MM FS CNG 饲料中总砷的测定

MMFSCNG0247饲料总砷分光光度法
MM_FS_CNG_0247
饲料中总砷的测定
1适用范围
本方法适用于各种配(混)合饲料、浓缩饲料、预混合饲料及饲料原料。

第一篇银盐法(仲裁法)
2.原理概要
样品经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷呈离子状态存在，经碘化钾、氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后被锌粒和酸产生的新生态氢还原为砷化氢。

在密闭装置中，被二乙氨基二硫代甲酸银(Ag-DDTC)的三氯甲烷溶液吸收，形成黄色或棕红色银溶胶，其颜色深浅与砷含量成正比，用分光光度计比色测定。

形成胶体银的反应如下：
AsH
3＋6Ag(DDTC)＝6Ag＋3H(DDTC)＋As(DDTC)
3
3 主要试剂和仪器
硝酸；硫酸；高氯酸；盐酸；抗坏血酸；
无砷锌粒，粒径3.0mm±0.2mm。

混合酸溶液(A)：HNO
3∶H
2
SO
4
∶HClO
4
＝23∶3∶4。

乙酸铅棉花：将医用脱脂棉在乙酸铅溶液(100g/L)中浸泡约1h，压除多余溶液，自然晾干，或在90℃～100℃烘干，保存于密闭瓶中。

二乙氨基二硫代甲酸银(Ag-DDTC)-三乙胺-三氯甲烷吸收溶液（2.5g/L）。

称取2.5g(精确到0.0002g)Ag-DDTC于干燥的烧杯中，加适量三氯甲烷待完全溶解后，转入1000mL容量瓶中，加入20mL三乙胺，用三氯甲烷定容，于棕色瓶中存放在冷暗处。

若有沉淀应过滤后使用。

砷标准储备溶液（1.0μg/mL）。

精确称取0.6600g三氧化二砷(110℃，干燥2h)，加5mL氢氧化钠溶液(200g/L)使之溶解，然后加入25mL硫酸溶液(60mL/L)中和，定容至500mL。

