病毒学PPT课件

种类 产生细胞
免疫调节
I型 人白细胞 I I型弱
人成纤维细胞 弱
抗病毒 强
强
抗肿瘤 弱 弱 52
抗病毒特点
种的特异性、间接性、广谱性
抗病毒机理：
细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白 （蛋白激酶、2，-5，合成酶、磷酸二酯酶）
抗病毒意义：
早期中断病毒复制，阻止病毒扩散
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2．NK细胞的作用
NK细胞是一种不受MHC限制，也不依 赖抗体的具有杀伤作用的免疫细胞。
3.脱壳：在溶酶体蛋白水解酶作用下脱壳。
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4 . 生物合成： 病毒DNA多在宿主细胞核内合成核酸。RNA多在宿主细胞
浆内合成核酸。
5. 装配和释放： 在细胞核内或细胞浆内装配→核衣壳。 释放：A、“出芽”方式释放。
B、宿主细胞破裂。
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(二) 病毒的异常增殖
1、顿挫感染 非容纳细胞
特点：溶解病毒感染细胞 作用出现早 非特异性
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（二）适应性免疫的抗病毒作用 （特异性免疫）
1、体液免疫的抗病毒作用 中和抗体——可中和病毒的感染
（1）改变病毒表面结构或与病毒表位结合以阻止病 毒的吸附；
（2）与病毒形成免疫复合物有利于巨噬细胞的吞噬 和清除；
（3）有包膜病毒与抗体结合后，激活补体而使病毒 裂解。
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1、影响细胞的生命活力
（1、溶细胞效应（杀细胞性感染）： 病毒在细胞内增殖引起细胞裂解死亡 多见于无包膜病毒：脊灰病毒、鼻病毒、腺病毒
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溶细胞感染
CPE
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2、稳定状态感染：（改变细胞膜结构） 多见于有包膜病毒：流感病毒、疱疹病毒等
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稳定状态感染
为特异性抗体或 CTL细胞识别
新抗原
多核巨细胞
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①螺旋对称的病毒 粒子
Tobaco Mosaic Virus
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②二十面体对称病毒粒子
Adenovirus
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③复合对称的病毒 粒子
T4 Bacteriophage
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三、 病毒的增殖 一、病毒的复制周期
病毒无完整的酶系统，只能依靠宿主活细 胞，在原代病毒基因组控制下合成病毒核酸 和蛋白质，装配成子代病毒，以不同方式释 放出细胞外，再感染其他易感活细胞。
病毒与原核细胞型微生物的主要区别：
微生物分类 培养条件 核酸 核糖体 繁殖方式 抗生素敏感性 干扰素敏感性
非细胞型 活细胞 DNA/RNA 无 复制 不敏感 敏感
原核细胞型 多在无生命培基 DNA+RNA 有 无性二分裂 敏感 多不敏感
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第一节 病毒的基本性状
一. 病毒的大小与形态
病毒个体用纳米（nm）来量度。病毒的大小悬 殊， 直径在10～300nm之间，通常在100nm左右。较大的 病 毒如痘类病毒，其大小为250～300nm×200～50nm， 比最小的细菌支原体（直径200～250nm）还大。最小的病 毒如菜豆畸矮病毒，粒子大小仅为9～11nm，比血清蛋 白 分子（直径22nm）还小。
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第二节 病毒感染与机体的免疫性 一、病毒感染的途径与干扰类型 （一）病毒感染途径
1、水平传播(horizontal transmission)
病毒在人群不同个体间的传播，称水平传播。
呼吸道、消化道
人群 人皮群肤粘膜、医源性 27
通过皮肤传播：如经创伤、叮咬。 通过粘膜传播：如经呼吸道、肠道粘 膜、性接触等。 医源性传播：如经注射﹑输血、拔牙等传播。
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四、病毒的干扰现象 两种病毒同时或先后感染同一细胞时，
一种病毒的增值可以抑制另一种病毒增值 的 现象，称为干扰现象。
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五、理化因素对病毒的影响
灭活
• 病毒受理化因素作用后，失去感染性 • 灭活病毒仍保留某些特性，如抗原性、
红细胞吸附、血凝和细胞融合等
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（一）物理因素对病毒的影响
温度
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病毒的鸡胚接种示意图
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流感病毒
流感病毒
尿
囊
腔 再次 接 种
尿液 流感病毒+红细胞
血
血凝及血凝抑制试验 鉴定病毒
羊 膜
初次 羊水
腔
接
种
流感病毒+特异抗体 血凝被抑制
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鸡胚接种 64
常用的细胞培养
类型
原代细胞培养
二倍体细胞株
传代细胞系
名称
恒河猴肾细胞培养，人胚肾、肺等细胞培养， 鸡胚成纤维细胞培养
病毒的复制具有周期性，一个完整的病毒 周期包括：吸附、穿入与脱壳、生物合成、 组装与释放。
