一例猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒混合感染病例的诊断及防治

一例猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒
混合感染病例的诊断及防治
陆亚男陈琦陈思思鞠龚讷杨德全邓波"
（上海市动物疫病预防控制中心上海201103）
［摘要&某猪场商品肉猪突发食欲减退、拉水样稀粪、发纟甘直至死亡&对该猪群2头病死猪进行病理剖检，无菌采集心、肝、脾、肺、胆汁等进行病原学检测，通过细菌分离鉴定及荧光PCR方法，检测到猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒核酸阳性,并根据血清学检测结果，建议采取隔离、封群和停止引猪，改变免疫程序和免疫剂量进行紧急接种，结合补充电解多维、淘汰和消毒等综合措施对该猪群进行治疗&
关键词：病原学检测；荧光PCR方法；猪瘟病毒；猪伪狂犬病病毒
生猪饲养过程中⑴，如出现食欲减退、腹泻）2*、发纟甘、腹式呼吸等症状，多为猪瘟病毒、猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒）3*、猪细小病毒等病毒感染，并有可能与细菌混合感染⑷+在诊断过程中，还需要根据发病情况和剖检情况,对弓形虫、附红细胞体「'*、寄生虫等进行检测，寻找病因，对症治疗+本文通过对一例临床上遇到的猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒混合感染病例进行综合诊断，旨在为类似病例的发生提供诊断和治疗的参考，并为猪场提供合理的免疫建议+
1发病情况
上海某猪场于2018年3月向散养户购买75kg 左右肉猪300头，3〜4d后开始陆续发病，发病50头，病死20头+肉猪在购买前10多天内，分别普免猪伪狂犬病和猪蓝耳病疫苗各1针，并在购买前3天个别免疫了猪瘟疫苗1针+疫苗厂商和批号均不明+发病过程中长期轮流使用恩诺沙星、氟苯尼考、磺胺类、青链霉素、黄罠多糖等药物+
2临床症状
某猪棚3个猪圈发病,病初身上有红点，使用磺胺间甲氧治疗无效+1〜2d后食欲减退，拉水样稀粪，伴有喘气、肌肉震颤等症状，使用伪狂犬疫苗普免后，无效+3d后耳朵和身上发纟甘，普免猪蓝耳病疫苗（弱毒苗）无效，部分猪吃屎不吃料。

免疫猪瘟脾淋苗效果不理想+送检时，圈里部分猪的耳朵、臀部发纟甘，部分拉稀，先水样、后黄色+
3病理剖检
送检的2头发病猪，1头消瘦，颈部注射部位有
为通信作者炎症，肺门淋巴结出血、肿胀，间质性肺炎，肺尖叶、副叶有胰样肉变，胃底黏膜出血，脾萎缩，边缘、背面出血性梗死，肾有少量出血点，肠内容物稀薄；另1头消瘦，被毛长，扁桃体有溃疡灶，腹腔因死亡时间长而腐败,有纤维素渗出+
4实验室检查
4.1细菌分离
无菌采集病死猪的心、肝、脾、肺、肾和脑部组织接种于哥伦比亚血琼脂（Oxoid公司提供），5% CO2培养箱中36°C培养24，均未见细菌生长；用肝、脾做组织触片，革兰染色，也未见细菌+
4.2荧光PCR检测
对采集的心、肝、脾、肺、肾和脑部组织进行混样，采用荧光PCR方法检测猪瘟病毒（H C V）、猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）猪伪狂犬病毒CPRV）和猪圆环病毒（PCV）核酸，以上检测试剂盒均由生科尚仪提供,仪器为赛默飞ViiA7实时荧光定量PCR仪+
经检测，组织样品中猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒荧光PCR检测结果为阳性，Ct值分别为21.52和7.83。

其他各项病毒荧光PCR检测结果均为阴性
4.3血清学检测
为了解猪群免疫情况，为下一步的诊断和预防工作提供参考，采集发病猪棚中的发病猪和健康猪（肉眼观察无病症）各5份血样进行血清学检测，分别用乳胶凝集方法检测猪细小病毒血清抗体和乙型脑炎血清抗体（武汉科前提供），用IHA方法检测猪弓形虫抗体（兰州兽医研究所提供），用ELISA方法检测猪瘟抗原（荷兰赛迪提供）、猪繁殖与呼吸综合征抗体、猪瘟抗体、猪伪狂犬gpI基因缺失抗体（均由美国IDEXX公司提供）。