此溶液每毫升含1.00mg砷，于塑料瓶中冷贮。

砷标准工作溶液（1.0μ/mL）。

准确吸取5.00mL砷标准储备液于100mL容量瓶中，加水定容，此溶液含砷50μg/mL。

准确吸取50μg/mL砷标准溶液2.00mL，于100mL容量瓶中，加1mL盐酸，加水定容，摇匀，此溶液每毫升相当于1.0μg砷。

硫酸溶液（60mL/L）。

吸取6.0mL硫酸，缓慢加入约80mL水中，冷却后用水稀释至100mL。

盐酸溶液（1mol/L）。

盐酸溶液（3mol/L）。

将1份盐酸与3份水混合。

硝酸镁溶液（150g/L）。

称取30g硝酸镁[Mg(NO
3)
2
·6H
2
O]溶于水中，并稀释至200mL。

碘化钾溶液（150g/L）。

称取75g碘化钾溶于水中，定容至500mL，贮存于棕色瓶中。

酸性氯化亚锡溶液（400g/L）。

称取20g氯化亚锡(SnCl
2·2H
2
O)溶于50mL盐酸中，加入数颗金属锡粒，可
用一周。

氢氧化钠溶液（200g/L）。

乙酸铅溶液（200g/L）。

3.2.仪器
砷化氢发生及吸收装置(见图1)。

砷化氢发生器：100mL带30mL、40mL、50mL刻度线和侧管的锥形瓶。

导气管：管径φ为8.0mm～8.5mm；尖端孔φ为2.5mm～3.0mm。

吸收瓶，下部带5mL刻度线。

分光光度计：波长范围360nm～800nm。

分析天平：感量0.0002g。

可调温电炉：六联和二联各一个。

玻璃器皿：凯氏瓶，各种刻度吸量管，容量瓶和高型烧杯。

瓷坩埚：30mL。

高温炉：温控0℃～950℃。

4过程简述
4.1.样品制备
选择有代表性样品1.0kg，用四分法缩减至250g，过0.42mm孔筛，存于密封瓶中，待用。

混合酸消解法
配合饲料及植物性单一饲料，宜采用硝酸-硫酸-高氯酸消解法。

称取试样3g～4g(精确到0.001g)，置于250mL凯氏瓶中，加水少许湿润试样，加30mL混合酸(A)，放置4h以上或过夜，置电炉上从室温开始消解。

待棕色气体消失后，提高消解温度，至冒白烟(SO
3
)数分钟(务必赶尽硝酸)，此时溶液应清亮无色或淡黄色，瓶内溶液体积近似硫酸用量，残渣为白色。

若瓶内溶液呈棕色，冷却后添加适量硝酸和高氯酸，直到消解完全。

冷却，加10mL盐酸溶液（1mol/L）并煮沸，稍冷，转移到50mL容量瓶中，洗涤凯氏瓶3～5次，洗液并入容量瓶中，然后定容，摇匀，待测。

试样消解液含砷小于10μg时，可直接转移到砷化氢发生器中，补加7mL 盐酸，加水使瓶内溶液体积为40mL，从加碘化钾起以下按4.3操作步骤进行。

单位：mm
1 图 1 砷化氢发生及吸收装置
盐酸溶样法
磷酸盐、碳酸盐和微量元素添加剂不宜加硫酸，应用盐酸溶样。

称取试样1g ～3g(精确到0.0002g)于100mL 高型烧杯中，加水少许湿润试样，慢慢滴加10mL 盐酸溶液（3mol/L ），待激烈反应过后，再缓慢加入8mL 盐酸，用水稀释至约30mL 煮沸。

转移到50mL 容量瓶中，洗涤烧杯3～4次，洗液并入容量瓶中，定容，摇匀，待测。

试样消解液含砷小于10μg 时，可直接在发生器中溶样，用水稀释到40mL 并煮沸，从加碘化钾起以下按4.3操作步骤进行。

另外，少数矿物质饲料富含硫，严重干扰砷的测定，可用盐酸溶解样品后，往高型杯中加入5mL 乙酸铅溶液并煮沸，静置20min ，形成的硫化铅沉淀过滤除
30
50mL 40 2 78±2
~20 16/14 φ18
20±2 100mL φ60±1
~15
3~6
孔φ2.5~3 φ12±0.5 （拉稍105）
3
φ25~26
φ35~36
口φ12
~12
~12
155±3 165±2
155±2 5mL
155±2
φ40±1
1
19/26
4
φ8±8.5
φ16±0.5
之，滤液定容至50mL，以下按4.3规定步骤进行。

干灰化法
预混料、浓缩饲料(配合饲料)可选择干灰化法。

称取试样2g～3g(精确至0.0002g)于30mL瓷坩埚中，低温炭化至无烟后，加入5mL硝酸镁溶液150g/L，混匀，于低温或沸水浴中蒸干，然后转入高温炉于550℃恒温灰化3.5h～4h。

取出冷却，缓慢加入10mL盐酸溶液(3mol/L)，待激烈反应过后，煮沸并转移到50mL容量瓶中，洗涤坩埚3～5次，洗液并入容量瓶中，定容，摇匀，待测。

所称试样含砷小于10μg时，可直接转移到发生器中，补加8mL盐酸，加水至40mL左右，加入1g抗坏血酸溶解后，按4.3规定步骤操作。

同时于相同条件下，做试剂空白试验。

4.2 标准曲线绘制
准确吸取砷标准工作溶液(1.0μg/mL)0.00，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00 mL于发生瓶中，加10mL盐酸，加水稀释至40mL，从加入碘化钾起，以下按4.3规定步骤操作，测其吸光度，求出回归方程各参数或绘制出标准曲线。

当更换锌粒批号或者新配制Ag-DDTC吸收液、碘化钾溶液和氯化亚锡溶液，均应重新绘制标准曲线。

4.3 还原反应与比色测定
从4.1处理好的待测液中，准确吸取适量溶液(含砷量应≥1.0μg)于砷化氢发生器中，补加盐酸至总量为10mL，并用水稀释到40mL，使溶液中盐酸浓度为3mol/L，然后向试样溶液、试剂空白溶液，标准系列溶液各发生器中，加入2mL 碘化钾溶液(150g/L)，摇匀，加入1mL氯化亚锡溶液，摇匀，静置15min。

准确吸取5.00mL Ag-DDTC吸收液于吸收瓶中，连接好发生吸收装置(勿漏气，导管塞有膨松的乙酸铅棉花)。

从发生器侧管迅速加入4g无砷锌粒，反应45min，当室温低于15℃时，反应延长至1h。

反应中轻摇发生瓶2次，反应结束后，取下吸收瓶，用三氯甲烷定容至5mL，摇匀(避光时溶液颜色稳定2h)。

以原吸收液(二乙氨基二硫代甲酸银(Ag-DDTC)-三乙胺-三氯甲烷吸收溶液)为参比，在520nm处，用1cm比色池测定。

注：Ag-DDTC吸收液系有机溶剂，凡与之接触器皿务必干燥。

5.结果计算
5.1.每千克饲料中砷含量按式(1)计算：
ω＝A
1
×V1×1000
(1)
m×V
2
×1000
式中：ω——每千克饲料中含砷量，mg；
V
1
——试样消解液总体积，mL；
V
2
——分取试液体积，mL；
A
1
——测试液中含砷量，μg；
m——试样质量，g。

若样品中砷含量很高，可用式(2)计算：
ω＝A
2
×V1×V3×1000
(2)
m×V
2
×V4×1000
式中：ω——每千克饲料中含砷量，mg；
V
1
——试样消解液总体积，mL；
V
2
——分取试液体积，mL；
V
3
——分取液再定容体积，mL；
V
4
——测定时分取V3的体积，mL；
A
2
——测定用试液中含砷量，μg；
m——试样质量，g。

