血府逐瘀汤对抑郁模型小鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

“JU山岛中医药大学学报实验中医药学
2021年第22#第2期•“实验”虽然是现代科学研究常用的方法，然在我国7自古有之。

古代学者王冲说“等类众多，FGHI,略举较著，以定实验也”，顾之推说“昔在江南，v信有干趙人Z,及来］北，不信有二'a船，皆实验也”，e凡ghi与现代科学 意h上的experiment相通。

照g,传统中医药学并非只是经验之学，而更充满实验的思想和方法。

实验中医药学，现代实验科学的方法和传统中医药学的实验方法来，现代实验学、医学和药物科学的
血府逐瘀汤对抑郁模型小鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响
王永杰1,刘广超2,王慧娟1,许雪春1,张丽娜1,李二贤1,赵凤玲1
（1.河南省职业病防治研究院,河南省第三人民医院，河南郑州450052；2.河南中医药大学第一附属医院，河南郑州450000）
摘要目的:观察血府逐瘀汤对慢性不可预知性温和应激（C8MS）抑郁模型小鼠行为学及脑内单胺类神经递质水平变化的影响，探讨血府逐瘀汤的抗抑郁作用及其机制。

方法:40只雄性CUMS抑郁模型小鼠随机分为正常对照组、模型组、血府逐瘀汤组和盐酸氟西汀组。

除正常对照组外，其余3组小鼠均给予CUMS刺激，持续刺激3周制备抑郁模型。

模型制备成功后，正常对照组、模型组使用生理盐水灌胃；血府逐瘀汤组小鼠按10.14g/kg（含生药1g/mL）剂量灌胃血府逐瘀汤；盐酸氟西汀组小鼠按剂量10mg/kg（0.1%的盐酸氟西汀给药体积为10.14mL/kg）灌胃盐酸氟西汀，每天2次，各组小鼠连续灌胃给药14d，于末次给药后测定各组小鼠自主活动次数、悬尾与强迫游泳不动时间；并取脑组织测定单胺类神经递质，检测去甲肾上腺素（NE）、5-務色胺（5-HT）、多巴胺（DA）水平变化。

结果：与正常对照组比较，模型组小鼠水平运动次数、垂直运动次数均显著降低；悬尾不动时间、强迫游泳不动时间显著增加；小鼠5-HT、NE、DA含量显著降低（；＜0.01,；＜0.05）。

与模型组比较，血府逐瘀杨组小鼠水平运动次数、垂直运动次数均显著增加；悬尾与强迫游泳不动时间显著降低;脑组织中NE、5-HT、DA水平明显升高（；＜0.01,；＜0.05）。

结论:血府逐瘀汤具有明显的抗抑郁作用，其机制与上调脑内单胺类神经递质水平有关。

关键词抑郁症;血府逐瘀汤；单胺类神经递质;去甲肾上腺素;5-務色胺；多巴胺；实验研究
中图分类号:R285.5文献标识码：A D01：10.19763/ki.2096-7403.2021.02.05
Effects of Xuefu Zhuyu decoction on behavior and monoamine neurotransmitters of depression mice model
Wang Yongjie1,Liu Guangchao2,!ang Huijuan1,Xu Xuechun1,Zhang Lina1,Li Erxian1,Zhajo Fengling1
(*.Henan Provincial Institute of Occupational Health,The Third People's Hospital of Henan Province, Henan Zhengzhou450052; 2.The First Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Me d ic ine,He nan Zhengzhou450000$
Abstract Objective:To study the effects of Xuefu Zhuyu decoction on the behavior and monoamine neurotransmitters of chronic mild unpredictable stress(CUMS)depression mice model and investigate its anti-depression effect and mechanism.
Methods:Forty Kunming mice were randomly divided into normal control group,depression model group,Xuefu Zhuyu de­coction group and fluoxetine hydrochloride group.Execpt the normal control group, the other three groups of rats were giv­en CUMS to stimulate the production of CUMS depression model, then gavaged therapeutic drugs respectively for14 d.
Mice in each group were measured the number of independent activities, the time of tail suspension and forced swimming.
All the mice were killed to get the brain to test the levels of NE,5-HT,DA by ELISA.Results:Compared with the normal group,the time of horizontal exercises and vertical exercises in the model group were reduced; the immobility time of tail suspension and the time of forced swimming immobility were increased;the content of5-HT,NE,and DA in mice were decreased(P<0.01,P<0.05).Compared with the depression model group,the time of horizontal exercises and vertical exer­cises were increased in the Xuefu Zhuyu Yang group;and the time of tail suspension and forced swimming were reduced in Xuefu Zhuyu decoction group,and the contents of NE,5-HT,DA were increased in Xuefu Zhuyu decoction group(P<
0.01,P<0.05).Conclusion:Xuefu Zhuyu decoction has a better anti-depressant effect whose mechanism is related to in­
creasing the level of monoamine neurotransmitters in the brain.
Key words depression; xuefu zhuyu decoction;monoamine neurotransmitters;NE;5-HT;DA;experimental research
［基金项目（国家临床重点专科建设项目（201117）;河南省重点科技攻关项目（142102310086）
［作者简介］王永杰,主治医师，医学硕士,Email:****************
［通讯作者（赵凤玲，主任医师,Email：*****************
』也中匡^二号号*.实验中医药学2021Vol-22No-2
抑郁症是以情绪低落为主要特征的一类心理疾病，主要表现为持久情绪低落、思维迟缓、精力下降、食欲不振、性欲减退、睡眠障碍等⑴。

