猴耳环种子萌发过程中内源激素动态变化的研究
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样 １ 次， 进行激 素的动态测定 ， 每组样 品重 复 ３次 。 １ ． ３ 激素 含量 测定 方法
文章 编号： １ ０ ０ １— ４ ７ ０ ５ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ３ － ０ ０ ６ ６ － ０ ３
猴耳环 （ Ｐ ｉ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ｌ ｙ ｐ ｅ ａ ｒ ｉ ａ Ｂ ｅ ｎ ｔ ｈ ） 是 豆 科 含 羞 草亚科 围涎树 属 多年 生 木本 植 物 ， 以 干燥 叶及 幼 枝 人药 ， 含 有 没食子 酸 、 没食 子酸 儿茶 素 、 槲 皮苷 、 槲皮 素 等多种 成分 ， 是 治 疗 多 种 热 毒 症 独 特 的南 药¨ Ｊ 。目 前 猴耳 环 主要是通 过 种 子 进 行 繁殖 ； 在种 子 的萌 发 过 程 中， 植 物 激素起 着 非 常 重要 的调 控 作 用 Ｊ 。有 关 猴 耳 环种 子 萌发机 理 尚未 见 报 道 ， 本 研 究 旨在 通 过 对 猴 耳 环种 子 萌发过 程 中 内源 激 素 变 化 动态 的分 析 ， 阐述
称取上述各组完整猴耳环种子鲜样 １ ． ０ ｇ 于研钵 中， 用２ ｍＬ的 ８ ０ ％ 甲醇提 取液 （ 内含 １ ｍｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ二叔 丁
基 对 甲苯 酚 ） 在 冰 浴 中研 磨 成 匀浆 ， 转入 １ ０ ｍ Ｌ试 管 ， 再用 ２ ｍ Ｌ提取 液将 研 钵 冲洗 干 净 ， 一 并 转 入试 管 中 ， ４℃下提 取 ４ ｈ ， ３ ５ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ 离心 ８ ｍ ｉ ｎ ， 上清 液过 ｃ － １ ８ 固相 萃取 柱 ， 步 骤如 下 ： ８ ０ ％ 甲醇平 衡胶 柱一 上样一 收 集 样 品一移 开 样 品后 用 １ ０ ０ ％ 甲醇 洗 柱 一 １ ０ ０ ％ 乙醚 洗 柱一 １ ０ ０ ％ 甲醇洗 柱 一 循 环 。将 过柱 后 的样 品 真空
ＣＨＥＮ Ｍｉ ｎ ｇ － ｑ ｕ ａ ｎ，ＨＵＡＮＧ Ｈａ ｉ － ｂ ｏ，ＰＵ Ｌｉ － ｌ ｉ
摘要 ： 目的 ： 探 讨猴 耳环种 子 萌发过程 中内源激 素与种 子 萌发
之 间的 关 系。 方 法 ： 采 用酶 联 免 疫 法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 对 猴 耳 环 种 子 萌
调控 。
取 适量 的猴 耳环 种 子 ， 分 为 ８组 ， 每 组 ３个 重 复 ，
每皿记 为 １个 重 复 ， 每皿 ３ ０粒 。 先 将 １组 种 子 提 前
关键 词 ： 猴耳环种子 ；内源激素 ； 萌发 ；酶联免疫 法
中 图分 类 号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ 文献标志码 ： Ａ
７ ｄ 放 人 人 工 气 候箱 中 ３ ０℃培 养 ， 接 着 再 将 １组 种 子 提前 ６ ｄ放入 同一 人工 气候 箱 中培 养 ， 以此类 推 ； 种 子 于萌发 前 室温浸 种 ２ ｈ ， 用０ ． １ ％百 菌 清消毒 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 然 后 用蒸馏水 冲洗干净 ； 将种 子置人垫 有双 层纱 布的直径 １ ５ ａ ｍ培养 皿 中 ， 发 芽 方法 参 照 国家《 林 木 种 子 检 验规 程》 （ Ｇ Ｂ ２ ７ ７ ２—１ ９ ９ ９ ） 进行 ， 记 录种 子 每天 的 萌发 情况 。 在最后 １ 组种 子进行萌发处 理后 ， 立 即从 每组 中随机取
内源激 素 与种子 萌 发 的关 系 ， 为 猴 耳 环种 子 的生 理 学
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３—１ ０—１ ８ 基金项 目： 基于多学科的南药 开发利用关 键技术 集成示范研 究 （ 编号 ： ２ ０ １ ２ Ｂ Ａ Ｉ ２ ９ Ｂ０ ９ ） 。 作者简介 ： 陈明权 （ １ ９ ８ ８一） ， 男， 硕士研究生 ， 主要从事生药 品种与质量 研究 ； Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ２ ９ ｃ ｍｑ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ。 通讯作者 ： 黄海波 （ １ ９ ６ ５一） ， 男， 副教授 ， 主要从事 中药材 质量标准规 范 化研究与中药材 Ｇ Ａ Ｐ研究 ； Ｅ ． ｍ ａ ｉ ｌ ： ｂ ｏ ｂ ｈ ｗ ａ ｎ ｇ ６ ５ ＠ｇ ｍａ ｉ ｌ ． ｃ ｏ ｍ。