5.2.结果表示
每个样品应做双样，以其算术平均值为分析结果，并表示至小数点后两位。

当每千克试样中含砷量≥1.0μg时，结果取三位有效数字。

6.允许差
分析结果的相对偏差，应不大于表1所列允许差。

第二篇硼氢化物还原光度法(快速法)
7.原理概要
样品经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷呈离子状态存在，在酒石酸环境中，
硼氢化钾将砷离子还原成氢化砷(AsH
3
)气体。

在密闭装置中，被Ag-DDTC三氯甲烷溶液吸收，形成黄色或棕红色银溶胶，其颜色深浅与砷含量成正比，用分光光度计比色测定。

8.主要试剂和仪器
8.1.主要试剂
除下列试剂外，其他试剂同3.1。

混合酸溶液(B)：HNO
3∶H
2
SO
4
∶HClO
4
＝20∶2∶3。

甲基橙水溶液(1 g/L):pH3.0(红)～4.4(橙)。

氨水溶液(1∶1)。

酒石酸溶液(200g/L)。

称取100g酒石酸加水适量，稍加热溶解，冷却后定容500mL。

硼氢化钾片：KBH
4
∶NaCl＝1∶5
将硼氢化钾和氯化钠按质量比1∶5比例混匀，于90℃～100℃干燥2h，压力为2kPa条件下，压制成直径10mm，厚5mm，每片质量为1.0g±0.1g。

压制及贮存中应防潮湿。

8.2.仪器
同3.2.
9.过程简述
9.1.样品制备
选择有代表性样品1.0kg，用四分法缩减至250g，过0.42mm孔筛，存于密封瓶中，待用。

混合酸消解法
配、混合饲料及植物性单一饲料，宜采用三酸消解法。

称取试样2.0g～3.0g(精确到0.0002g)，于250mL凯氏瓶中，加水少许湿润试样，加25mL混合酸(B)，置电炉上从室温开始消解，待样液煮沸后，关闭电炉10min～15min，继续加热消解，)数分钟，此时溶液应清亮无色或淡黄色，体积近似硫酸用量，残直至冒白烟(SO
3
渣为白色。

稍冷，转移到100mL砷化氢发生器中，洗涤凯氏瓶3～4次，洗液并入发生器中，使瓶内溶液体积为30mL左右。

以下按9.2、9.3操作步骤进行。

注：消解时赶尽硝酸，否则结果偏低。

盐酸溶样法
磷酸盐、碳酸盐和微量元素添加剂不宜加硫酸，应用盐酸溶样。

称取试样0.5g～2.0g(精确到0.0002g)于发生器中，慢慢滴加5mL盐酸溶液(3mol/L)，待激烈反应过后，再缓慢加入3mL～4mL盐酸，用水稀释至约30mL煮沸，试样溶解后按9.2、9.3操作步骤进行。

9.1.3 干灰化法
预混料、浓缩饲料(配合饲料)可选择干灰化法。

称取试样1.0g～2.0g(精确至0.0002g)于30mL瓷坩埚中，低温炭化完全后转入高温炉中，于550℃恒温灰化3h。

取出冷却，慢慢加入10mL盐酸溶液(3mol/L)，待激烈反应过后煮沸并转移到砷化氢发生器中，加水至30mL左右，加入1g抗坏血酸溶解后，以下按9.3规定步骤操作。

同时于相同条件下，做试剂空白试验。

9.2.氨水(1∶1)调溶液pH值
发生器中加入2滴甲基橙指示剂，用氨水(1∶1)调pH值至橙黄色，再滴加盐酸溶液(1mol/L)至刚好变红色。

加入6.0mL酒石酸溶液，用水稀释至50mL。

9.3.还原反应与比色测定
准确吸取5.00mL吸收液于吸收瓶中，连接好发生吸收装置(勿漏气，导管塞有膨松的乙酸铅棉花)，从发生器侧管迅速加入硼氢化钾一片，立即盖紧塞子，反应完毕再加第二片。

反应时轻轻摇动发生器2～3次，待反应结束后，以原吸收液(二乙氨基二硫代甲酸银(Ag-DDTC)-三乙胺-三氯甲烷吸收溶液)为参比，在520nm处，用1cm比色池测定。

注：还原反应时，应防止有毒砷化氢气体泄漏。

10.标准曲线绘制
准确吸取砷标准工作溶液(1.0μg/mL)0.00，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00mL 于发生瓶中，加水至44mL，加入6mL酒石酸溶液，以下按9.3规定步骤操作，测其吸光度，求出回归方程各参数或绘制出标准曲线。

11.结果计算
同5.
12.允许差
同6.
13.来源
中国国家标准：GB/T 13079—1999。