随着人们生活压力的增加，抑郁症的发病率越来越高,已成为威胁人类健康的重大问题3"。

该病属多因素疾病，病因复杂，发病机制涉及生理、心理、社会等多方面，尚未完⑸。

以、心理、理等方，一的缓解作用，但不良反应多，从性，复发。

因此，的治方为重要。

情病的，
，该38疾病，
等。

，
等情病的。

情
，病，病因病机，、抑郁、障碍，
生，
、情、等。

的，抑郁症加
的研究。

抑郁症属郁症”“百病”“脏等范畴!6-8"，以情所伤、气机郁滞为主要病因,病机主要是气机紊乱、五脏气血失调，以疏肝理气、活血化瘀等为主。

因，本研究选用血府逐瘀 汤进行研究，该方王清任的林改错》，方由桃红四物汤四逆散加桔梗、牛膝而成，具疏肝理气、活血化瘀之功，契抑郁症之病机。

本实验以昆小鼠为象，探讨血府逐瘀汤对抑郁小鼠行为及脑单胺类神递质的影响，为血府逐瘀汤抑郁症的应用供据。

1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物本研究选用40只雄性4〜6周龄SPF昆明种小鼠,体质量（20±4）/,购河南省实验动物中心，合格号:SCXK（豫）2015-0004，饲养河南大动物实验心，饲养温度15〜26#、湿度40%〜70%的环境，并采用自由采食、饮水。

1.1.2实验仪器高速离心机（安徽中科中佳科
，号:HC-2064）；小鼠主活动（（成技有限公司，号:ZZ-6）；电子恒温水浴锅（余布表，号:DZKW-C）康健用
，型号：XH-D）
，型号:MULTISKAN FC）电子二电子，号:JT601N）；电子
多，号: BSA224S）。

1.1.3药品与试剂盐酸氟西汀胶囊（常州四药制，批号：H19980139）;5-胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）测定试剂盒（北京索技，号:fk1983Y）
素（norepinephrine，NE）南京建成生研究所，号:H096）多胺dopamine，DA）南成生研究所，号:H170）;血府逐瘀汤方桃、红、当、生、、、牛膝、桔梗、、、
）购河南大一属，3
1.2实验方法
1.2.1动物分组所有40只大鼠适应性喂养14d
，随机为、、血府逐瘀汤
，4组。

1.2.2药物制备制备血府逐瘀汤煎剂，勺物由桃12/，红9/，9/,生9/， 4.5/，赤芍6/,牛膝9/,桔梗4.5/,柴胡3/,枳壳6/, 6/成。

研究所购河南大一属，3r所有清，1h,锅，，
40min，，成1/生的
用。

1.2.3造模与给药40只小鼠除正常对照组外，
余30只小鼠选取3〜4个应激因子进行慢性不可预知性刺激（CUMS）o研究选用的应激因子主要是12h禁食、12h禁水、12h45°倾斜饲养、夹尾（距尾根1cm处夹闭1min）、光等，持续3周，从而立抑郁症小鼠9。

给量根据人鼠换算公式S小鼠/20/二0.0026%S人/70R/,得血府逐瘀汤给量（口服量）为每只小鼠0.2028// 20/（成人120//70R/）,即每只小鼠10.14//R/。

血府逐瘀汤组小鼠按10.14//R/（含生药1//mL）剂量灌胃血府逐瘀汤，每日2次，连续14d。

实验中医药学
氟西汀组小鼠按10mg/kg剂量(0.1%的盐酸氟西汀给药体积为10.14mL/kg)灌胃盐酸氟西汀，每日2次，连续14按照等量不等浓度的原则，正常对照组和模型组小鼠灌胃等体积蒸NO,每日2次，连续14d o
1.3行为学观察
1.3.1自主活动次数测定为使实验小鼠熟悉环境，先将各组小鼠放入自主活动仪10min,待小鼠适应环境e开始正式实验。

