南开大学《现代生物化学》(第二版)重点与课后答案
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第一章蛋白质化学(17学时)
【目的要求】
⒈ 掌握蛋白质的概念和化学组成;蛋白质的基本结构单位——氨基酸的分类及结构;蛋白质各级分子结构的内容和特点。
2.熟悉氨基酸、蛋白质的理化性质及分离鉴定方法。
3.了解蛋白质的分子结构与功能的关系及蛋白质一级结构的测定。
【教学内容】
第一节蛋白质通论
一、蛋白质是生命的物质基础
二、蛋白质的分类:形状;功能;组成;溶解度
三、蛋白质的元素组成
第二节蛋白质的基本结构单位——氨基酸
一、氨基酸的基本结构特征
二、氨基酸的分类及结构
三、蛋白质中不常见的氨基酸
四、非蛋白质氨基酸
五、氨基酸的理化性质
1.一般物理学性质
2.氨基酸的化学性质:酸碱性质,等电点
六、氨基酸的化学反应
1.茚三酮反应
2.亚硝酸反应
3. 2.4—二硝基氟苯反应(FDNB)
4.甲醛反应
5.二甲基氨基萘磺酰氯反应(DNS-Cl)
6.与酰化剂的反应
7.α-羧基的成酯反应
8.侧链基团参加的反应
七、氨基酸的分离和分析鉴定
1.蛋白质的水解
2.氨基酸的分离鉴定:离子交换柱层析,纸层析,薄层层析
第三节蛋白质的结构
一、蛋白质的一级结构
1.肽键和肽链
2.二硫键
3.蛋白质的一级结构测定
——片段重叠法
二、蛋白质的二级结构
1.酰胺平面和蛋白质的构
象:肽平面,双面角,构象,构
型
2.维持蛋白质构象的作用
力:氢键,离子键,范德华力,
疏水作用,配位键,二硫键
3.蛋白质二级结构的主要
类型:α-螺旋,β-折叠,β-拐
角,无规卷曲
三、蛋白质的超二级结构和结
构域
1.超二级结构
2.结构域
四、纤维状蛋白质结构
1.角蛋白:α-角蛋白,β-
角蛋白
2.胶原蛋白
五、蛋白质的三级结构三级
结构的特点:(1)(2)(3)(4)
六、蛋白质的四级结构四级
结构的特征:(1)(2)(3)(4)
(5)
第四节蛋白质的结构与功能
一、蛋白质一级结构与空间结
构的关系
二、一级结构与功能的关系
1.一级结构的微小差别可
导致生理功能的重大不同(镰刀
型细胞贫血症)
2.同功能蛋白质中氨基酸
顺序的种属差异与生物进化
三、蛋白质的空间结构与功能
1.蛋白质的变性与复性
2.胰岛素的结构与功能
3.血红蛋白与肌红蛋白的
结构与功能
4.免役球蛋白的结构与功
能
第五节蛋白质的理化性质
一、蛋白质的胶体性质
二、蛋白质的两性性质和等电
点
三、蛋白质的沉淀作用
1.可逆沉淀作用:盐析与
盐溶
2.不可逆沉淀作用
四、蛋白质的紫外吸收性质
五、蛋白质的沉降作用
第六节蛋白质的分离纯化与鉴
定
一、蛋白质分离纯化的基本原
则
二、细胞粉碎及蛋白质的抽提
三、蛋白质分离纯化的主要方
法
1.离子交换柱层析法
2.凝胶过滤法(分子筛)
3.亲和层析法
4.疏水层析法
5.蛋白质沉淀法:等电点
沉淀,盐析法,有机溶剂沉淀法
四、蛋白质分子量的测定
1.凝胶过滤
2. SDS-PAGE
五、蛋白质的纯度鉴定
1.电泳
2.等电聚焦:纯度,等电
点
六、蛋白质含量测定
1.紫外吸收法
2.染料结合法(Bradford)
[返回索引]第二章核苷酸与核
酸(13学时)
【目的要求】
1. 掌握核酸的化学组成; DNA
