阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究
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根据《普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指
导原则》配制不同pH值的溶出介质，取3批阿奇霉素 原料(辉瑞公司提供)，在pH1.2、2.0、3.0、4.0、4.5、
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中国抗生素杂志2021年6月第46卷第6期
AU
0.20 0.18 0.16 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0 -0.02
Key words Azithromycin; Dissolution curve; UPLC; Consistency evaluation
收稿日期：2020-05-16 基金项目：国家科技重大专项课题-重大新药创制“药物一致性评价关键技术与标准研究”课题(No. 2017zx09101001) 作者简介：董斌，女，生于1986年，硕士，副主任药师，从事药品质量标准研究，E-mail: dbfire@ *通讯作者，E-mail: shndaisy@
(1 Dalian Inspection, Examination and Certification Technical Service Center, Dalian 116021; 2 The Second Hospital of Dalian Medical University, Dalian 116027)
阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究 董斌等
. 565 .
阿奇霉素(azithromycin)为半合成大环内酯类的广 谱抗生素，是国家基本药物，在临床上作为一线抗感 染药物广泛使用，适用于敏感菌所致的呼吸道、皮肤 软组织感染以及衣原体、流感嗜血杆菌、链球菌、卡 他莫拉菌等引起的感染性疾病[1]。阿奇霉素于1980年 由南斯拉夫Sour Pliva公司研发，1988年率先在本国 上市，随后原研公司将全球的生产和市场开发权转 让于美国辉瑞公司和意大利Sigma Tau公司[2]。1990年 9月该产品在英国上市，1991年底获美国FDA批准。 1994年普利瓦(PLIVA)公司的片剂(0.5g，0.125g)在 我国获准进口，1996年辉瑞公司在国内生产的片剂 0.25g和0.5g两个规格在我国获得批准文号。目前， 国内公布辉瑞制药的原研制剂和原研地产化产品为 0.25g规格的阿奇霉素片的参比制剂。
. 564 .
中国抗生素杂志2021年6月第46卷第6期
分析质控与制剂4-05
阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究
董斌1 郝爱鱼1 庄子瑜1 于楠1 孙海宁2, *
(1 大连市检验检测认证技术服务中心，大连 116021；2 大连医科大学附属第二医院，大连 116027)
1.50
阿奇霉素杂质J
2.00 2.50 t/min
阿奇霉素
3.00
3.50 4.00
阿奇霉素系统适用 性对照品标准图谱
Imp H
25 26
Imp B 28
2221
20
10.00
20.00 30.00 40.00 50.00 60.00
t/min 图1 阿奇霉素系统适用性色谱图
70.00
Fig.1 System suitability chromatogram of azithromycin
Abstract Objective To establish a new method for the dissolution curve determination of azithromycin Tablet, and evaluate the dissolution profiles of domestic generic tablets and the original tablets in four different kinds of pH mediums. Methods The paddle method of dissolution determination method was adopted, the rotation speed was 75 r/min, with the dissolution medium volume of 900 mL. UPLC was adopted to determine the content of azithromycin in pH 2.0 hydrochloride acid, pH 4.5 phosphoric acid, pH 6.0 phosphoric acid and pH 6.8 phosphate buffer solution; the cumulative dissolution was calculated, the dissolution profiles were drawn, and the similarity of dissolution profiles were evaluated. Results In four different pH dissolution media, the dissolution amount of domestic and original azithromycin tablets all reached more than 85% in 15 minutes, which indicated that the dissolution behaviors of two batches of domestic imitated products were basically the same with the original azithromycin tablets, and the judgment was similar. Conclusion The method is suitable for the dissolution curve determination of azithromycin tablets, providing a reference for further quality consistency evaluation.