正式实验是将各组小鼠依次放入自主活动仪内10min,在5min后,开始记录各组小鼠的水平活动次数、垂直活动次数。

1.3.2悬尾实验各组小鼠给药结束1h e,将小鼠尾端2cm的部位贴在一根水平木棍上，使小鼠，部5cm,m 动物的视线。

比较各组小鼠在6min内累计不动的时。

1.3.3强迫游泳实验各组小鼠在给药结束4, e实验。

是将各组小鼠
水温25!,水深30cm的玻璃烧杯中6min,观察6min内各组小鼠累计不动时。

不动时的判小鼠在内在水，不
,一部在水的动⑹。

1.3.4大脑海马区神经递质含量测定将各组小鼠，在组，浆,3000r/min离心20min,取上清,保存于-20!以的。

各组小鼠组5-5-HT)、NE)、DA量，格按照。

1.4统计学方法
SPSS22.0,量资数土标准差(!±",另
析(One-Way ANOVA)，以#<0.05为差异有统计学意义。

2结果
2.1各组小鼠自主活动次数测定结果
与正常对照组比较，模型组小鼠水平运动次数、垂直运动次数均显著降低，学意义(#<0.01)；与模型组比较,血府逐瘀汤组和盐酸氟西汀组小鼠水平运动次数、垂直运动次数均显著升高(P<0.01,#<0.05),学意义。

结果_______侃财山西中医药犬学学报
2021年第22#第2期
见表1。

表1各组小鼠自主活动次数比较(次，！七)组别$水平运动次数垂直运动次数正常对照组1013.40±3.5947.10±3.07
模型组10 5.80±1.931)41.70±3.951)
血府逐瘀汤组1011.10±2.183)45.20±5.832)
盐酸氟西汀组1011.20±2.803)46.40±4.952)注:与正常对照组比较,1)%<0.01;与模型组比较,2#<0.05, 3#<0.01
2.2各组小鼠悬尾不动时间、强迫游泳不动时间比较
与正常对照组比较，模型组小鼠悬尾不动时间、不动时显著增加(#<0.01)，差学意义;与模型组比较,血府逐瘀汤组和盐酸氟西汀组小鼠悬尾不动时、不动时间显著降低(#<0.01),学意义。

结果见2。

表2各组小鼠悬尾不动时间、强迫游泳不动时间比较(S,!七)组别&悬尾不动时间不动时
正常对照组10111.50±4.7499.80±4.73
模型组10168.10±5.451)130.80±5.411)
血府逐瘀汤组10119.80±4.892)100.40±6.502)
盐酸氟西汀组10118.20±4.422)97.90±5.652)注:与正常对照组比较,1%<0.01;与模型组比较,2%<0.01
2.3各组小鼠小鼠海马组织神经递质含量测定结果
与正常对照组比较,模型组小鼠5-HT、NE、DA量显著降低(#<0.05),学意义；与模型组比较,血府逐瘀汤组和盐酸氟西汀组小鼠5-HT、NE、DA量升高(#<0.05),
学意义。

结果见3。

表3各组小鼠海马组织神经递质含量比较(ng/mL,!±"
组别&5-HT NE DA
正常对照组10 3.46±0.5115.78±2.4166.82±2.35
模型组10 2.17±0.431)13.24±2.301)60.60±2.721)血府逐瘀汤组10 3.43±0.522)15.72±2.662)66.56±2.072)盐酸氟西汀组10 3.07±0.362)15.71±3.252)65.60±2.082)注:与正常对照组比较,i)%<0.01;与模型组比较,2)%<0.05
3讨论
抑郁症是一种发病率较高的精神疾病⑺,由情志改变引起，气机阻滞为核病机，主要现为情抑郁、情绪不宁、易怒善哭等，而引起抑郁症的主要是应激刺激!10"。

究12h禁食、12h禁水、12h45。

倾斜饲养、
夹尾等多种低
』也中匡^二号号*.实验中医药学2021Vol-22No-2
强度刺激的方法制备抑郁症小鼠模型。

该造模方法与人类抑郁症的生物学机制接近，如悬尾和强迫游泳实验是对抑郁症患者快感缺乏、兴趣缺失、精神运动迟滞等抑郁症状进行模拟山"⑷。

因此,该方法制备抑郁症模型,能解释抑郁症的显著异质性，可用于本实验研究i
目前文献研究发现，血府逐瘀汤已用于抑郁症的临床治疗，但实验室研究,用机制尚。

本研究，血府逐瘀汤能明显增加抑郁小鼠的动次数，并能显减悬尾和强迫游泳动时间，初证该抑郁用。

目前，抑郁症发机制的研究，如类神质、、性神因等，类神质
可[心刀。

该学，抑郁症是于类神经递质NE、5-HT、DA分泌不足所致。

因此，抑郁症治疗NE、5-HT、DA代20",
间类神质，强生功能抑郁的用。

本实验用ELISA法抑郁小鼠NE、5-HT、DA ，，血府逐瘀汤能显升高抑郁小鼠NE、5-HT、DA，抑郁用机制与小鼠类神质O
，本实验抑郁小鼠
动次数、悬尾与强迫游泳动时间等血府逐瘀汤抑郁用，进小鼠
类神质(NE、5-HT、DA ，血府逐瘀汤抑郁的用机制，临床用。

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(编辑：
张世霞)。