氟西汀干预对大鼠抑郁模型海马代谢的影响

氟西汀干预对大鼠抑郁模型海马代谢的影响
朱颖;王冬青;朱彦;李月峰;殷瑞根;赵亮;赵天
【摘要】目的探讨氟西汀干预对大鼠抑郁模型的海马代谢的影响.方法 45只SD 大鼠随机分为正常对照组(n=15)以及抑郁组(n=30).抑郁组又被分为干预亚组(n=15)及未干预亚组(n=15).采用慢性不可预知应激及孤养的方法建立抑郁模型.在制模成功后不干预亚组大鼠腹腔注射生理盐水2.0 ml/d,干预亚组大鼠腹腔注射盐酸氟西汀溶液5.0 mg/(kg·d)；均持续4周.于干预前后对各组大鼠进行氢质子磁共振波谱分析检查,并进行比较.结果抑郁组大鼠双侧海马N-乙酰天冬氨酸(NAA)/肌酸(Cr)及谷氨酸复合物(Glx)/Cr显著低于正常对照组,胆碱复合物(Cho)/Cr及肌醇(mI)/Cr显著高于正常对照组(P＜0.05～0.01).干预亚组双侧海马的NAA/Cr及Glx/Cr显著高于未干预亚组双侧海马的Cho,ho/Cr及右侧海马的mI/Cr显著低于未干预亚组(P ＜0.05～0.01).与干预前比较,干预亚组干预后双侧海马NAA/Cr及Glx/Cr显著升高(均P ＜0.05)；未干预亚组双侧海马Cho/Cr及mI/Cr显著升高,NAA/Cr及Glx/Cr显著降低(均P＜0.05).结论氟西汀能够改善海马神经细胞的谷氨酸循环及肌醇磷酸循环,恢复神经元及神经胶质细胞的功能.
【期刊名称】《临床神经病学杂志》
【年(卷),期】2014(027)001
【总页数】3页(P44-46)
【关键词】抑郁;氟西汀;氢质子磁共振波谱分析
【作者】朱颖;王冬青;朱彦;李月峰;殷瑞根;赵亮;赵天
【作者单位】212013镇江,江苏大学附属医院神经内科;212013镇江,江苏大学附
属医院影像科;212013镇江,江苏大学附属医院影像科;212013镇江,江苏大学附属
医院影像科;212013镇江,江苏大学附属医院影像科;212013镇江,江苏大学附属医
院影像科;212013镇江,江苏大学附属医院影像科
【正文语种】中文
【中图分类】R749.4
抑郁症是一种临床上较为常见的精神类疾病，严重的影响了人类的正常生活及社交，抑郁症状较重的患者具有自杀倾向［1］。

氟西汀是目前广泛应用于临床的有效抗抑郁药［2］，但是目前关于氟西汀疗效的评判多集中于行为学评分或者对患者临床症状的描述，主观性较强，且研究对象的年龄、性别及用药情况多不一致。

本研究利用3.0 T高场强MRI对抑郁大鼠模型海马进行氢质子磁共振波谱分析(1H-MRS)检测，对建模前后及氟西汀干预前后大鼠海马的各项代谢指标的变化进行比较，以探讨氟西汀干预对抑郁症的影响及意义，为其临床疗效评判提供较为客观的依据。

1 材料与方法
1.1 材料选取同一批次健康雄性SD大鼠(由江苏大学动物实验中心提供)，质量(180±5)g。

经1周适应性饲养，对大鼠进行行为学评分，挑取评分相近的大鼠45只，随机分为正常对照组(15只)及抑郁组(30只)。

抑郁组又分为干预亚组(15只)
及未干预亚组(15只)。

1.2 方法
1.2.1 饲养方法正常对照组大鼠采用共同饲养，正常给予食物和水，每笼15只;抑郁组大鼠采用单笼孤养。

1.2.2 抑郁大鼠模型的制备对抑郁组大鼠进行为期4周的慢性轻度不可预见性应激(CUMS)。

对大鼠进行的应激包括悬尾3 min、夹尾1 min、热应激(40℃)5 min、潮湿鼠笼 24 h、强迫游泳(4℃)5 min、电击足底1 min、禁食禁水24 h、行为限制120 min。

