青素。
Finally, obtain pure anthocyanin.9.这是溶剂萃取法提取花青素的基本工艺流程。
This is the basic process of solvent extraction of anthocyanins.10.具体工艺流程可以根据不同的材料和要求进行调整。
The specific process can be adjusted according to different materials and requirements.11.溶剂萃取法是一种常用的花青素提取方法。
Solvent extraction is a common method of anthocyanin extraction.12.此方法可有效提取花青素，且操作简便。
花青素提取
桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。
1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。
1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。
1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。
1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。
1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。
1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。
提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。
方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。
按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。
注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
中图版高中生物选修1 4.1植物色素的提取教案设计
植物色素的提取【教学目标】1．了解植物色素的种类。
2．理解萃取法的原理，能选择合适的萃取剂。
3．能利用萃取装置提取胡萝卜素。
4．能利用纸层析法鉴定胡萝卜素。
5．初步学会提取辣椒红色素、番茄红色素或甜菜红色素。
【教学重难点】1．了解植物色素的种类。
2．理解萃取法的原理，能选择合适的萃取剂。
【教学过程】自主思考：根据胡萝卜素的溶解性特点，炒胡萝卜时宜多放油还是少放油？提示：由于胡萝卜素易溶于有机溶剂，为使较多的胡萝卜素溶解出来，从而有利于被人体吸收（溶解的胡萝卜素容易被人体吸收），炒胡萝卜时应多放些油。
二、实验室提取植物色素1．常用方法是萃取法。
用溶剂充分溶解植物材料中的色素后，滤去不溶残渣，经浓缩蒸馏掉溶剂，适度干燥便得到所需色素。
2．萃取剂的种类：（1）水：使用最广泛的溶剂。
（2）亲水性有机溶剂：指能与水混溶的有机溶剂，如酒精、甲醇、丙酮等，其中以酒精最常用。
（3）亲脂性有机溶剂：指不能与水混溶的有机溶剂，如石油醚、氯仿、乙醚等。
3．萃取剂的选择标准：（1）对色素成分的溶解度要大，对杂质的溶解度要小；（2）萃取剂不能与色素成分起化学反应；（3）萃取剂要经济易得，易与色素分离，使用安全；（4）一般水溶性色素用水作萃取剂，脂溶性色素用有机溶剂作萃取剂。
三、色素提取实例1．胡萝卜素的提取：（1）材料处理：将胡萝卜切成小颗粒，烘干，研成干粉备用。
烘干时控制好温度和时间。
（2）萃取：向胡萝卜干粉中加入四氯化碳或醋酸乙酯，用萃取和冷凝回流装置萃取，在瓶口安装冷凝回流装置是为了防止加热时有机溶剂的挥发。
（3）过滤：用定性滤纸过滤萃取液，除去不溶物。
（4）浓缩干燥：将滤液进行蒸馏，蒸发掉有机溶剂，留下浓缩的胡萝卜素提取液，放入烘箱烘干。
（5）鉴定：用纸层析法鉴定所提取的色素，可用标准样品作对照。
2．其他色素的提取：（1）从成熟辣椒中可以提取辣椒红色素。
辣椒红色素不溶于水，易溶于植物油和酒精。
在pH为3~12时，色调不发生改变，而且耐热、耐盐、耐酸、耐金属、耐微生物。
花青素提取方法总结课件
简单方法。其主要原理是依据花色苷的不同
基团的在不同的波长下有不同的吸收峰,进而
推断出其结构。
• ①B环有邻位羟基的确定。②糖基位置的确
定。③酰基是否存在的确定。④甲基化与羟
基化
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HPLC
• 高效液相色谱法( HPLC) 以经典的色谱法为基础,引入
提高23 %。H HP 具有提取温度低,时间短,不破坏色素
结构等优点,但应用于花色苷等活性成分提取的报道还
不多见。
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提取条件比较
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纯化
经过提取的花色苷粗品中往往含有很多有机
酸、糖等杂质,产品质量稳定性差、纯度不高
80℃时，温度对花色苷有较明显的降解作用；
• 光对花色 苷的稳定性影响 很大
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辅色剂的影响
花色苷同辅色剂联合形成一种垂直层叠的复
合物(Goto 等1979) ,这种层叠过程产生一种
疏水力,从而防止亲水核的加合作用和失色。
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提取方法：
一、萃取
素- 3-二丙二酸酰基葡萄糖苷。
• Zhao等对中国紫玉米杂交品种的籽粒进行了质谱分析, 初步发
现9个花青苷单体物质, 包括矢车菊素- 3-葡萄糖苷、天竺葵素
- 3-葡萄糖苷、芍药素- 3-葡萄糖苷、两个矢车菊素- 3-丙二酸
酰基葡萄糖苷同分异构体、天竺葵素- 3-丙二酸酰基葡萄糖苷
、两个芍药素- 3-丙二酸酰基葡萄糖苷同分异构体、天竺葵素
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桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。
1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。
1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。
1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。
1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。
1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。
1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。
提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。
方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。
按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。
注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。
2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。
分别称取2.0g酒渣，按液料比5、10、15、20、25、30加入相应体积的浸提溶剂，在40℃下避光提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。
取1mL清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对液料比作图，分析液料比对色素提取量的影响。
3温度对提取效果的影响分别称取2.0g酒渣置入5个50mL的三角瓶中，各加入浸提溶剂，搅拌5 min，用封口膜将瓶口密封并用铝箔纸包裹好以避光。