Waters Acquity 超高效液相色谱仪；Hanson Vision 半自动溶出仪；Mettler XS205型电子天平。 Sartorius PB-10型pH酸度计。 1.2 试药
阿奇霉素对照品(中国食品药品检定研究院，批
号：130593-201303，含量：94.4%)，阿奇霉素系统 适用性对照品(中国食品药品检定研究院，批号： 130609-201907)，阿奇霉素杂质J对照品(辉瑞公司提 供，含量：100.0%)
关键词：阿奇霉素；溶出曲线；UPLC；一致性评价 中图分类号：R978.5 文献标志码：A
Consistency evaluation of dissolution curve of azithromycin tablets
Dong Bin1, Hao Ai-yu1, Zhuang Zi-yu1, Yu Nan1, and Sun Hai-ning2
取阿奇霉素系统适用性对照品约20mg，置2mL 量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系
统适用性溶液，取2μL注入液相色谱仪，记录的色谱 图应与标准图谱一致。见图1。 2.1.3 线性关系考察
取阿奇霉素对照品0.0266g，置50mL量瓶中， 加适量乙醇使溶解，用水-乙腈(45:55)稀释至刻度， 摇匀。量取上述溶液1、2、5、6、8mL，分别置 10mL量瓶中，分别用水-乙腈(45:55)稀释至刻度， 摇匀，依“2.1.1”项下色谱条件，取上述6个浓度 的溶液进样测定，记录色谱图。以峰面积为纵坐
AU
5.0、5.5、6.0、6.4、6.8和7.4缓冲液及水中，分别制 成过饱和溶液，37℃水浴振摇过夜，使之形成过饱和 溶液。24h后取样过滤，取续滤液按上述色谱条件进 样分析，计算溶解度并绘制“pH-溶解度”曲线(表2 和图2)。
同时进行溶液稳定性考察，在1、2、4、8、12和 24h取样过滤，取续滤液进样分析，进行溶液稳定性 考察，实验结果表明阿奇霉素在pH1.2的缓冲液中全 部降解，其它pH值的缓冲液中基本稳定，且在pH6.0 以上的溶液中，溶解度随pH值的变化较为明显。 2.3 溶出曲线的测定 2.3.1 溶出介质的选择
建立超高效液相色谱法测定溶出曲线[5]，以 Waters BEH C18(50mm×2.1mm，1.7μm)为色谱柱； 以磷酸盐缓冲液(0.05mmol/L磷酸二氢钾溶液，20% 磷酸调节pH至8.2)-乙腈(45:55)为流动相；检测波长 为210nm；柱温为30℃；流速为0.5mL/min。按外标 法测定，以阿奇霉素计算累积溶出量(%)。 2.1.2 系统适用性试验
标、浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为 Y=306.8862X-252.1714，r=0.9999，结果表明，阿奇 霉素质量浓度在50.221~502.21μg/mL范围内线性关系 良好。 2.1.4 专属性试验
取pH2.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.0 磷酸盐缓冲液及pH6.8磷酸盐缓冲液溶出介质作为空 白，分别进样，结果表明，4种不同pH的溶出介质， 对阿奇霉素主峰均无干扰。 2.2 “pH-溶解度”曲线的测定及溶液稳定性的考察[6~7]
在口服固体制剂的研制中，溶出曲线可直观反 映药物的体外释放速度和程度。根据溶出曲线评价 体系，可研究与原研药的区别，避免研制工作的盲 目性，还可提高体内生物等效性试验的成功率[3]。美 国FDA和日本药局方均对体外溶出曲线相似性评价 提出了相关要求，并推荐使用相似因子法评价试验 药品与对照药品的体外溶出度差异[4]。本文通过对阿 奇霉素原料溶解度进行研究，选择适宜的pH值对国 产阿奇霉素片与参比制剂的溶出曲线进行相似性评 价，可为阿奇霉素片仿制药溶出曲线数据库的建立 提供依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器
日本橙皮书未收载阿奇霉素片/胶囊的溶出曲 线，美国FDA网站收载过pH6.0磷酸盐缓冲液，桨 法，75r/min的一条溶出曲线，取样时间为10，20，30 和45min，但从2016年12月起修订为参照USP进行。
我国是仿制药大国，但是早期批准上市的仿制 药，并没有强制要求要与原研药进行一致性评价， 随着仿制药迅猛的发展，仿制药与原研药在效果和 质量上显现出了差异，无法达到替代进口原研药， 降低药价的作用[3]。为提高仿制药品内在品质，提升 制药企业整体的能力，我国在2013年就已经全面启 动仿制药一致性评价工程。
