荧光流式细胞术原理

荧光流式细胞术原理
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是一种先进的细胞分析技术，其工作原理可以概括为以下几个步骤：
首先，待测细胞需要经过染色处理，使其表面或内部特定的化学成分可以被荧光标记。

这些标记的细胞随后被制成单细胞悬液。

接下来，这些细胞悬液被送入流式细胞仪的流动室。

流动室中有一个液流驱动系统，它将细胞悬液以一定速度推动，使细胞单行排列，依次通过检测区域。

在检测区域，细胞会经过一束激光的照射。

激光激发荧光素，使得标记的细胞发出荧光。

这些荧光信号和细胞散射光会被不同的探测器接收。

其中，前向光电二极管检测细胞散射光，这种信号通常用来反映细胞的大小；而90度方向的光电倍增管（PMT）则接收荧光信号，这些信号代表了细胞表面抗原的强度或核内物质的浓度。

接收到的电信号经过光电转换器转换为电信号，再通过模数转换器转换为数字信号，由计算机进行采集和处理。

计算机对采集到的信号进行分析，将分析结果显示在屏幕上，也可以打印出来或以数据文件的形式存储，便于后续查询和分析。

此外，流式细胞仪还具有细胞分选功能。

通过在流动室喷口处安装超高频的压电晶体，可以产生液滴，使得待测细胞分散在这些液滴中。

液滴带有正负不同的电荷，当它们流经带有几千伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，最终落入各自的收集容器中，从而实现细胞的分离。

总的来说，流式细胞术通过高速、多参数的细胞分析，能够对细胞进行定量分析和分选，广泛应用于免疫学、血液学、细胞生物学等多个领域。