血浆蛋白粉的质量评估

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上层有大量胶状不溶物样品常规指标样品常规指标样品常规指标样品常规指标标号生产商粗蛋白灰分水分溶解度apc血浆7828488949100北京73512348045400上海78610125289500上海708115911675600武汉71824671066800溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法溶解度的评估方法样品常规指标样品常规指标样品常规指标样品常规指标标号生产商粗蛋白灰分水分溶解度apc血浆7798488949500上海71717918049600上海70411736946000武汉736115912635200武汉71624671336000天津69826746944800凝胶实验凝胶实验凝胶实验凝胶实验凝胶实验凝胶实验凝胶实验凝胶实验功能成分功能成分评估方法评估方法功能成分功能成分评估方法评估方法iggigg功能性成分iggigg的含量的含量行业急需解决的问题血浆中igg的检测方法1sds电泳法2hplc法高效液相色普3免疫扩散法4夹心elisa法5cobasmira全自动生化分血浆来源igg含量ap920162武汉73天津805武汉华达1282上海11541关于sds电泳利用蛋白质与sds按重量比形成复合物消除了不同蛋白质分子的电荷效应使蛋白质分子的相对迁移率取决于分子量的大小与标准蛋白质比较推算未知蛋白质的分子量或从已知蛋白质的分子量确定电泳条带
1.82mg/kg
1.01mg/kg -
氨基酸分析评估方法
Product 天冬氨酸 苏氨酸 丝氨酸 谷氨酸 甘氨酸 丙氨酸 胱氨酸 缬氨酸 AP920 7.01 4.42 4.36 11.54 2.8 4.88 2.72 4.83 Shanghai JL 6.11 3.14 3.3 10.54 8.65 6.38 1.66 3.85 Wuhan NB 7.02 4.69 4.68 10.35 2.57 4.28 2.38 4.62 水解皮革粉 4.66 0.64 1.32 9.9 19.44 7.33 0.94 2.13 大豆分离蛋白 9.44 2.89 3.92 14.5 4.28 3.24 0.88 3.18
称10g血浆粉配90ml水,置于100ml离 心管中,震荡20分钟,静置8小时, 观察沉淀 物、悬浮物及溶液透明度。(可利用观察光 源营造标准观察环境)
感观评估方法
溶解度(沉淀系数)的评估方法
溶解度(沉淀系数)的评估方法
溶解度的评估结果
A样品:刚放入量筒中无沉淀液体,过30钟后上面有不溶物 产生.过夜后溶解度为91%, B样品:刚放入量筒中就有很多点状不溶物,悬浊液,过2分 钟后就有沉淀产生.过夜后溶解度为54%,凝胶状, 沉淀为暗灰色. C样品:刚放入量筒中无沉淀液体,过30钟后上面有不溶物 产生,过夜后溶解度为95%. D样品:刚放入量筒中就有很多点状不溶物,过夜后溶解度 为56%,凝胶状,沉淀为暗灰色,且有黑色斑点. E样品:刚放入量筒中就有不溶物,过夜后溶解度为68%.
气味 性状、质地
固有的猪血腥味,无腐败变质气味 无定型粉状、无结块、无杂质,无黑色焦粒
感观评估方法
溶血
感观评估方法
镜检评估方法
检查产品中是否有杂质、焦粉等。
配备400倍、具有透射光源的生物显微镜;取少量样品于载玻片上并 用盖玻片覆盖,并布满盖玻片覆盖范围。观察记数盖玻片覆盖范围内的杂 质及焦粉。
2.46 4.6 5.18 81.8
5.16
1.86 4.93 7.92 79.47
6.29
2.21 4.26 4.06 76.25
2.16
0.54 5.46 13.36 74.45
5.58
2.44 6.09 4.28 78.6
第三部分
注意事项
优质血浆的基本评估
优质血浆蛋白粉应该是:
1、溶解后沉淀物少、不出现悬浮物,蛋白质
血浆铁含量的检测结果