阿奇霉素片(规格：0.25g)：样品A：辉瑞制 药，批号：CD2471；样品B：辉瑞制药，批号： CD2472；样品C：辉瑞制药，批号：AW3262；样品 D：国产仿制药，批号：20190311A；样品E：国产 仿制药，批号：B1903032。 2 方法与结果 2.1 检测方法的建立 2.1.1 色谱条件
摘要：目的 建立阿奇霉素片溶出曲线测定方法，评价国产仿制阿奇霉素片与原研药在4种不同pH的溶出介质中的体外溶 出行为。方法 采用桨法，转速为75r/min，分别以pH2.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.0磷酸盐缓冲液和pH6.8磷酸盐缓 冲液为溶出介质，溶出介质体积为900mL；采用UPLC法测定阿奇霉素溶出度，并计算累积溶出量，绘制溶出曲线；评价溶出 曲线的相似度。结果 在4种不同pH的溶出介质中，国产和原研阿奇霉素片均在15min内溶出量达到了85%以上，说明两批国内 仿制产品与原研药溶出行为基本一致，判定相似。结论 本方法适用于阿奇霉素片仿制药的溶出曲线测定，可为阿奇霉素片的 质量一致性评价提供参考。
0 0.20 0.18 0.16 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0 -0.02
0
13 9 10 Imp I 13 14 17 Imp A 1918
Imp RImp Q Imp J Imp S
阿奇霉素 阿奇霉素杂质J
阿奇霉素系统适用 性对照品图谱
0.50 1.00
导原则》配制不同pH值的溶出介质，取3批阿奇霉素 原料(辉瑞公司提供)，在pH1.2、2.0、3.0、4.0、4.5、
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中国抗生素杂志2021年6月第46卷第6期
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0.20 0.18 0.16 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0 -0.02
Key words Azithromycin; Dissolution curve; UPLC; Consistency evaluation
收稿日期：2020-05-16 基金项目：国家科技重大专项课题-重大新药创制“药物一致性评价关键技术与标准研究”课题(No. 2017zx09101001) 作者简介：董斌，女，生于1986年，硕士，副主任药师，从事药品质量标准研究，E-mail: dbfire@ *通讯作者，E-mail: shndaisy@
(1 Dalian Inspection, Examination and Certification Technical Service Center, Dalian 116021; 2 The Second Hospital of Dalian Medical University, Dalian 116027)
阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究 董斌等
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阿奇霉素(azithromycin)为半合成大环内酯类的广 谱抗生素，是国家基本药物，在临床上作为一线抗感 染药物广泛使用，适用于敏感菌所致的呼吸道、皮肤 软组织感染以及衣原体、流感嗜血杆菌、链球菌、卡 他莫拉菌等引起的感染性疾病[1]。阿奇霉素于1980年 由南斯拉夫Sour Pliva公司研发，1988年率先在本国 上市，随后原研公司将全球的生产和市场开发权转 让于美国辉瑞公司和意大利Sigma Tau公司[2]。1990年 9月该产品在英国上市，1991年底获美国FDA批准。 1994年普利瓦(PLIVA)公司的片剂(0.5g，0.125g)在 我国获准进口，1996年辉瑞公司在国内生产的片剂 0.25g和0.5g两个规格在我国获得批准文号。目前， 国内公布辉瑞制药的原研制剂和原研地产化产品为 0.25g规格的阿奇霉素片的参比制剂。
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中国抗生素杂志2021年6月第46卷第6期
分析质控与制剂4-05
阿奇霉素片溶出曲线一致性评价研究
董斌1 郝爱鱼1 庄子瑜1 于楠1 孙海宁2, *
(1 大连市检验检测认证技术服务中心，大连 116021；2 大连医科大学附属第二医院，大连 116027)
1.50
阿奇霉素杂质J
2.00 2.50 t/min
阿奇霉素
3.00
3.50 4.00
阿奇霉素系统适用 性对照品标准图谱
Imp H
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Imp B 28