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吸附
穿入
病
毒
脱壳
周
期
生物合成
组装
释放
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1.吸附： 离子间吸附：阳离子（如Mg2+）存在，是随
机、可逆的吸附。 特异性吸附：与细胞上的相应受体结合。
2.侵入： 通过细胞膜吞入—— 病毒胞饮（主要式） 直接穿过、病毒囊膜与宿主细胞膜融合
WI-38（人胚肺细胞株），HL-8（恒河猴胚细 胞株）
Hela 细胞，Detroit 细胞（胸骨髓细胞系）， Chang C/I/L/K（人结膜 C，肠 I，肝 L 与肾 K 细胞系），Vero（绿猴肾细胞系），BHK-21 （幼地鼠肾细胞系）
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病毒的鉴定 病毒增殖指标 细胞病变效应(Cytopathic effect, CPE) 包涵体（Inclusion Bodies） 多核巨细胞
宿主细胞不能提供病毒复制所需的
酶、能量或成份。病毒虽被复制，但不 能装配释放
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2、缺陷病毒 病毒基因组缺陷
因病毒基因组不完整或有点突变而 不能进行正常复制的病毒，当与辅助病毒 共同培养，如能为其提供缺乏的物质，则 缺陷病毒也能培殖。
辅助病毒
• 腺病毒相关病毒（缺陷病毒）与腺病毒（辅助 病毒）
• 丁型肝炎病毒（缺陷病毒）与乙型肝炎病毒 （辅助病毒）
呈蝌蚪状（T2，T4，λ噬菌体），部分线状（fd、M13等）
或球状（MS2、φX174等）
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4
5
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二、病毒的结构和化学组成
主要由核酸和蛋白质组成。较复杂的病毒还含有脂类、 多糖等。
核衣壳（基本构造） 核心：由DNA或RNA构成
病
衣壳：由许多衣壳粒蛋白构成
毒 包膜（非基本结构）：由类脂或脂蛋白构成
1、体液免疫的病理作用 2、细胞免疫的病理作用 3、免疫系统的功能被抑制 4、自身免疫损伤
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三、机体的抗病毒免疫
（一）固有免疫的抗病毒作用 （非特异性免疫）
（二）适应性免疫的抗病毒作用 （特异性免疫）
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1、干扰素的抗病毒作用
定 义：
由病毒或其他干扰素诱生剂
刺激机体细胞所产生的
种 类：
一种具有抗病毒等作用
1、标本采集与送检
标本采集： 早期；不同病变取不同标本
标本处理： 无菌操作；杂菌标本+抗生素
冷藏速送： 快速送检；冷藏（-70 0C）
血清学标本： 取双份血清，效价升高4倍有诊断价值59
二、病毒感染的快速检查方法
1、形态学检查 光镜—大病毒、包涵体 电镜—直接电镜、免疫电镜
2、病毒抗原标志物的检查
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与人类肿瘤相关的病毒
病毒科
嗜肝DNA病毒 疱疹病毒
乳多空病毒
逆百度文库录病毒
与人类相关的肿瘤 病毒
肝细胞癌
HBV
鼻咽癌
EBV
Burkitt淋巴瘤
EBV
Kaposi肉瘤
HHV-8
乳头状瘤
HPV亚型
宫颈癌
HPV-16、 18
成人T细胞白血病
HTLV-1
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（二）病毒感染的免疫病理损害 —— 机体水平上致病机理
病毒在宿主细胞内增殖，引起明显临床 症状，称为显性感染。
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（1）急性感染： 感染时间短，宿主一般能将病毒彻底消
灭而恢复。
（2）持续感染： 病毒在宿主体内持续存在较长时间，甚至
终生，称为持续感染。 ▼ 慢性感染 ▼ 潜伏感染
▼ 迟发感染：慢发病毒感染
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（三）病毒在体内的播散
局部感染：如鼻病毒
全身播散：
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结果：细胞增生或恶性转化 （1）细胞增生：
病毒
细胞 细胞内DNA合成加快
可能与肿瘤的 发生有关
细胞增生
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（2）细胞转化 病毒 培养细胞
细胞形态变化 繁殖加快 成堆生长
细胞转化
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细胞癌基因：调节细胞生长、分化 病毒癌基因：
以前病毒的方式从细胞中获取
细胞癌基因——致癌因素——活化癌基因 ——细胞转化（转化细胞不一定发生癌变）
毒
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（二）化学因素对病毒的影响
脂溶剂：乙醚、氯仿、去氧胆酸盐 • 有包膜病毒敏感。无包膜病毒无作用（如肠道病毒）
消毒剂：过氧乙酸、甲醛、戊二醛、卤素 • 杀死大多数病毒，但病毒对消毒剂抵抗力比细菌 强，尤其是无包膜病毒 • 常用甲醛来制备灭活疫苗
其他 • 抗生素：对病毒无作用 • 中草药：有一定作用
形成凋亡小体——增加基因突变的机会
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SUCCESS
THANK YOU
2019/9/20
可编辑
5、细胞增生与转化 原因：病毒基因的整合
细胞核
细胞核
1、逆转录病毒复制时以DNA整合入细胞染色体中；
2、失常式整合，DNA病毒多见，病毒的DNA偶而以片
段整合入细胞的染色体DNA中。
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正常细胞
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CPE