试验结果表明，猪细小病毒血清抗体、猪乙型脑炎血清抗体、猪弓形虫抗体、猪瘟抗体均为阴性+其他抗体检测结果见表1,其中B-1.B-2……F为发病猪的血清J-U-2……_为健康猪（肉眼观察无病症）的血清+
表1血清抗体检测结果
样品编号
猪瘟
抗原
PP值结果判定
猪繁殖与呼吸
综合征抗体
S/P值结果判定
猪伪狂犬病gpI
基因缺失抗体
S/N值结果判定
B-1 1.352阳性1<130阳性0<504阳性
B-2 2.040阳性0<011阴性1<142阴性
B-3 1.803阳性1<203阳性1<581阴性
B-4 1.241阳性1<101阳性1<184阴性
B-5 2.010阳性0<001阴性0<163阳性
J-10.981阳性0<000阴性1<210阴性
J-20.522阳性0<901阳性0<302阳性
J-3 1.011阳性1<012阳性1<301阴性
J-40.023阴性1<201阳性1<332阴性
J-50.801阳性0<162阴性1<259阴性
根据上述发病情况、临床症状、病理剖检和实验室综合诊断结果，确诊由猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒混合感染引起的一例传染病+
5防治措施
对于猪瘟、猪伪狂犬病的治疗，尚无特效药物，目前较为有效的方式是紧急免疫接种+有报道显示，采取紧急接种疫苗，能取得良好的效果⑴*。

不同猪场猪群生长阶段和饲养环境不同，应分别采取不同的措施来综合应对。

该猪场确诊为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒混合感染后，首先进行了隔离、封群和停止引猪，及时淘汰发病猪，并在空棚铺洒生石灰，对空气、排污管道等进行消毒+全群拌料卡巴匹林钙和黄罠多糖粉，并在饮水中添加水溶性电解多维+同时,健康猪群按指定剂量加倍接种猪瘟脾淋苗，10d后再加倍接种猪伪狂犬疫苗；7d后，加强1次猪瘟免疫，再间隔7d加强1次猪伪狂犬疫苗免疫+由于猪颈部注射部位出现炎症和溃烂，为避免免疫失败，猪场改变免疫方式和注射部位:猪伪狂犬疫苗采用滴鼻和注射相结合，对仔猪超前免疫猪瘟疫苗+通过综合防治措施，猪场病情逐渐稳定+
6讨论
猪瘟（Classical swine fever,CSF）早称“猪瘟"（Hogcholera,HC），是一种高度接触性传染病，遍布于世界各地，世界动物卫生组织将此病列为A类传染病之一「9*,国内猪瘟难以控制的主要原因是种猪的持续带毒，在实验室的条件下，母猪可带毒750d,甚至可以终生带毒、排毒，血液中的含量可达到105〜106PFU/mL™o本病例检测出猪瘟病毒核酸阳性。

发病前6天个别免疫了猪瘟疫苗1针，发病后第3天加强免疫猪瘟脾淋苗1针，无效果。

从抽样的10份全血中猪瘟抗原检测结果来看，仅1头健康猪未检出猪瘟抗原。

发病猪与健康猪猪瘟抗原阳性猪群猪瘟抗原平均PP值无显著差异（8〉0.05）,说明猪群已普遍带毒。

免疫2次后，猪瘟免疫抗体的阳性率为0,这也是猪瘟难以控制的主要原因。

猪场后期应加强持续的免疫和消毒，避免猪群和环境持续带毒。

伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要特征的一种烈性传染病，我国将其列为二类动物传染病口1*。

本病例检测出猪伪狂犬病毒核酸强阳性，猪群在发病前10天免疫过1针猪伪狂犬疫苗，发病第2天又进行了1次猪伪狂犬疫苗普免，从抽样的血清抗体合格率来看，仅为30%，没有起到群体免疫保护作用。