每天下午4时随机安排其中一种实验，以保证应激的不可预见性。

应激第4周末，对其进行糖水消耗实验、敞箱实验及Morris水迷宫试验。

以大鼠体质量显著下降、糖水摄入比例显著减少(快感缺乏)，垂直及水平运动得分显著下降(兴趣减退)及寻找记忆目标时间明显延长(空间记忆力减退)作为抑郁制模成功的
指标。

1.2.3 氟西汀抗抑郁干预治疗抑郁组大鼠在制模成功后采用共同饲养，并停止应激刺激。

不干预亚组大鼠腹腔注射生理盐水2.0 ml/d，干预亚组大鼠腹腔注射质量
浓度为1 mg/ml盐酸氟西汀(美国礼来公司)溶液5.0 mg/(kg·d)进行抗抑郁治疗;
均持续4周。

正常对照组大鼠不处理。

1.2.4 1H-MRS检查抑郁组大鼠于干预前后，正常对照组大鼠于相同时间点，采
用西门子3.0 T高场强MRI系统(型号:Magnetom Trio Tim)进行常规MRI扫描，包括T2WI、弥散序列及3D-CSI序列。

大鼠腹腔麻醉后，俯卧位固定，后肢先进线圈。

在T2WI对大鼠的双侧海马进行定位，选定兴趣区，避开颅骨、脑脊液等，利用多体素(MVS)3D-CSI序列对受试大鼠海马区进行1H-MRS扫描。

具体扫描参数为:TSET2WI:TR=3200 ms，TE=110 ms，FOV=77 mm × 85 mm;ME3D-
T2WI:TR=33 ms，TE=19 ms，FOV=120 mm ×120 mm;弥散序列:TR=3541 ms，TE=98 ms，FOV=202 mm ×202 mm;3D-CSI序列:TR=1700 ms，
TE=135 ms，体素体积为2.0×2.0×2.2 mm3。

扫描完成后使用随机程序LEONARDO进行基线、相位校正。

利用西门子工作站自带软件对检测数据进行处理，转化为波谱图像及数值，绘出N-乙酰天冬氨酸(NAA)、肌酸(Cr)、胆碱复合
物(Cho)、谷氨酸复合物(Glx)、肌醇(mI)的峰值，并以Cr值为参照物，记录
NAA/Cr，Cho/Cr，Glx/Cr及 mI/Cr的比值。

1.2.5 统计学方法采用SPSS 13.0软件进行统计学处理。

数据均以均数±标准差()表示;组间比较采用两独立样本均数比较的t检验，不同时间点数据比较采用配对t 检验。

P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 两组间1H-MRS检测结果的比较见表1。

与正常对照组比较，抑郁组大鼠双侧海马的NAA/Cr及Glx/Cr显著下降，Cho/Cr及 mI/Cr显著升高(P＜0.05～0.01)。

与未干预亚组比较，干预亚组大鼠双侧海马的 NAA/Cr及 Glx/Cr显著升高，Cho/Cr及mI/Cr显著降低(P＜0.05～0.01)。

2.2 抑郁组干预前后1H-MRS检测结果的比较抑郁组干预前后1H-MRS检测结
果见表2。

与干预前比较，干预亚组干预后的双侧海马NAA/Cr、Glx/Cr显著升
高(均P＜0.05);未干预亚组双侧海马Cho/Cr及mI/Cr显著升高，双侧海马
NAA/Cr及右侧海马Glx/Cr显著降低(均P＜0.05)。

表1 两组大鼠双侧海马1H-MRS检测结果()注:与正常对照组比较*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与未干预亚组比较△P＜0.05，▲P＜0.01组别左侧NAA/Cr Cho/Cr
Glx/Cr mI/Cr右侧NAA/Cr Cho/Cr Glx/Cr mI/Cr抑郁组(n=30) 1.38±0.08＊＊1.42±0.11＊＊1.16±0.11＊＊0.94±0.05＊＊1.39±0.08＊＊1.42±0.12*
1.13±0.11* 0.89±0.08*干预亚组(n=15) 1.46±0.14▲ 1.39±0.19△ 1.24±0.10▲
0.92±0.07 1.46±0.12▲ 1.39±0.16△ 1.21±0.12▲ 0.86±0.11△未干预亚组(n=15)
1.32±0.12 1.51±0.09 1.13±0.11 1.00±0.08 1.32±0.13 1.50±0.07 1.05±0.04
0.97±0.12正常对照组(n=15) 1.48±0.06 1.34±0.09 1.25±0.07 0.85±0.08
1.47±0.09 1.35±0.13 1.22±0.07 0.81±0.15
表2 抑郁组干预前后海马1H-MRS检测结果的比较(，n=15)注:与干预前比较*P
＜0.05组别干预前NAA/Cr Cho/Cr Glx/Cr mI/Cr干预后NAA/Cr Cho/Cr
Glx/Cr mI/Cr干预亚组左侧1.37±0.07 1.41±0.12 1.15±0.12 0.95±0.05
1.46±0.14* 1.39±0.19 1.24±0.10* 0.92±0.07右侧1.37±0.09 1.43±0.11
1.13±0.08 0.92±0.10 1.46±0.12* 1.39±0.16 1.21±0.12* 0.86±0.11未干预亚组左侧1.40±0.07 1.43±0.11 1.20±0.06 0.93±0.08 1.32±0.12*
1.51±0.09*1.13±0.11* 1.00±0.08*右侧1.40±0.06 1.41±0.13 1.13±0.14
0.88±0.08 1.32±0.13* 1.50±0.07*1.05±0.04* 0.97±0.12*
3 讨论
抑郁症患者主要表现为兴趣减低、快感缺乏及记忆学习能力下降等一系列临床症状［3］。