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20
10.00
20.00 30.00 40.00 50.00 60.00
t/min 图1 阿奇霉素系统适用性色谱图
70.00
Fig.1 System suitability chromatogram of azithromycin
Abstract Objective To establish a new method for the dissolution curve determination of azithromycin Tablet, and evaluate the dissolution profiles of domestic generic tablets and the original tablets in four different kinds of pH mediums. Methods The paddle method of dissolution determination method was adopted, the rotation speed was 75 r/min, with the dissolution medium volume of 900 mL. UPLC was adopted to determine the content of azithromycin in pH 2.0 hydrochloride acid, pH 4.5 phosphoric acid, pH 6.0 phosphoric acid and pH 6.8 phosphate buffer solution; the cumulative dissolution was calculated, the dissolution profiles were drawn, and the similarity of dissolution profiles were evaluated. Results In four different pH dissolution media, the dissolution amount of domestic and original azithromycin tablets all reached more than 85% in 15 minutes, which indicated that the dissolution behaviors of two batches of domestic imitated products were basically the same with the original azithromycin tablets, and the judgment was similar. Conclusion The method is suitable for the dissolution curve determination of azithromycin tablets, providing a reference for further quality consistency evaluation.
Waters Acquity 超高效液相色谱仪；Hanson Vision 半自动溶出仪；Mettler XS205型电子天平。 Sartorius PB-10型pH酸度计。 1.2 试药
阿奇霉素对照品(中国食品药品检定研究院，批
号：130593-201303，含量：94.4%)，阿奇霉素系统 适用性对照品(中国食品药品检定研究院，批号： 130609-201907)，阿奇霉素杂质J对照品(辉瑞公司提 供，含量：100.0%)
关键词：阿奇霉素；溶出曲线；UPLC；一致性评价 中图分类号：R978.5 文献标志码：A
Consistency evaluation of dissolution curve of azithromycin tablets
Dong Bin1, Hao Ai-yu1, Zhuang Zi-yu1, Yu Nan1, and Sun Hai-ning2
取阿奇霉素系统适用性对照品约20mg，置2mL 量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系
统适用性溶液，取2μL注入液相色谱仪，记录的色谱 图应与标准图谱一致。见图1。 2.1.3 线性关系考察
取阿奇霉素对照品0.0266g，置50mL量瓶中， 加适量乙醇使溶解，用水-乙腈(45:55)稀释至刻度， 摇匀。量取上述溶液1、2、5、6、8mL，分别置 10mL量瓶中，分别用水-乙腈(45:55)稀释至刻度， 摇匀，依“2.1.1”项下色谱条件，取上述6个浓度 的溶液进样测定，记录色谱图。以峰面积为纵坐