分别置于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃的恒温水浴上提取2h后，抽滤、离心(3000rpm，10min)。
取1mL上清液，用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对温度作图，分析温度对色素提取量的影响。
4提取时间对提取效果的影响每隔30分钟取样测得OD值。
用pH 1.0和pH 4.5的缓冲液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对时间作图，分析提取时间对色素提取量的影响。
5桑椹红色素酸性乙醇溶剂提取条件的正交试验根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以浸提溶剂中乙醇浓度、浸提时间、浸提温度、液料比为因素，安排4水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。
方法二超声波辅助提取桑椹红色素1超声波功率对红色素提取的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在30℃温度下，分别以200～700 W超声功率萃取20min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲液稀释(吸光值控制在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声功率作图，分析功率对色素提取量的影响。
2超声温度对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，以？W超声功率分别在20～60℃温度下萃取20min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλma x和700nm姗处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声温度作图，分析温度对色素提取量的影响。
3超声时间对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份，按液料比？分别加入？提取液，在？℃温度下，以？W 超声功率分别萃取5、10、15、20、25、30min。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对超声时间作图，分析时间对色素提取量的影响。
4桑椹红色素超声波辅助提取条件的正交试验根据单因素试验的结果，选取L9(34)正交试验表，以超声功率、超声温度、超声时间为因素，安排3水平做正交试验，以确定提取的最佳条件。
方法三微波辅助提取桑椹红色选择微波辅助提取温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ , 以微波功率500W、600W、700W、800W、900W,微波辐射时间2S、4S、6S、8S、10S以及液料比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1为单因素考察因素.选择其中重要的3因素进行正交实验。
最后HPLC分析：将三种方法所得到的产品进行HPLC分析，看其活性物质是否有变化，主要是后面两种方法是否对活性物质改变。
方法三超高压辅助提取桑椹红色1 压力对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；以不同压力100～500MPa进行加压3min，加压1次的处理。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对高压压力作图，分析压力对色素提取量的影响。
2 加压时间对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别以加压时间l～5min进行300MPa，加压1次的高压处理。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压时间作图，分析时间对色素提取量的影响。
3加压方式—间歇式对色素提取量的影响精确称取2.0g桑椹酒渣若干份放入超高压处理袋内，按液料比？分别加入？提取液，封口包装；分别加压1次(300MPa处理3min)、加压2次(300MPa处理1.5min，卸压，再300MPa 处理1.5min) 、加压3次(300MPa处理1min，卸压，再300MPa处理1min，再300MPa处理1min)。
抽滤、离心得到色素粗提液，用pH1.0和pH4.5缓冲溶液稀释(吸光值在0.2～0.8之间)，分别测定两种样品稀释液在ODλmax和700nm处的吸光值A，按公式计算花色苷含量，并对加压次数作图，分析结果。
方法四加入酶对红色素提取的影响未加酶；果胶酶0.1%；纤维素酶.01%；果胶酶0.05%+纤维素酶0.05%。
测定花色苷含量的方法有很多，经典的有薄层层析法、快速测定比色法、紫外吸收光谱(UV)等，现代的有红外吸收光谱、液相色谱(HPLC)以及核磁共振(NMR)、质谱(FAB)等。
除紫外吸收分光光度法外，其余方法均需要标准色素样品，测定的是某种花色营的具体含量。
这对于尚未确定组成的新样品的初步研究是一个难题，也给一般性的检验分析带来了困难。
花色苷是水溶性色素，根据比尔定律，溶液的浓度与其吸光度A成正比，因此在未有标准品时，可用紫外-可见吸收分光光度法测定总花色苷的含量。
花色苷含量主要有2种表示方法：色价及代入消光系数用公式计算。
由此可见，关键是吸光值A的测定。
综合国内外资料，主要有以下几种计算吸光值A的方法：(1)当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时，需消除叶绿素吸收含量的影响；此时，计算公式为：A=(A max－A620) －0.1(A650－A620)国内已有用此方法测定苹果果皮表面及山植果实中花色苷含量的报道。
(2)含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:直接法：在新鲜的植物提取物中，因为很少含有在花色营的最大吸收区发生吸收的干扰物质，花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。
计算公式为：A=A maxpH示差法：在食品加工或储藏过程中，会产生褐色降解物，这些降解物和花色普具有相同的能量吸收范围。
这类花色苷总量的测定，通常用pH示差法。
计算公式为：A=(A max－A700)pH1.0－(A max－A700)pH4.5本研究通过两种分光光度方法测定桑堪果汁中花色昔的含量，运用数学统计分析，比较得出了适合于桑椹中花色苷测定的简便、准确的方法，从而为其他样品花色苷含量的测定提供了一般性思路。
本实验样品采用的是桑椹果酒酒渣进行试验，故只需采用pH 示差法来测定总花色苷含量。
在食品加工或贮藏过程中，会产生褐色降解物，这些降解物和花色苷具有相同的能 量吸收范围，这类花色苷总量的测定，通常采用pH 示差法，计算公式为：A=(A max －A 700)pH1.0－(A max －A 700)pH4.5测定方法：将色素提取液，分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2～0.8之间)，并且将稀释液静置15min ，达到动态平衡后，分别测定两种样品稀释液在OD λmax 和700nm 处的吸光值A 。
参考植物生理学实验指及冯建光pH 示差法测定葡萄皮红色素含量的方法，以及结合霍琳琳等采用分光光度法测定桑椹花色苷含量，得到提取液中总花色苷含量的计算公式： m M n V A g mg TAcy ⨯⨯⨯⨯=ε)/( 式中：V 一提取液总体积(mL)；n 一稀释倍数；M —Cy-3-glu 的分子量(449．2)；ε一Cy-3-glu 的消光系数，其值为26900；m 一原料的重重(g)红色素稳定性研究1 pH 值对色素颜色的影响用柠檬酸、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠调色素溶液的pH 值为2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、 7.0、8.5，室温下用色差计观察溶液颜色变化，分析pH 值对色素颜色的影响。