错配修复蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

错配修复蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义背景和目的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是消化系统常见的恶性肿瘤之一,发病率及死亡率分别居全球恶性肿瘤的第三位和第二位,其发生途径主要为染色体不稳定(chromosomal instability,CIN)途径和微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)途径,MSI结直肠癌是由于错配修复(mismatch repair,MMR)基因发生胚系突变、甲基化或缺失,出现DNA错配修复缺陷引起,12%左右与散发性结直肠癌相关,大约3%与Lynch综合征有关。

分析结直肠癌中四种常见错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6和PMS2的表达情况、微卫星不稳定CRC的临床病理学特征及临床意义,提高对该疾病的认识。

方法1.收集郑州大学第一附属医院2016年3月~2017年3月手术切除且术前未经放化疗确诊的,并具有完整临床资料的310例CRC病例。

2.采用免疫组织化学检测四种MMR蛋白在310例CRC中的表达情况,对其中部分病例采用MSI分子检测及MMR基因突变检测,并回顾性分析结直肠癌临床病理特征与MMR蛋白表达缺失(deficient mismatch repair,dMMR)情况的关系。

3.应用SPSS 17.0电脑软件进行统计学分析,计数资料采用χ~2或Fisher’s确切概率法检验,组间差异采用χ~2检验,检验水准α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义;相关性分析,采用Spearman秩相关相关性分析。

结果1.四种MMR 蛋白在CRC中的表达情况及相关性分析310例CRC中,58例表现为dMMR,缺失率为18.7%,MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白的表达缺失率分别为12.3%、2.3%、2.3%、1
4.8%。

58例dMMR中,MLH1与PMS2蛋白联合缺失33例(56.9%),MSH2和MSH6蛋白联合缺失4例(6.9%)。

Spearman相关性分析表明MLH1与PMS2的表达呈显著正
相关(r_s=0.758,P<0.05),MSH2与MSH6蛋白的表达呈显著正相关
(r_s=0.708,P<0.05)。

CRC中MMR蛋白常联合表达缺失,以MLH1与PMS2联合缺失为主。

2.dMMR和MMR表达正常CRC病例间临床病理特征的关系310例CRC,均经免疫组化检测,58例dMMR CRC中26例(44.8%)男性,32例(55.2%)女性;年龄从15~79岁,平均年龄56(±14)岁,中位年龄57岁,≤60岁33例(56.9%);肿物最大径≤5cm 37例(64.0%);右半结肠30例(51.7%),左半结肠11例(19.0%),直肠17例(29.3%);高分化1例(1.7%),中分化50例(74.1%),低分化7例(24.2%);黏液腺癌或含有较多细胞外黏液11例(19.0%);TNM分期Ⅰ-Ⅱ期37例(63.8%),Ⅲ-Ⅳ期21例(36.2%);淋巴结转移20例(34.5%),脉管癌栓22例(37.9%),神经侵犯12例(20.7%)。

dMMR/MSI-H结直肠癌与发生部位、分化程度、组织学类型及神经侵犯有关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿物大小、脉管癌栓、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05)。

3.四种MMR蛋白表达情况与临床病理特征的关系MLH1蛋白的表达在肿物发生部位间存在统计学差异(P<0.05);PMS2蛋白的表达在肿物大小、发生部位、分化程度间存在统计学差异(P<0.05);MSH2蛋白的表达在年龄、发生部位、分化程度组织学类型间差异有统计学意义(P<0.05);MSH6蛋白的表达在分化程度及组织学类型间存在统计学差异(P<0.05)。

4.部分CRC MSI分子检测及MMR基因检测310例结直肠癌中14例行MSI分子检测,7例显示MSI-H,7例显示为MSS。

16例行MMR基因突变检测,4例可见MMR 基因胚系突变,均表现为MSI-H,均有结直肠癌家族史,确诊为Lynch综合征。

结论1.结直肠癌中MMR蛋白常联合表达缺失,常见MLH1与PMS2、MSH2与MSH6联合缺失,以MLH1与PMS2的联合缺失为主;2.dMMR/MSI-H结直肠癌常发生于右
半结肠、以低分化为主,常为黏液腺癌或较多细胞外黏液,较少发生神经侵犯,MSH2蛋白表达缺失者发病年龄小,PMS2蛋白表达缺失者肿物可能较大;3.结直肠癌MMR蛋白的检测对于筛查Lynch综合征有帮助。