第３ ３卷
第 ３期
２ ０ １ ４年 ３月
种
子
（ Ｓ ｅ ｅ ｄ ）
Ｖ ｏ １ ． ３ ３ Ｎ ｏ ． ３ Ｍａ ｒ ． ２ ０ １ ４
猴 耳 环 种 子 萌发 过 程 中 内源 激 素 动态 变化 的研 究
陈 明权 。 黄 海波 ， 蒲 立立 （ 广 州 中医药 大学 中药 学 院 ， 广 东 广 州 ５ １ ０ ０ ０ ６ ） Ｄｙ ｎ ａ ｍｉ ｃ Ｃｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｅｎ ｄ ｏ ｇ ｅ ｎ ｏ ｕ ｓ Ｐｈ ｙ ｔ ｏ ｈ ｏ ｒ ｍｏ ｎ ｅ ｓ Ｄｕ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｇｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｐｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｐｉ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ｌ ｙ ｐｅ ａ ｒ ｉ ａ Ｓ ｅ ｅ ｄ ｓ
研 究提 供 理论基 础 。
发过 程 中的 内源激 素赤 霉素 （ Ｇ Ａ） 、 吲哚 乙酸 （ Ｉ Ａ Ａ） 和脱 落 酸
（ Ａ Ｂ Ａ） 进行 动 态 测 定。结 果 ： 猴 耳 环 种 子 萌发 过 程 中， 内源
Ｇ Ａ、 Ｉ Ａ Ａ 的 含 量 总 体 上 呈 现 上 升 的 变化 趋 势 ， 而Ａ Ｂ Ａ的含量 则 呈现下降的趋 势； Ｇ Ａ ／ Ａ Ｂ Ａ 、 Ｉ Ａ Ａ ／ Ａ Ｂ Ａ 的 比 值 都 呈 现 增 加 的 变
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
２ ０ １ ３年 ６月 猴 耳 环 种 子 购 自海 南 省 霸 王 岭林 业
局， 该 批猴耳 环 种子 于购 买前 ７ ｄ采集 。 １ ． ２ 发 芽试 验
化趋势 ， 这与相应 的 萌发 率 变化 呈现 明显 的一致 性。结论 ： 猴
耳环 种 子 的 萌发 可 能 主要 受 Ａ Ｂ Ａ和 Ｇ Ａ、 Ｉ Ａ Ａ 的 平 衡 变 化
文章 编号： １ ０ ０ １— ４ ７ ０ ５ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ３ － ０ ０ ６ ６ － ０ ３
猴耳环 （ Ｐ ｉ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ｌ ｙ ｐ ｅ ａ ｒ ｉ ａ Ｂ ｅ ｎ ｔ ｈ ） 是 豆 科 含 羞 草亚科 围涎树 属 多年 生 木本 植 物 ， 以 干燥 叶及 幼 枝 人药 ， 含 有 没食子 酸 、 没食 子酸 儿茶 素 、 槲 皮苷 、 槲皮 素 等多种 成分 ， 是 治 疗 多 种 热 毒 症 独 特 的南 药¨ Ｊ 。目 前 猴耳 环 主要是通 过 种 子 进 行 繁殖 ； 在种 子 的萌 发 过 程 中， 植 物 激素起 着 非 常 重要 的调 控 作 用 Ｊ 。有 关 猴 耳 环种 子 萌发机 理 尚未 见 报 道 ， 本 研 究 旨在 通 过 对 猴 耳 环种 子 萌发过 程 中 内源 激 素 变 化 动态 的分 析 ， 阐述
称取上述各组完整猴耳环种子鲜样 １ ． ０ ｇ 于研钵 中， 用２ ｍＬ的 ８ ０ ％ 甲醇提 取液 （ 内含 １ ｍｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ二叔 丁
基 对 甲苯 酚 ） 在 冰 浴 中研 磨 成 匀浆 ， 转入 １ ０ ｍ Ｌ试 管 ， 再用 ２ ｍ Ｌ提取 液将 研 钵 冲洗 干 净 ， 一 并 转 入试 管 中 ， ４℃下提 取 ４ ｈ ， ３ ５ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ 离心 ８ ｍ ｉ ｎ ， 上清 液过 ｃ － １ ８ 固相 萃取 柱 ， 步 骤如 下 ： ８ ０ ％ 甲醇平 衡胶 柱一 上样一 收 集 样 品一移 开 样 品后 用 １ ０ ０ ％ 甲醇 洗 柱 一 １ ０ ０ ％ 乙醚 洗 柱一 １ ０ ０ ％ 甲醇洗 柱 一 循 环 。将 过柱 后 的样 品 真空