的分子结构及生物学意义; RNA
的种类及结构。
2. 熟悉核酸的理化性质; 核
酸的变性、复性和杂交。
3.了解核酸酶和DNA限制性内切酶的作用; DNA的一级构测定及核酸的分离纯化和鉴定方法。
【教学内容】
第一节碱基、核苷和核苷酸
一.碱基、核苷和核苷酸的结构与种类
1.碱基的结构与种类:嘌呤碱、嘧啶碱和一些稀有碱基
2.核糖的结构和种类
3.核苷的结构和主要核苷
4.核苷酸的结构
二.核苷酸的生物学功能
1.构成DNA和RNA
2.细胞中的携能核苷酸:ATP 和ADP
3.细胞通讯的媒介(第二信使):cAMP、cGMP
4.核苷酸是多种辅酶的组成成分
第二节磷酸二酯键与多核苷酸
一.核苷酸磷酸团的转移
二.多核苷酸的合成
三.多核苷酸链的简单表示
第三节碱基的性质
一.核苷酸的紫外光吸收性质
二.氢键的形成
第四节DNA的结构
一.DNA储存遗传信息的证实1.有毒肺炎双球菌转化实验
2.T2噬菌体标记实验
二.各物种 DNA有着独特的碱基组成(Chargaff等的研究结果)三.Watson-Crick DNA双螺旋结构特点
四.DNA的二级结构
1.A、B、Z模型
2.三种结构形成的原因
3.三种二级结构特点的比较
4.特殊的二级结构:回文结
构、H一DNA
五.DNA的三级结构(超螺旋结
构)
第五节RNA的种类和结构
一,RNA的种类
1.核糖体 RNA(rRNAs)
2.信息 RNA(mRNAs)
3.转移RNA(tRNAs)
二.RNA的结构
1.mRNA的结构:一级结构、
高级结构
2.tRNA的结构
3.rRNA的结构
第六节核酸的变性、复性和杂交
一.DNA的变性和复性:
1.DNA的变性
2.DNA的复性
3.DNA的淬火与退火
4.DNA的复性动力学
二.DNA的熔解温度(影响因素)
三.核酸的杂交:Southern blot
原理和方法
四.DNA聚合酶链反应(PCR)
原理和一般方法
第七节核酸的理化性质及化学
反应
一.核酸的紫外光吸收:克分
子磷消光系数
二.嵌合剂的作用(溴化乙啶、
丫叮橙、放线菌素D)
三.脱氨基作用和脱氧核苷酸
的水解
四.紫外线和一些化学因子对
DNA的损伤
五.DNA的酶法甲基化
第八节核酸酶和DNA限制性内切
酶
一.核酸酶的分类和特异性
二.限制性内切酶
三.限制性内切酶图谱
第九节DNA的一级构测定和化学
合成
一.DNA顺序的测定(双脱氧末
端终止法)
二.DNA的化学合成(亚磷酸三
酯法)
第十节基因和基因组(简单)
一.基因与基因组的概念
二.天然DNA分子的大小与顺
序特征
1.病毒DNA分子
2.细菌染色体DNA
3.细菌质粒DNA
4.真核细胞染色体DNA
三.DNA超螺旋结构
l.DNA超螺旋的基本概念:
正、负超螺旋,连系数(L),比
连系差(σ),
螺旋数(T),超螺旋数(W)
2.DNA拓扑异构酶:I型,
II型
四.人类染色体的包装过程:
第十一节核酸的分离纯化和鉴
定(简单)
一.核酸的分离
二.核酸的测定
三.核酸的超速离心
四.核酸的凝胶电泳
[返回索引]
第三章酶(12学时)
【目的要求】
1. 掌握酶的化学本质、组成、
酶反应特点、酶活力的概念和影
响酶活力的因素;
2. 熟悉酶促反应动力学;
3. 了解酶的命名、分类、酶活
性的调节、酶的分离纯化和活力
测定。