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狂犬病毒包涵体（Negri body）
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巨细胞病毒包涵体
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形态学检查
光镜检查法
用光学显微镜直接检查某些细胞包涵体 巨细胞病毒包涵体 麻疹病毒感染形成多核巨细胞 狂犬病脑组织神经细胞胞质中包涵体 （Ｎegri 氏小体）等
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形态学检查
电镜检查法 用电子显微镜观察病毒颗粒的形态， 适于检查含高浓度病毒的标本 用于甲型肝炎病毒、轮状病毒等的检测
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抗体的中和作用
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有包膜病毒
激活补体
病毒裂解
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2、细胞免疫的保护作用
• 病毒性感染主要靠细胞免疫 • 致敏T细胞——CTL、TDTH • CTL：直接杀伤或破坏表面带有特异性抗
原的靶细胞 • TDTH ：再次接触病毒感染的细胞时，释
放多种细胞因子
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第四节 病毒感染的检查方法和防治原则
感染机体 系统
血流、淋巴系统或神经
向全身播散
靶细胞中的易感细胞。 如：麻疹病毒
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二、病毒的致病机理 （一）病毒对宿主细胞的直接作用
—— 细胞水平上致病机理
（二）病毒感染的免疫病理损害 —— 机体水平上致病机理
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(一)病毒对宿主细胞的作用
1、溶细胞型感染 2、稳定状态感染 3、形成包涵体 4、细胞凋亡 5、细胞增生与转化 6、病毒基因的整合
近年来利用特异性免疫血清与标本混合 孵育后，用免疫电镜法检测，提高阳性率 用于轮状病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、
疱疹病毒等的检测
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检查病毒性抗原
免疫荧光法（IFT） 可快速、早期检测难以培养的病毒， 如流行性出血热的汉坦病毒 上呼吸道上皮细胞内的流感病毒、腺病毒和呼
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2、垂直传播(vertical transmission)
病毒通过胎盘或产道，直接由亲代传给子代 的方式，称垂直传播。
病毒
经产道
母体
经血
新生儿 胎盘
显
隐
胎
受先流
性
性
儿29
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（二）病毒感染类型
1、隐性感染： 病毒在宿主细胞内增殖但不引起临床症状，
称为隐性感染或亚临床感染。
2、显性感染（急性感染与持续性感染）
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成熟的具有侵染力的病毒颗粒称为病毒粒子，在 电子显微镜下观察到的病毒粒子一般为球状、棒杆状、蝌 蚪状和线状等多种形态。人、动物和真菌的病毒大多呈球 状（如腺病毒、蘑菇病毒），少数为弹状或砖状（如弹状 病毒、痘病毒）。植物病毒和昆虫 病毒则多数为线状和 杆状（如烟草花叶病毒、家蚕核型 多角体病毒），少数 为球状（如花椰菜花叶病毒）。细菌病毒称噬菌体，部分
• 病毒耐冷不耐热。-70ºC长期保存。冻融可杀死病 毒
• 60ºC 30 min或100ºC数秒即可杀死病毒，但HBV需 100ºC 10 min方可杀死
• 有包膜病毒比无包膜病毒对热更敏感
pH
• 多数在pH 5~9范围稳定
• 肠道病毒耐酸（pH 3~5）
射线
X线、射线可将病毒核酸致死性断裂，从而杀死病
免疫标记技术—荧光素、放射性核素、酶 3、检查病毒抗体
ELISA——IgM
核酸杂交技术
4、病毒核酸的检测 Southern、Nouthern
PCR
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（三）病毒的分离培养
病毒的分离培养 动物接种（Animals） 鸡胚培养（Embryonated eggs）
组织细胞培养（Organ and tissue culture）
刺突（非基本结构）
衣壳粒是由一种或几种多肽链折叠而成的蛋白质亚单位，
衣壳粒的排列组合方式不同，使病毒表现出不同的 构型
和形状。
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病毒的基本结构：
核衣壳
衣壳
核酸 包膜 刺突
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三类典型形态的病毒： •廿面体对称 (球状) •螺旋对称 (杆状) •复合对称 (蝌蚪状)
大肠杆菌的T4噬菌体是由椭 圆形的二十面体头部和螺旋对称 的尾部组合而成，是病毒中复合 对称的代表。
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3、形成包涵体 概念：
有些病毒感染细胞，在普通显微镜下可 见胞浆或胞核内出现嗜酸性或嗜碱性、圆形或 不规则的斑快结构
意义： 病毒感染的鉴别
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狂犬病毒包涵体（Negri body）
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4、细胞凋亡： 诱导因子（如病毒等）
细胞 凋亡基因激活
细胞膜鼓泡
电泳时有 阶梯式条带
细胞核浓缩
染色体DNA降解