ＣＨＥＮ Ｍｉ ｎ ｇ － ｑ ｕ ａ ｎ，ＨＵＡＮＧ Ｈａ ｉ － ｂ ｏ，ＰＵ Ｌｉ － ｌ ｉ
摘要 ： 目的 ： 探 讨猴 耳环种 子 萌发过程 中内源激 素与种 子 萌发
之 间的 关 系。 方 法 ： 采 用酶 联 免 疫 法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 对 猴 耳 环 种 子 萌
调控 。
取 适量 的猴 耳环 种 子 ， 分 为 ８组 ， 每 组 ３个 重 复 ，
每皿记 为 １个 重 复 ， 每皿 ３ ０粒 。 先 将 １组 种 子 提 前
关键 词 ： 猴耳环种子 ；内源激素 ； 萌发 ；酶联免疫 法
中 图分 类 号 ： Ｓ ５ ６ ７ ． １ 文献标志码 ： Ａ
７ ｄ 放 人 人 工 气 候箱 中 ３ ０℃培 养 ， 接 着 再 将 １组 种 子 提前 ６ ｄ放入 同一 人工 气候 箱 中培 养 ， 以此类 推 ； 种 子 于萌发 前 室温浸 种 ２ ｈ ， 用０ ． １ ％百 菌 清消毒 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 然 后 用蒸馏水 冲洗干净 ； 将种 子置人垫 有双 层纱 布的直径 １ ５ ａ ｍ培养 皿 中 ， 发 芽 方法 参 照 国家《 林 木 种 子 检 验规 程》 （ Ｇ Ｂ ２ ７ ７ ２—１ ９ ９ ９ ） 进行 ， 记 录种 子 每天 的 萌发 情况 。 在最后 １ 组种 子进行萌发处 理后 ， 立 即从 每组 中随机取
内源激 素 与种子 萌 发 的关 系 ， 为 猴 耳 环种 子 的生 理 学
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３—１ ０—１ ８ 基金项 目： 基于多学科的南药 开发利用关 键技术 集成示范研 究 （ 编号 ： ２ ０ １ ２ Ｂ Ａ Ｉ ２ ９ Ｂ０ ９ ） 。 作者简介 ： 陈明权 （ １ ９ ８ ８一） ， 男， 硕士研究生 ， 主要从事生药 品种与质量 研究 ； Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ２ ９ ｃ ｍｑ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ。 通讯作者 ： 黄海波 （ １ ９ ６ ５一） ， 男， 副教授 ， 主要从事 中药材 质量标准规 范 化研究与中药材 Ｇ Ａ Ｐ研究 ； Ｅ ． ｍ ａ ｉ ｌ ： ｂ ｏ ｂ ｈ ｗ ａ ｎ ｇ ６ ５ ＠ｇ ｍａ ｉ ｌ ． ｃ ｏ ｍ。
第３ ３卷
第 ３期
２ ０ １ ４年 ３月
种
子
（ Ｓ ｅ ｅ ｄ ）
Ｖ ｏ １ ． ３ ３ Ｎ ｏ ． ３ Ｍａ ｒ ． ２ ０ １ ４
猴 耳 环 种 子 萌发 过 程 中 内源 激 素 动态 变化 的研 究
陈 明权 。 黄 海波 ， 蒲 立立 （ 广 州 中医药 大学 中药 学 院 ， 广 东 广 州 ５ １ ０ ０ ０ ６ ） Ｄｙ ｎ ａ ｍｉ ｃ Ｃｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｅｎ ｄ ｏ ｇ ｅ ｎ ｏ ｕ ｓ Ｐｈ ｙ ｔ ｏ ｈ ｏ ｒ ｍｏ ｎ ｅ ｓ Ｄｕ ｒ ｉ ｎ ｇ Ｇｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｐｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｐｉ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ｌ ｙ ｐｅ ａ ｒ ｉ ａ Ｓ ｅ ｅ ｄ ｓ
研 究提 供 理论基 础 。
发过 程 中的 内源激 素赤 霉素 （ Ｇ Ａ） 、 吲哚 乙酸 （ Ｉ Ａ Ａ） 和脱 落 酸
（ Ａ Ｂ Ａ） 进行 动 态 测 定。结 果 ： 猴 耳 环 种 子 萌发 过 程 中， 内源
Ｇ Ａ、 Ｉ Ａ Ａ 的 含 量 总 体 上 呈 现 上 升 的 变化 趋 势 ， 而Ａ Ｂ Ａ的含量 则 呈现下降的趋 势； Ｇ Ａ ／ Ａ Ｂ Ａ 、 Ｉ Ａ Ａ ／ Ａ Ｂ Ａ 的 比 值 都 呈 现 增 加 的 变
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料
２ ０ １ ３年 ６月 猴 耳 环 种 子 购 自海 南 省 霸 王 岭林 业
局， 该 批猴耳 环 种子 于购 买前 ７ ｄ采集 。 １ ． ２ 发 芽试 验
化趋势 ， 这与相应 的 萌发 率 变化 呈现 明显 的一致 性。结论 ： 猴
耳环 种 子 的 萌发 可 能 主要 受 Ａ Ｂ Ａ和 Ｇ Ａ、 Ｉ Ａ Ａ 的 平 衡 变 化