2008-1-9
检测单位:上海市饲料质量监督检验站 铁含量(ppm) 89.8 121
APC血浆 武汉血浆
优质血浆蛋白粉在 镜检时每片视野不得 超过3个杂质及焦粉颗 粒。
相关链接
1、蛋白质焦化变性,失去了原 有的营养价值,使机体得不到 应有的营养补充, 2、可能转化为对机体细胞具有 致突变性及致癌性的化合物。
镜检评估方法
镜检评估方法
镜检评估方法
镜检评估方法
常规指标评估方法
AP920数据 国产血浆数据
检测产品的病原微生物、药物、重金属等指标
定性定量检测产品的功能性成份 检测产品的成份组成,以便剔除蛋白来源不纯的 产品。
第二部分
评估方法
感观评估方法
感观:检查颜色、性状、质地、气味、密度等
将样品放置在白瓷盘内或白纸上,在非直射日光充足处,检查产品 色泽、流动性、气味和密度。
优质血浆蛋白粉 颜色 淡红色、灰白色、淡黄色
溶解度的评估结果
A、溶解度为91%.上层有少量液态不溶物
B、溶解度为54%.上层有凝胶状不溶物 C、溶解度为95%.上层有少量胶状不溶物 D、溶解度为56%.上层有胶状不溶物 E、溶解度为68%.上层有大量胶状不溶物
样品常规指标
标号 1 2 3 4 5
生产商 APC血浆 北京×× 上海×× 上海×× 武汉××
血浆蛋白粉 质量评估
上海格劳瑞国际贸易有限公司 技 术 部
前 言
血浆蛋白粉是一种富含免疫球蛋白等功能 性的蛋白原料,应用已经超出普通蛋白饲 料的应用范畴。对其质量评估,核心是评 估其蛋白质变性与否、功能性成分IG含量 以及是否含有其它搀杂物 工艺条件、质量控制技术能力和管理控 制是产品质量的决定性条件!
IgG评估方法二
2、HPLC法(高效液相色普法)
在HPLC上,通过蛋白G柱对样品中的免疫球蛋白进行特异性吸附,再 洗脱吸附的免疫球蛋白,比较样品洗脱峰面积与标准免疫球蛋白洗脱峰面 积计算样品中的免疫球蛋白含量。此法为目前国标测定人保健食品中IgG含 量的方法,测定血浆蛋白粉中的IgG含量同样适用。
05080201v75:1_UV1_280nm 05080201v75:1_Inject
mAU 3000
0.8 2500
0.6 2000
1500
0.4
1000
0.2
500 0.0 200.0 210.0 220.0 230.0 ml
IgG评估方法三
3、关于单向免疫扩散法
利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应,扩散作用使滴加的猪IgG与琼
指标名称
水份 粗蛋白 灰份 盐份(以cl 计)
数值
5%-8% 76%-78% 6-8% ≤1.1%
指标名称
水份 粗蛋白 灰份 盐份(以cl 计)
数值
8%-10% 70%-74% 12%-16% ≤4.0%
溶解度评估方法
表现为 不溶
水溶性:透明度、沉淀物、悬浮物
评估核心 蛋白质变性?
优质血浆蛋白粉水溶性 好,溶液透明度高,蛋白 质变性少。
1 2
3 4
APC血浆 上海××
上海×× 武汉××
77.9 71.7
70.4 73.6
8.48 17.91
11.73 11.59
8.04
6.94 12.63 52.00 0.00 48.00
5
6
武汉××
天津××
71.6
69.8
24.67
26.74
1 2 3 4
号号号号 武天北美 汉津京国
蛋氨酸
异亮氨酸 亮氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸
0.67
2.42 8.36 3.78 4.25
0.68
1.97 6.57 2.59 3.39
1.13
1.82 7.91 3.31 3.77
0.84
1.1 2.69 0.38 1.56
1
3.52 6.08 2.86 4.42
赖氨酸
组氨酸 精氨酸 晡氨酸 总计
6.6
粗蛋白 78.2 73.5 78.6 70.8
灰分 8.48 12.34 10.12 11.59 24.67
水分 8.94 8.04 5.28
溶解度 91.00 54.00 95.00 56.00 68.00
11.67 10.6
71.8
溶解度的评估方法
溶解度的评估方法
样品常规指标
标号 生产商 粗蛋白 灰分 水分 8.94 溶解度 95.00 96.00
变性少。
2、IgG含量高(≥16)且稳定.
3、不含有其它原料组分.
影响血浆蛋白粉颜色的因素
1、血浆蛋白粉的颜色(具体变化规律请见下一页面)与
工艺密切关联,为充分保证功能性成份的活性,不可能刻 意追求产品颜色而改变针对保证功能性成份的活性而设计
的生产工艺。
2、科学判定因溶血所引起的血浆蛋白粉颜色的变化, 通 过测定铁含量来定量判断。
评估流程
感 基 本 评 估 项 目 卫 生 指 标 功能性指标检测 组份检测
红线部分任何一项不达标 均舍弃

