电泳中缓冲液的作用

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电泳中缓冲液的作用
在电泳实验中,会用到缓冲剂来维持电泳稳定系统恒定ph值的必要条件,因为在电泳实验时它的正极与负极会发生电解反应,正极会发生氧化反应,负极会发生还原反应。

长时间的电泳会使正极变酸,负极变碱。

而缓冲液能使溶液两极的ph保持基本不变。

还会使溶液具有一定的导电性,有利于dna分子的迁移。

说到这里很多人都想到了生物缓冲液mops (3-吗啉丙磺酸),它属于good’s缓冲剂,在水中有良好的溶解性,缓冲范围在6.5-7.9之间,可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳(ief)的电解质系统成分;还可应用于northern杂交,作为rna的分离和转膜时的缓冲液。

电泳缓冲中常用的10×mops buffer配制方法如下:
(1)称量41.8 g mops,溶解于约700ml depc处理水中;
(2)使用2 n naoh 调节ph值至7.0;
(3)向溶液中加入depc处理的1m naoac 20ml、0.5m
edta(ph8.0) 20ml;
(4)定容至1 l,用0.45 μm 滤膜过滤除去杂质,室温避光保存。

除了mops缓冲液之外用于电泳中的生物缓冲剂还有许多,它们之间也有一定的区别,适用于各种电泳中。

而在现在的市场上,生物缓冲剂的商家众多,产品规格与质量参差不齐。

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