检测BRIT1基因对诊断结肠癌的临床价值

性别 、 年龄 、 肿瘤大小 、 ｕ ｅ 分期 、 Ｄ ｋｓ 细胞分化程度 和淋 巴结 转移 等相关临床病 理指标。根据 Ｒ Ｔ—Ｐ Ｒ结果 ， ４ Ｃ 以 ０例
结 肠 癌 组 织 中 Ｂ Ｉ１ｍ Ｎ 表 达 量 的 均 数 （ ） 对 应 的 ＲＴ Ｒ Ａ Ｘ． 与
≥３０ｅ ２ ． ｍ者 ９例 ； 临床 Ｄ ｋｓ ｕｅ 分期 Ａ或 Ｂ者 ２ ６例 ， ｃ或 Ｄ 者１ ； ４例 肿瘤 细胞分化程度为 中高分化者 ２ ８例 ， 低分化者 ｌ ２例； 无淋巴结转移者 ２ ， ７例 有淋 巴结转移者 １ 。 ３例
ｍ Ｎ Ｒ Ａ在结肠癌组 织和正常结肠组 织中 的表 达情况 ， 并分 析与结肠癌临床病理特征的关系 ， 研究其临床意义。
１ 材 料 与 方 法
产物长度５０ｂ 。 Ｔ— Ｃ ０ ｐ Ｒ Ｐ Ｒ反应采用两步法 ， 先将 Ｒ Ａ逆转 Ｎ
录为 ｃ Ｎ Ｄ Ａ。按照试剂盒说明书，Ｃ Ｐ Ｒ采用５ Ｌ ０ 反应体系。
４８ ６
Ｖ １２ Ｎ ． ｏ． ｏ４ １
Ａｅ ｏ ｐ ｃ ｄ ｃｎ ｒ ｓ ａ ｅ Ｍｅ ｉ ｉ ｅ
Ａ ｒ ００ ｐ １ ２
检 测 Ｂ Ｉ１基 因对 诊 断 结肠 癌 的临床 价值 ＲＴ
张 安 生
（ 龙 江 省农 垦 总局 宝 泉 岭 分 局 中 心 医 院病 理 科 ， 龙 江 黑 黑 萝北 １４ １ ） ５ ２ １
结肠癌是我 国常 见的 消化系统 恶性 肿瘤之 一。结肠
癌 的发 生 、 展 是 涉 及 到 多 因 素 、 步骤 的 复 杂 过 程 ， 此 发 多 在 过 程 中涉 及 癌 基 因 的 突变 和 活 化 、 癌 基 因 的 丢 失 或 表 达 抑
的纯度。 １２ ２ 逆转 录 多 聚 酶链 反 应 （ Ｔ—Ｐ Ｒ Ｒ ．． Ｒ Ｃ ） Ｔ—Ｐ Ｒ试 剂 Ｃ 盒 Ｄ ０９ Ｒ １Ａ购 自大 连 宝 生物 公 司 。结 合 Ｇ ｎＢｎ （ 因库 ） ｅｅ ａｋ 基 序 列 设 计 引 物 ， ＲＴ Ｂ Ｉ１引 物 上 游 ： ’ ＇ Ｃ ５ １Ｃ Ｇ Ａ Ｇ ｒ Ｔ Ｇ Ｃ℃ ． Ｉ
摘要 目的 ： 究 Ｂ Ｉ１ 因在结肠癌组织 中 ｍ Ｎ 研 ＲＴ 基 Ｒ Ａ表达水平及 其临床意 义。方 法 ： 用逆转录聚合 酶链 采
反 应（ Ｔ—Ｐ Ｒ） 检测 了 Ｂ Ｉ１ 因在 ４ 结肠癌组 织及其对应的切 缘正常结肠组 织中 ｍ Ｎ Ｒ Ｃ ， ＲＴ 基 ０例 Ｒ Ａ的表达水平， 并
Ｔ Ｇ Ｔ ’ 下游 ： ’一Ｔ Ｃ Ａ Ｇ Ｃ Ｇ Ａ Ａ Ｇ Ｔ３’ 产物 Ａ Ｃ３ ； ５ ＣＧ Ｇ Ａ ＴＧ Ｇ Ｔ Ｇ Ｉ ， 长度２ ５ｂ ； Ａ Ｄ 内参 引 物 上 游： ’Ｇ ７ ｐ Ｇ Ｐ Ｈ ５ 一ａ Ａ Ｇ １ Ａ Ｇ℃Ｇ
Ｇ Ｇ Ｃ Ａ Ｇ ’下 游 ： Ａ ＴＡ Ｃ ３ ， ５’Ｃ Ａ Ｇ Ｔ Ｃ Ｔ Ｇ Ｔ Ａ Ｃ ’ Ａ Ａ １Ｉ Ａ Ｉ Ａ Ｇ Ｃ ３ ， ｒＴ Ｇ