检查产品的颜色、流动性、气味、密度等 检查产品中是否有杂质、焦粉等 检测产品的粗蛋白、水份、灰份等营养成份 检测产品的水溶性、透明度、沉淀物、悬浮物等


血 浆 评 估 体 系
APC
常规指标检测 溶解度检测
y = 2.5 -0.9833x + 2.8644 R 2 = 0.9989 2
稀释倍数对数值
1.5 1 0.5 0 0 1 2 3 OD平均值
IgG测定标准曲线猪标准血浆稀释度0, 160,80,40,20,10,5,2.5千倍
IgG评估方法五
COBAS-MIRA全自动生化分析仪

美国APC公司使用
卫生指标评估方法
检测方法
1、定期送检病原微生物或药物残留指标。 2、通过微量PCR检测牛羊等其他动物成份。 3、定期送检违禁药品及重金属
指标名称 口蹄疫病毒 伪狂犬病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 圆环病毒 附红细胞体 猪瘟病毒 牛羊成份
细菌总数 沙门氏菌
数值 未检出
符合国家饲料卫生标准 未检出

砷 盐酸克伦特罗
1、SDS电泳法 2、HPLC法(高效液相色普法) 3、免疫扩散法 4、夹心ELISA法
武汉华达
上海
12.82
11.54
5、COBAS-MIRA全自动生化分 析仪
IgG评估方法一
1、关于SDS电泳
利用蛋白质与SDS按重量比形成复合物,消除了不同蛋白质分子的电 荷效应,使蛋白质分子的相对迁移率取决于分子量的大小,与标准蛋白 质比较,推算未知蛋白质的分子量,或从已知蛋白质的分子量确定电泳 条带。此法可对血浆蛋白粉中的IgG含量进行定性判定。
: : : :
APC XX XX XX
凝胶实验
1 2 3 4
号号号号 武天北美 汉津京国
: : : :
APC XX XX XX
凝胶实验
功能成分评估方法-IgG
“功能性”成分IgG的含量
血浆来源
AP920 武汉 天津
IgG含量(%)
16.2 7.3 8.05
行业急需解决的问题-血浆中IgG的检测方法
脂凝胶中的适合配比的兔抗猪IgG抗体或羊抗猪IgG抗体结合形成大分子
抗原-抗体复合物而出现沉淀现象,形成沉淀环。此法可比较直观地反应 血浆粉中IgG的活性,但不适宜定量检测。
IgG评估方法四
4、关于夹心ELISA法
抗体的活性依赖于其天然结构的保持,抗体变性就丧失活性。利用双 抗体夹心ELISA法可以测定血浆蛋白粉中抗体天然结构的保持情况,从而推 断血浆蛋白粉中免疫球蛋白(抗体)的活性保持情况。此法可对活性免疫 球蛋白进行定量。
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