从猪蓝耳病的免疫效果来看,0%的合格率也低于农业部免疫方案的要求,极易发生相关传染病。

猪场应找出原因，重新制定免疫方案，并结合血清学监测抗体效价,使各项免疫效果合格。

本病例中未分离到细菌，所用抗生素不仅没有起到治疗效果，还对猪产生应激，加重病情，这可能
（下转第59页）
3治疗
3.1治疗方案
静脉滴注：乳酸钠林格注射液80mLT法莫替丁10mg,氯化钠溶液60mLT头抱曲松钠0.3g,氯化钠溶液60mLT水溶性复合维生素B(1mL), 18氨基酸30mL,氯化钠溶液50mLT碳酸氢钠0.1g+皮下注射：恩诺沙星(拜有利)0.6mL,辉瑞止吐宁0.6mL(不吐停用),咲塞米0.2mL(尿量正常停用)+病犬恢复食欲或主动采食，则使用肾脏处方粮，食物必须低磷、低钠、低蛋白+
3.2治疗过程
第1〜3天：用上述方案治疗，该期间禁食禁水+患犬体温无变化+第.天：体温38.2U，对患犬做血常规、CRP、生化检查，发现血小板上升，白细胞升高，CRP略有下降，尿素氮、血糖以及肌N突然升高，小便量多，呕吐次数明显减少，怀疑可能是由于病情急性反弹+继续按上述方案治疗+第5〜6天:用上述方案治疗+第6天：体温恢复正常，血常规、CRP、生化结果显示各项指标都趋于正常，食欲和精神状态也渐趋正常且不再呕吐，小便正常，眼黏膜正常+第7〜8天：继续按上述方案输液+第8天:康复出院+
.小结与体会
4.1科学诊断
犬急性肾衰竭发病原因比较复杂，如饮食，药物，手术引发，病毒感染等+必须通过对患犬的临»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»(上接第57页)
是滥用抗生素的后果+解剖的2头猪颈部均出现了化脓和炎症，还有乳白色免疫佐剂潴留，可能是免疫频次、方式和针头的消毒不科学等引起，不仅花费了人力、财力和物力，还造成了应激，没有起到免疫效果，给猪场疫病的发生带来了潜在风险+
参考文献
［1］季伟.论生猪饲养常见病预防措施农民致富之友, 2019(2):156.
［2］昊元忠，贺学龙.猪流行性腹泻的诊断与防治中国畜牧兽医文摘，2017,33(6)194.
［3］李红艳.猪蓝耳病的临床症状及防控措施现代畜牧科技，2017(8):83.
［4］闫永海.猪瘟病毒、伪狂犬病毒与链球菌混合感染的诊治床、实验室及影像学等综合手段做出科学的诊断,本病例疑是药物中毒或饮食引起的急性肾功能衰竭，临床上应制定合理的治疗方案。

4.2合理治疗
早发现早治疗是治愈急性肾衰竭的关键,如错过最佳的治疗时间，有时急性会转变为慢性,最终导致尿毒症和蛋白尿的发生，直至死亡+急性肾衰竭的发生是体内的水、电解质、酸碱平衡失调等引起的+本病例通过使用乳酸钠林格注射液、氯化钠、碳酸氢钠大量补充体液、调节体内的电解质平衡，以防止脱水引起的酸中毒；使用头抱曲松钠、恩诺沙星抗菌消炎；用18氨基酸、水溶性复合维生素B补充体内营养；用法莫替丁保护消化道黏膜；用止吐宁止吐；用咲塞米利尿，并观察患犬的尿量+使用肾脏处方粮对患犬进行阶段性的饮食改善，以达到辅助治疗的作用+
4.3重在预防
在预防上应注重科学的饲养方式，做到饮食均衡、合理饲喂，培养良好的生活运动习惯+同时还应加强驱虫和预防性的疫苗接种+定期开展健康检查，做到早发现、早治疗、早康复+
参考文献
［1］夏咸柱，张乃生，林德贵，等.兽医全攻略一犬病［M］.北京：中国农业出版社,2009:360-361.
［2］陈孝文，江黎明，叶峰.急性肾功能衰竭［M］.北京：人民卫生出版社，2001：107〜10&
»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»»养殖与饲料,2019(1):79-81.
［5］张b雯，徐天勇，郑红，等.猪附红细胞体病的诊治［J］养殖与饲料，2017(11)：44-45.
［6］邓波，葛杰，沈莉萍，等.2例母猪流产病例的诊治上海畜牧兽医通讯，2014(3):9697.
［7］徐涤平，邓均华，梁望旺，等.猪瘟防控新思路及关键技术［J］湖北农业科学，2010,49(11)：2846-2850.
［8］冯嘉林，杨芝芬，毛爱民，等.生猪伪狂犬病的防控技术中国畜牧兽医文摘，2017,33(1)126.
［9］赵明礼，张智德，郑蕊蕊.一起伪狂犬和猪瘟的混合感染案例分析及防控措施畜牧兽医科学(电子版)2017
(2)：3-4
［10］苏景.猪瘟的流行病学、临床症状、诊断及防控措施［］.
现代畜牧科技，2016(12)117.
［11］邹敏,杨旭兵，郑辉，等.2012-2013年我国部分地区猪伪狂犬病流行病学调查中国动物检疫,2015,32(4)25.。