结肠癌组织 ４ ， ０例 以及对应切缘正常结肠癌组织 ４ ０例（ 距 肿块边缘５ ０ｅ ． ｍ以上） 。标本离体后立 即放人 一８ ￣ ｏｃ冰箱 保存 ， 以备提取组织总 Ｒ Ａ。本组病例所有患者术前未接 Ｎ 受过放射 、 化学或 免疫 等多种抗 肿瘤 治疗 ； 术后 标本 均经 病理科确认 。其 中男性 ２ ４例 ， 女性 ｌ ， ６例 年龄 ３ ７ ５— ６岁 ，
Ｐ Ｒ反应 条 件 ：４ Ｃ ９ ℃变 性 ４ｍ ｎ ，４ ３ ，８ ４ 和 ｉ后 ９ ℃ ０Ｓ５ ℃ ｏｓ
７ ￣ ０Ｓ顺 序循 环 ３ ２Ｃ ４ ； ５次 ； 后 ７ ℃延 伸７ｍｎ ２ 琼 脂 糖 最 ２ ｉ。％
１ １ 材料 ．
收集我 院 ２０ Ｏ —２０ ０ ０ ７一 １ ０ ９— ８间手术切除 的
分析 Ｂ Ｉ１基 因表达水平与结肠癌临床病理特征 的关系， 究其临床意义。结果 ： Ｔ—Ｐ Ｒ结果显示 Ｂ ＩＩ基 ＲＴ 研 Ｒ Ｃ ＲＴ 因在结肠癌组织 中的表 达较切缘正常结肠组织显著下调 （ ０ ０ ） Ｒ Ｔ Ｒ Ａ表达水平 与患者年龄 、 别、 Ｐ＜ ．５ 。Ｂ Ｉ１ｍ Ｎ 性 肿瘤 大小无明显相关性 （ ０ ０ ） 但 与结肠癌 Ｄ ｋ ｓ Ｐ＞ ．５ ， ｕ ｅ 分期 、 细胞分化程度 及有 无淋 巴结转移相 关（ Ｐ＜００ ） ．５ 。
中位 年龄 ５ ２岁 。临 床 病 理 特 征 中 ， 瘤 ＜ ． ｍ者 １ 例 ， 肿 ３ ０ｃ １
凝胶 电泳 ， 凝胶 自动成像 系统上摄像并分析各条带吸光度值
（ 基因表达值 ＝ Ｒ Ｔ／ Ａ Ｄ 。 Ｂ Ｉ１Ｇ Ｐ Ｈ） １２３ 临床病理特征分析 ．． 收集 ４ ０例结肠癌组织标 本的
失调以及凋亡调节机制紊乱等分子生物学改变。Ｂ Ｉ１ ＲＴ 基 因作为细胞有 丝分 裂监控体 系最主要 的关 卡基 因之一 ， 参 与细胞周期和细胞增殖 的调 控 ， 肿瘤的发生 中有重要意 在
义 。本 研 究 应 用 Ｒ Ｔ—Ｐ Ｒ 方 法 ， 基 因 水 平 研 究 Ｂ Ｉ１ Ｃ 从 Ｒ Ｔ
结论 ： ＲＴ 基 因在结肠癌 组织中显著的下调 ， Ｂ Ｉ１ 其表达水平与结肠癌发 生发展过程 密切 相关。
关键词 Ｂ Ｉ１ 结肠 癌 ； Ｔ—Ｐ Ｒ ＲＴ ； Ｒ Ｃ
中图 分 类 号 ：Ｒ ３ ． ７５ ３ ５
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章 编 号 ：１０ ９ ３ （０ ０ ０ ０６ ０ ０ ５— ３４ ２ １ ）４— ８— ２ ４
１２ 方 法 ．
４ ０例正常结肠组织 Ｂ Ｉ１ｍＲ Ａ表 达量 的均数 （ ２ 的 比 Ｒ Ｔ Ｎ ｘ） 值 （ Ｘ ： ． １ 为界 ， Ｘ／ ０５ ） 分为 Ｂ Ｉ１低表达组 （ ｌ ２ 和 ＲＴ ｎ ＝２ ） 高 Ｂ Ｉ１ ＲＴ 表达组 （ ２＝１ ） ｎ ８ 。每组再根 据性别 、 龄 、 瘤 年 肿 大小 、 ｕ ｅ 分期 、 Ｄ ｋｓ 细胞分 化程度 、 无淋 巴结转 移等 临床 有 病理特Байду номын сангаас分组 ， 比较 Ｂ Ｉ１ Ｒ Ｔ 表达水平与 Ｈ Ｃ临床病理特征 Ｃ