研究［4］证实，抑郁症患者的海马区代谢指标异常。

大量文献［5，6］证实，慢性不可预知应激联合孤养模式的建模方法较接近人类抑郁症形成的机制。

本研究联合慢性不可预知应激和孤养方式建立大鼠抑郁模型，通过对抑郁大鼠模型的海马进行1H-MRS检测，探讨氟西汀干预对抑郁症的影响及意义。

本研究结果显示，抑郁组大鼠双侧海马的NAA/Cr及Glx/Cr较正常对照组均显著下降，Cho/Cr及mI/Cr显著升高(P＜0.05～0.01)。

提示抑郁症的发生不仅仅是神经元的结构破坏和代谢异常，构成神经纤维的神经胶质细胞亦出现了异常，可能与抑郁状态下细胞膜磷脂代谢及胞内信号传导较正常健康状态下紊乱有关［7］。

氟西汀作为临床广泛应用的选择性五羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)类药物，通过抑制突触前膜对五羟色胺的再摄取，提高突触间隙五羟色胺的浓度而发挥作用，其临床疗效已得到证实［8］。

本研究通过影像学1H-MRS方法活体检测不同处理组大鼠海马神经细胞的代谢物水平，分析各代谢物水平的变化规律，推测氟西汀对神经细胞代谢及其功能的影响。

本研究发现，与未干预亚组比较，干预亚组大鼠双侧海马的NAA/Cr及Glx/Cr显著升高，但未达到正常对照组水平;双侧海马Cho/Cr及右侧海马mI/Cr显著降低(P＜0.05～0.01)。

与干预前比较，干预亚组干预后双侧海马 NAA/Cr、Glx/Cr显著升高(均P＜0.05);未干预亚组双侧海马Cho/Cr及
mI/Cr显著升高，NAA/Cr及 Glx/Cr显著降低(均P＜0.05)。

NAA/Cr及Glx/Cr 是反映脑组织内神经元代谢状况及谷氨酸能循环的重要指标［9］，干预亚组升高可能与氟西汀恢复神经元功能、重塑神经元有关，但仍低于正常对照组水平。

Cho/Cr及mI/Cr可以衡量神经胶质细胞包膜的完整性，其水平降低提示氟西汀干预对胶质细胞膜磷脂代谢异常的持续性及神经纤维的继续破坏有一定抑制作用。

Sairanen等［10］在SSRI类药物治疗抑郁症的研究中指出，经过治疗，患者的临床症状及行为学评分最终得到改善，表明SSRI类药物对抑郁症患者的神经功能恢复是有效的。

综上所述，抑郁症患者有不同程度的神经细胞功能异常，氟西汀等SSRI类药物能通过改善神经细胞功能及其代谢达到治疗抑郁症的目的。

但本研究样本量较小及研究方法较为局限，尚待进一步改进。

［参考文献］
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［9］Venkatraman TN，Krishnan RR，Steffens DC，et al.Biochemical abnormalities of the medial temporal lobe and medial prefrontal cortex in late-life depression［J］.Psychiatry Res Neuroimaging，2009，172:49.
［10］Sairanen M，O'Leary OF，Knuuttila JE，et al.Chronic antidepressant treatment selectively increases expression of plasticity-related proteins［J］.Neuroscience，2007，144:368.。