AU
5.0、5.5、6.0、6.4、6.8和7.4缓冲液及水中，分别制 成过饱和溶液，37℃水浴振摇过夜，使之形成过饱和 溶液。24h后取样过滤，取续滤液按上述色谱条件进 样分析，计算溶解度并绘制“pH-溶解度”曲线(表2 和图2)。
同时进行溶液稳定性考察，在1、2、4、8、12和 24h取样过滤，取续滤液进样分析，进行溶液稳定性 考察，实验结果表明阿奇霉素在pH1.2的缓冲液中全 部降解，其它pH值的缓冲液中基本稳定，且在pH6.0 以上的溶液中，溶解度随pH值的变化较为明显。 2.3 溶出曲线的测定 2.3.1 溶出介质的选择
建立超高效液相色谱法测定溶出曲线[5]，以 Waters BEH C18(50mm×2.1mm，1.7μm)为色谱柱； 以磷酸盐缓冲液(0.05mmol/L磷酸二氢钾溶液，20% 磷酸调节pH至8.2)-乙腈(45:55)为流动相；检测波长 为210nm；柱温为30℃；流速为0.5mL/min。按外标 法测定，以阿奇霉素计算累积溶出量(%)。 2.1.2 系统适用性试验
标、浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为 Y=306.8862X-252.1714，r=0.9999，结果表明，阿奇 霉素质量浓度在50.221~502.21μg/mL范围内线性关系 良好。 2.1.4 专属性试验
取pH2.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.0 磷酸盐缓冲液及pH6.8磷酸盐缓冲液溶出介质作为空 白，分别进样，结果表明，4种不同pH的溶出介质， 对阿奇霉素主峰均无干扰。 2.2 “pH-溶解度”曲线的测定及溶液稳定性的考察[6~7]
在口服固体制剂的研制中，溶出曲线可直观反 映药物的体外释放速度和程度。根据溶出曲线评价 体系，可研究与原研药的区别，避免研制工作的盲 目性，还可提高体内生物等效性试验的成功率[3]。美 国FDA和日本药局方均对体外溶出曲线相似性评价 提出了相关要求，并推荐使用相似因子法评价试验 药品与对照药品的体外溶出度差异[4]。本文通过对阿 奇霉素原料溶解度进行研究，选择适宜的pH值对国 产阿奇霉素片与参比制剂的溶出曲线进行相似性评 价，可为阿奇霉素片仿制药溶出曲线数据库的建立 提供依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器
日本橙皮书未收载阿奇霉素片/胶囊的溶出曲 线，美国FDA网站收载过pH6.0磷酸盐缓冲液，桨 法，75r/min的一条溶出曲线，取样时间为10，20，30 和45min，但从2016年12月起修订为参照USP进行。
我国是仿制药大国，但是早期批准上市的仿制 药，并没有强制要求要与原研药进行一致性评价， 随着仿制药迅猛的发展，仿制药与原研药在效果和 质量上显现出了差异，无法达到替代进口原研药， 降低药价的作用[3]。为提高仿制药品内在品质，提升 制药企业整体的能力，我国在2013年就已经全面启 动仿制药一致性评价工程。
阿奇霉素片(规格：0.25g)：样品A：辉瑞制 药，批号：CD2471；样品B：辉瑞制药，批号： CD2472；样品C：辉瑞制药，批号：AW3262；样品 D：国产仿制药，批号：20190311A；样品E：国产 仿制药，批号：B1903032。 2 方法与结果 2.1 检测方法的建立 2.1.1 色谱条件
摘要：目的 建立阿奇霉素片溶出曲线测定方法，评价国产仿制阿奇霉素片与原研药在4种不同pH的溶出介质中的体外溶 出行为。方法 采用桨法，转速为75r/min，分别以pH2.0盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.0磷酸盐缓冲液和pH6.8磷酸盐缓 冲液为溶出介质，溶出介质体积为900mL；采用UPLC法测定阿奇霉素溶出度，并计算累积溶出量，绘制溶出曲线；评价溶出 曲线的相似度。结果 在4种不同pH的溶出介质中，国产和原研阿奇霉素片均在15min内溶出量达到了85%以上，说明两批国内 仿制产品与原研药溶出行为基本一致，判定相似。结论 本方法适用于阿奇霉素片仿制药的溶出曲线测定，可为阿奇霉素片的 质量一致性评价提供参考。
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13 9 10 Imp I 13 14 17 Imp A 1918
Imp RImp Q Imp J Imp S
阿奇霉素 阿奇霉素杂质J
阿奇霉素系统适用 性对照品图谱
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